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  • 第1题:

    构建cDNA文库时,首先需分离细胞的

    A.染色体DNA

    B.线粒体DNA

    C.mRNA

    D.cDNA


    正确答案:C
    解析:基因文库可分为基因组DNA文库和cDNA文库。①基因组DNA文库是指包含某一生物细胞全部基因组DNA序列的克隆群体,它以DNA片段的形式贮存着某一生物的全部基因组DNA信息。基因组DNA文库的构建是将纯化的细胞基因组DNA(染色体DNA)用适当的限制性内切酶消化,获得一定大小的DNA片段,将这些片段克隆到噬菌体载体中,从而获得一群含有不同DNA片段的噬菌体。②cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经反转录而合成的cDNA序列的克隆群体,它以cDNA片段形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。cDNA文库的构建是将组织细胞的mRNA经过反转录合成cDNA,后者被克隆进入质粒或噬菌体载体,转化宿主细胞后获得的克隆群体。

  • 第2题:

    构建一个理想的cDNA文库需要考虑的因素有哪些?


    正确答案: A.cDNA文库的质量
    (1)文库的代表性:是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息(即mRNA种类),是体现文库质量的最重要指标。
    (2)重组cDNA片段的序列完整性:5’端非翻译区,中间的编码序列和3’端非翻译区,文库中重组cDNA片段尽可能完整的反应出天然基因的结构,cDNA是否完整,对文库使用价值的影响并不是绝对的 完整性这一指标要根据研究目的及筛选方法来灵活考虑,使细胞中表达出的mRNA在构建的cDNA文库中尽可能含有相应其各部分序列的重叠cDNA片段是其中一种折中的做法。
    B.文库筛选可选择的具体方法,决定文库筛选方法的主要因素是
    1.构建文库的克隆载体系统;
    2.相应的宿主细胞系统。
    最理想的情况是对于具体构建出的一个cDNA文库,应能够使用多种筛选方法,有效地分离鉴定出目的基因,从而使研究者能够在已有研究条件上,在文库筛选的具体方法上有灵活的选择余地。

  • 第3题:

    简述构建cDNA文库的基本操作?


    正确答案:(1)细胞总RNA的提取和mRNA分离
    (2)第一链cDNA和第二链cDNA合成并连接产生重组DNA
    (3)将重组DNA通过载体转入适当的宿主
    (4)筛选鉴别重组克隆
    (5)扩增和保存文库

  • 第4题:

    M13噬菌体适用于()。

    • A、构建基因组文库
    • B、构建cDNA文库
    • C、克隆较大的DNA片段
    • D、克隆单链外源DNA片段进行序列分析
    • E、以上都对

    正确答案:D

  • 第5题:

    构建cDNA文库需要用到哪些工具酶?


    正确答案: 逆转录酶,DNA聚合酶I,单链核酸酶S1,末端转移酶,限制性核酸内切酶,DNA连接酶。

  • 第6题:

    基因文库和cDNA文库有何不同,为什么要建立cDNA文库?


    正确答案:基因文库是指整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和。cDNA文库是指细胞全部mRNA逆转录成cDNA并被克隆的总和。cDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。  真核生物的基因是断裂的,需经RNA转录后加工过程才使编码序列拼接在一起;真核生物的基因不能直接在原核生物中表达,只有加工成熟的mRNA经逆转录合成的cDNA接上原核生物表达控制元件,才能在原核生物中表达;另外,真核生物细胞中只有一小部分mRNA进行表达,mRNA的稳定性差。因此,需要构建cDNA文库,用于基因表达等方面的研究。

  • 第7题:

    什么是cDNA文库法?它的构建流程是什么?


    正确答案: cDNA:指体外用逆转录酶催化,以mRNA为模板合成的互补DNA。
    cDNA文库:汇集某生物成熟mRNA为模板逆转录而成cDNA序列的的重组DNA群体.Λ噬菌体和质粒为载体构建。
    操作程序
    (1)总RNA的提取;注意抑制RNA酶的活性,盐酸胍,二乙基焦碳酸;
    (2)mRNA的分离:选用高度分化的组织,末端带有polyA;
    (3)cDNA双链的合成;
    (4)cDNA与载体的连接;
    (5)噬菌体的包装以及转染或质粒的转化。

  • 第8题:

    问答题
    cDNA文库的构建?

    正确答案: 以mRNA为模板,在逆转录酶的催化下,在体外经过逆转录过程产生出双链cDNA,然后再克隆到载体中,转化受菌体,经过繁殖扩增,就形成cDNA文库
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    单选题
    构建cDNA文库时,首先须分离细胞的(  )。
    A

    染色体DNA

    B

    线粒体DNA

    C

    总mRNA

    D

    总tRNA

    E

    总rRNA


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    单选题
    重组DNA技术中,目的基因的获取方法不包括()
    A

    通过PCR合成

    B

    化学直接合成

    C

    构建cDNA文库

    D

    构建基因组文库

    E

    从基因组DNA中直接提取


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    问答题
    构建一个理想的cDNA文库需要考虑的因素有哪些?

    正确答案: A.cDNA文库的质量
    (1)文库的代表性:是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息(即mRNA种类),是体现文库质量的最重要指标。
    (2)重组cDNA片段的序列完整性:5’端非翻译区,中间的编码序列和3’端非翻译区,文库中重组cDNA片段尽可能完整的反应出天然基因的结构,cDNA是否完整,对文库使用价值的影响并不是绝对的 完整性这一指标要根据研究目的及筛选方法来灵活考虑,使细胞中表达出的mRNA在构建的cDNA文库中尽可能含有相应其各部分序列的重叠cDNA片段是其中一种折中的做法。
    B.文库筛选可选择的具体方法,决定文库筛选方法的主要因素是
    1.构建文库的克隆载体系统;
    2.相应的宿主细胞系统。
    最理想的情况是对于具体构建出的一个cDNA文库,应能够使用多种筛选方法,有效地分离鉴定出目的基因,从而使研究者能够在已有研究条件上,在文库筛选的具体方法上有灵活的选择余地。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    基因文库和cDNA文库有何不同,为什么要建立cDNA文库?

    正确答案: 基因文库是指整套由基因组DNA片段插入克隆载体获得的分子克隆之总和。cDNA文库是指细胞全部mRNA逆转录成cDNA并被克隆的总和。cDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。  真核生物的基因是断裂的,需经RNA转录后加工过程才使编码序列拼接在一起;真核生物的基因不能直接在原核生物中表达,只有加工成熟的mRNA经逆转录合成的cDNA接上原核生物表达控制元件,才能在原核生物中表达;另外,真核生物细胞中只有一小部分mRNA进行表达,mRNA的稳定性差。因此,需要构建cDNA文库,用于基因表达等方面的研究。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    关于cDNA文库的叙述,哪些是正确的


    A.仅代表构建文库取材细胞当时表达的成套基因
    B.同一种细胞在发育的不同阶段构建的文库,它们包含的基因不尽相同
    C.正常肝细胞与肝癌细胞构建的cDNA文库,两者包含的基因不尽相同
    D. cDNA文库中不包含内含子序列及基因的调控序列

    答案:A,B,C,D
    解析:

  • 第14题:

    重组DNA技术中,目的基因的获取方法不包括()

    • A、通过PCR合成
    • B、化学直接合成
    • C、构建cDNA文库
    • D、构建基因组文库
    • E、从基因组DNA中直接提取

    正确答案:E

  • 第15题:

    请举例说明构建噬菌体cDNA文库的主要操作。


    正确答案:先提取mRNA,反转录成cDNA。
    再把cDNA进行PCR扩增,导入感受态大肠杆菌。
    送测——把连接好的大肠杆菌,扩大培养,提取好的大肠杆菌送到测序公司测序。公司有大肠杆菌的序列,不符合的就是转录进去的cdna序列。

  • 第16题:

    下列关于cDNA文库和该生物基因组文库的说法中,不正确的是()

    • A、cDNA文库中的基因都没有启动子,而基因组文库中的基因有启动子
    • B、一种生物的基因组文库只有一种,但是cDNA文库可以有多种
    • C、获得cDNA文库中的DNA和基因组文库中的DNA所需的酶相同
    • D、cDNA文库中某个基因与基因组文库中某个基因控制的性状可能相同

    正确答案:C

  • 第17题:

    cDNA library:cDNA文库


    正确答案: 是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。

  • 第18题:

    简述cDNA文库构建步骤。


    正确答案: (1)酶促合成法制取cDNA,(2)从组织或细胞中制备总RNA和mRNA,(3)合成cDNA第一条链(4)cDNA第二条链的合成

  • 第19题:

    用逆转录方法构建的cDNA文库不具有(),但有启动子与终止子。


    正确答案:内含子

  • 第20题:

    单选题
    根据构建方法的不同,基因文库分为基因组文库、cDNA 文库等。在下列文库中,()属 cDNA 文库。
    A

    YAC文库

    B

    MAC文库

    C

    扣减文库

    D

    BAC文库


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    填空题
    构建基因组文库时连接方法主要是();而构建 cDNA 文库,可用();或()。

    正确答案: 黏性末端连接,接尾连接法,人工接头连接法
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    在构建cDNA文库时,为什么常用GC接尾而不用AT接尾法连接?

    正确答案: GC接尾法,可通过载体的PstI的切点回收外源片段,而AT接尾尚无回收的好办法。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    简述cDNA文库的构建过程。

    正确答案: 构建cDNA文库的主要步骤:
    ①mRNA分离;
    ②cDNA第一链合成;
    ③cDNA第二链合成
    ④载体与cDNA的连接;
    ⑤噬菌体的包装及转染;
    ⑥cDNA文库的扩增和保存。
    解析: 暂无解析