简述基因组文库构建的基本操作？

题目

简述基因组文库构建的基本操作？

相似考题

1.以下关于cDNA文库和基因组文库的关系说法正确的是()A、cDNA文库比基因组文库大B、cDNA文库比基因组文库小C、cDNA文库和基因组文库一样大D、二者大小随机，不能比较

2.重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）A、通过PCR合成B、化学直接合成C、构建cDNA文库D、构建基因组文库E、从基因组DNA中直接提取

3.简述cDNA的扣除文库的构建。

4.构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的( )。A.染色体DNA B.线粒体DNA C.总mRNA D.rRNA E.tRNA

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  • 第1题：

    简述构建cDNA文库的基本操作？


    正确答案:（1）细胞总RNA的提取和mRNA分离
    （2）第一链cDNA和第二链cDNA合成并连接产生重组DNA
    （3）将重组DNA通过载体转入适当的宿主
    （4）筛选鉴别重组克隆
    （5）扩增和保存文库

  • 第2题：

    构建基因组文库最常用的的方法是（）和（）部分消化法。


    正确答案:λ噬菌体载体；限制性内切核酸酶

  • 第3题：

    请设计试验，构建理想的小鼠基因组文库。


    正确答案:一、分离纯化基因组DNA。用小鼠的肝脏来提取DNA：
    ①取适量的新鲜肝脏制备组织匀浆。
    ②加入细胞裂解液使细胞充分的裂解。
    ③加入蛋白酶K消化细胞，注意混匀但是不能太剧烈以免DNA断裂。
    ④加氯仿去除蛋白质。混匀后离心后，分三层上层是DNA，这一步吸取上层时最好用剪过的枪头避免吸入蛋白质等杂质。
    ⑤加入异丙醇出现絮状物，离心去除上清液，加入氯化钠溶解沉淀，加入RNA酶去除RNA。
    ⑥乙醇洗涤DNA沉淀，并用TE缓冲液溶解。
    ⑦琼脂糖电泳检测DNA的质量。
    二、切割DNA成合适的片段以用于克隆。将DNA切割成大小为4~10kb的片段。
    三、载体DNA的制备。用λ噬菌体载体。载体用Sau3A酶解，用氯化铯密度梯度离心。
    四、基因组DNA与载体连接。连接反应中要考虑两个因素，即噬菌体两臂DNA插入片段的比例和反应混合液中DNA的浓度。
    五、利用体外包装系统将多联体组装成完整的颗粒。
    六、重组载体转化受体感受态细胞
    七、扩增DNA文库。大肠杆菌的液体培养基的培养。
    八、基因组文库的鉴定。

  • 第4题：

    M13噬菌体适用于（）。

    • A、构建基因组文库
    • B、构建cDNA文库
    • C、克隆较大的DNA片段
    • D、克隆单链外源DNA片段进行序列分析
    • E、以上都对

    正确答案:D

  • 第5题：

    下列关于cDNA文库和该生物基因组文库的说法中，不正确的是（）

    • A、cDNA文库中的基因都没有启动子，而基因组文库中的基因有启动子
    • B、一种生物的基因组文库只有一种，但是cDNA文库可以有多种
    • C、获得cDNA文库中的DNA和基因组文库中的DNA所需的酶相同
    • D、cDNA文库中某个基因与基因组文库中某个基因控制的性状可能相同

    正确答案:C

  • 第6题：

    cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些？


    正确答案: （1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列；cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。
    （2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响；cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列，因它受发育和调控因子的影响。
    （3）基因组文库中的编码基因是真实基因，含有内含子和外显子，而cDNA文库克隆的是不含内含子的功能基因。

  • 第7题：

    什么是基因组文库（genomic library）？构建基因组文库涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？


    正确答案:基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或粘粒作载体，包括下列过程：
    （1）大片段高分子量染色体DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组DNA导入寄主细胞；
    （6）在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和粘粒载体构建基因组文库、YAC文库、BAC文库等。基因组文库和遗传学上的基因库是完全不同的概念。基因库（gene pool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。

  • 第8题：

    简述cDNA文库构建步骤。


    正确答案: （1）酶促合成法制取cDNA，（2）从组织或细胞中制备总RNA和mRNA，（3）合成cDNA第一条链（4）cDNA第二条链的合成

  • 第9题：

    单选题
    根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA 文库等。在下列文库中，（）属 cDNA 文库。
    A

    YAC文库

    B

    MAC文库

    C

    扣减文库

    D

    BAC文库


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    填空题
    构建基因组文库时连接方法主要是（）；而构建 cDNA 文库，可用（）；或（）。

    正确答案： 黏性末端连接,接尾连接法,人工接头连接法
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    简述构建突变基因文库的主要过程。

    正确答案： 突变基因文库的主要过程：
    1）选择合适的载体（质粒、噬菌体、黏粒、噬菌粒）；
    2）基因重组（DNA连接酶连接突变基因和载体DNA）；
    3）组装突变基因文库（转入受体细胞或包装成有感染活性的重组噬菌体）。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    什么是基因文库？简述其构建的基本步骤。

    正确答案： 基因文库是指含有某种生物基因组中不同基因片段的DNA重组体的一群克隆。
    构建的基本步骤如下：
    （1）制备染色体DNA，并用合适的限制酶或机械切割的方法降解DNA为大小不等的插入片段。
    （2）选择处理载体。
    （3）将载体与外源DNA重组。
    （4）重组DNA分子在体外包装成噬菌体颗粒，便可直接用于筛选感兴趣的基因。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    构建基因组文库时需要（）。

    • A、限制性核酸内切酶
    • B、核酸外切酶
    • C、RNA聚合酶
    • D、DNA酶

    正确答案:A

  • 第14题：

    请举例说明构建噬菌体cDNA文库的主要操作。


    正确答案:先提取mRNA，反转录成cDNA。
    再把cDNA进行PCR扩增，导入感受态大肠杆菌。
    送测——把连接好的大肠杆菌，扩大培养，提取好的大肠杆菌送到测序公司测序。公司有大肠杆菌的序列，不符合的就是转录进去的cdna序列。

  • 第15题：

    简述在基因组文库中通常提高文库代表性的两种策略。


    正确答案: 1.用机械切割法或限制性内切核酸酶切割法随机断裂DNA，以保证克隆的随机性；
    2.增加文库重组克隆的数目，以提高覆盖基因组的倍数。

  • 第16题：

    用某种生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做这种生物的（）

    • A、cDNA文库
    • B、基因组文库
    • C、cDNA文库或基因组文库
    • D、部分基因文库和基因组文库

    正确答案:A

  • 第17题：

    什么是基因组文库法？其构建方法是怎样的？


    正确答案: 采用限制性酶将基因组DNA切成片段，每一DNA片段都与一个载体分子拼接成重组DNA。将所有的重组DNA分子都引入宿主细胞并进行扩增，得到分子克隆的混合体。简单的说就是汇集某一基因组所有DNA序列的重组DNA群体。以λ噬菌体和柯斯质粒为载体构建。
    其具体的构建方法：
    （1）从生物体提取大片断的基因组DNA；
    （2）用适当的限制性内切酶（常为4碱基识别位点）进行部分酶切或超声波打断基因组DNA；
    （3）在琼脂凝胶电泳上或蔗糖梯度离心筛选适当长度的DNA片断（根据载体的要求）；
    （4）载体的酶切、回收；
    （5）将处理好的基因组DNA片断与载体连接；
    （6）将重组子导入宿主细胞；
    （7）文库的鉴定、收集、保存。

  • 第18题：

    什么是基因组文库（genomiclibrary）？构建基因组文库，涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？


    正确答案: 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：
    （1）高分子量染色体DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组DNA导人寄主细胞；
    （6）筛选。基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库（genepool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC文库、BAC文库等。

  • 第19题：

    简述构建突变基因文库的主要过程。


    正确答案:突变基因文库的主要过程：
    1）选择合适的载体（质粒、噬菌体、黏粒、噬菌粒）；
    2）基因重组（DNA连接酶连接突变基因和载体DNA）；
    3）组装突变基因文库（转入受体细胞或包装成有感染活性的重组噬菌体）。

  • 第20题：

    问答题
    什么是基因组文库（genomic library）？构建基因组文库，涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？

    正确答案： 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组 DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体 DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：
    （1）高分子量染色体 DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组 DNA导人寄主细胞；
    （6）筛选。
    基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库（gene p001）是指在 进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库 的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC 文库、BAC 文库等。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的（　　）。
    A

    染色体DNA

    B

    线粒体DNA

    C

    总mRNA

    D

    rRNA

    E

    tRNA


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）
    A

    通过PCR合成

    B

    化学直接合成

    C

    构建cDNA文库

    D

    构建基因组文库

    E

    从基因组DNA中直接提取


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    什么是基因组文库（genomic library）？构建基因组文库涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？

    正确答案： 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或粘粒作载体，包括下列过程：
    （1）大片段高分子量染色体DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组DNA导入寄主细胞；
    （6）在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和粘粒载体构建基因组文库、YAC文库、BAC文库等。基因组文库和遗传学上的基因库是完全不同的概念。基因库（gene pool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。
    解析： 暂无解析

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