PCR的基本原理是什么？
题目
PCR的基本原理是什么？
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第1题：
简述PCR技术的基本原理。
正确答案: P.CR技术的基本原理：类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：1）模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
2）模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；3）引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。（Plateau）。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 -
第2题：
PCR的原理是什么？
正确答案:D.NA合成是以一股DNA单链为模版，在引物存在下，DNA聚合酶沿模版以5’→3’方向延伸的过程。
PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，早体外进行靶DNA的重复合成。PCR扩增包括DNA变性、引物与靶DNA退火、引物延伸三个步骤。 -
第3题：
曲线整正的基本原理中四条基本原理的内容是什么？
正确答案: 1.现场正矢的合计等于计划正矢的合计；
2.曲线上任意点的拨动，对相邻点正矢的影响量为拨动点拨动量的二分之一，其方向相反；
3.曲线上各点正矢之和为一常数；
4.曲线上各点正矢差之代数和为零，即曲线终点的拨量等于零。 -
第4题：
PCR的基本原理是什么？用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息？
正确答案: （1）DNA半保留复制的原理，在体外进行DNA的变性、复性和引物延伸。
（2）至少要预先知道足够合成一对引物的靶DNA序列。 -
第5题：
聚合酶链式反应（PCR）的基本原理包括（）。
- A、变性
- B、退火
- C、延伸
- D、杂交
正确答案:A,B,C -
第6题：
什么叫PCR？它的基本原理和反应过程有哪些？
正确答案:PCR也叫聚合酶链式反应，是DNA片段体外扩增的一种技术。在微量离心管中，加入适量的缓冲液，微量的模板DNA，四种脱氧单核苷酸，耐热性多聚酶，一对合成DNA的引物，通过高温变性、低温退火和中温延伸三个阶段为一个循环，每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍，一般样品是经过30次循环，最终使基因放大了数百万倍；扩增了特异区段的DNA带。 -
第7题：
问答题PCR的原理是什么？正确答案： D.NA合成是以一股DNA单链为模版，在引物存在下，DNA聚合酶沿模版以5’→3’方向延伸的过程。
PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，早体外进行靶DNA的重复合成。PCR扩增包括DNA变性、引物与靶DNA退火、引物延伸三个步骤。解析： 暂无解析 -
第8题：
问答题PCR全过程的实质是什么，且PCR循环又可分为哪三个过程？正确答案： 实质：
在适当条件下进行热变性-复性-延伸的多次重复。
过程：
1、加热变性
2、退火
3、延伸解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题PCR的基本原理是什么？正确答案： PCR的基本工作原理是以拟扩增的DNA片段为模板，以一对分别与模板DNA互补的寡核苷酸为引物，在DNA聚合酶的作用下，根据半保留复制的机制沿着模板DNA链延伸，直至新的DNA合成。不断重复这一过程，则可使目的DNA片段得到扩增。解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述PCR循环测序的基本原理。正确答案： PCR技术能够快速、特异性地扩增靶DNA，应用PCR技术测定DNA序列分为两个步骤：先利用PCR扩增靶序列片段，制备测序模板，然后再利用PCR直接测定序列。PCR测序采用了热循环高效合成DNA的特性并结合双脱氧核苷酸终止法，使引物链终止的延伸产物数量在热循环过程中得到增加，因此称为循环测序。
每个测序循环包括：
①PCR扩增制备的模板DNA变性成单链形式；
②标记引物与其中的一条链上的互补序列退火；
③退火后的引物在耐热DNA聚合酶催化下发生链延伸终止反应。
本次循环产生的模板链与延伸终止链形成的双链的产物，在下一轮测序循环中，再次被变性，释放出模板链，作为又一轮引发反应的模板，同时积累下一轮循环产生的链终止产物。
上述循环步骤重复20~40次，使链终止产物以线性方式获得扩增。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题何谓PCR？试述PCR技术的基本原理和影响因素。正确答案： P.CR是一种体外酶促扩增特异DNA片段的技术，其原理类似DNA的体内扩增。它包括：PCR包括三个基本过程：①变性（denaturation），即在较高温度（93℃～98℃）使双链模板DNA变性解链成单链DNA，以提供复制的模板；
②退火（annealing），即在较低温度（37℃～65℃）使加入的引物与待扩增DNA区域特异性地结合，以提供DNA复制起始的3′―OH；
③延伸（extension），即在适当的温度（70℃～75℃）下，DNA聚合酶从特异性结合到DNA模板上的引物3′-OH端开始，根据碱基互补配对原则，按照待扩增区域的核苷酸序列，进行DNA链的延伸，即合成新的DNA分子。这三个过程组成一个循环周期；每个周期合成的产物又可作为下一个周期的模板，如此循环往复，经过n轮循环后，靶DNA的拷贝数理论上呈2n增长。
影响PCR反应的因素主要有：引物、TaqDNA聚合酶、dNTP、模板和Mg2+离子，此外，pH、温度、循环次数也会影响PCR反应。解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题在PCR扩增时，PCR扩增后有时出现涂抹带或片状带，其原因是什么？应该如何改进？正确答案： P.CR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。
其对策有：
①减少酶量，或调换另一来源的酶；
②减少dNTP的浓度；
③适当降低Mg2+浓 度；
④增加模板量，减少循环次数。解析： 暂无解析 -
第13题：
阐述PCR基本原理。
正确答案: PCR基本原理是体外对特定的双链DNA片段（或称靶DNA）进行高效扩增，故又称基因体外扩增法。首先将靶DNA双链加热变性为单链，然后加入两段人工合成的与靶DNA两端邻近序列互补的核苷酸片段作为引物，该对引物与互补的DNA单链硷基互补结合后，在有DNA多聚酶和4种dNTPs底物存在的情况下，引物沿模板DNA链按5′→3′延伸，自动合成新的DNA双链，经25-35个循环，可将靶DNA序列扩增近百万倍。 -
第14题：
聚合酶链反应（PCR的）原理是什么？
正确答案:DNA的合成是以一股DNA单链为模板，在引物存在下，DNA聚合酶沿模板以5’到3’的方向延伸。PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧顺序互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。扩增包括3个步骤；DNA变性，引物与靶DNA退火，引物延伸。 -
第15题：
容错PCR的关键是什么？为什么？
正确答案:关键是控制DNA的突变频率；频率太高，产生的绝大多数酶将失去活性；太低，野生型的背景太高，样品的多样性则较少。对于每一DNA序列来说，合理的碱基突变数是1-3。理想的碱基置换率和容错PCR的最佳条件则依赖于随机突变的目标DNA片段的长度。 -
第16题：
何谓PCR？试述PCR技术的基本原理和影响因素。
正确答案: P.CR是一种体外酶促扩增特异DNA片段的技术，其原理类似DNA的体内扩增。它包括：PCR包括三个基本过程：①变性（denaturation），即在较高温度（93℃～98℃）使双链模板DNA变性解链成单链DNA，以提供复制的模板；
②退火（annealing），即在较低温度（37℃～65℃）使加入的引物与待扩增DNA区域特异性地结合，以提供DNA复制起始的3′―OH；
③延伸（extension），即在适当的温度（70℃～75℃）下，DNA聚合酶从特异性结合到DNA模板上的引物3′-OH端开始，根据碱基互补配对原则，按照待扩增区域的核苷酸序列，进行DNA链的延伸，即合成新的DNA分子。这三个过程组成一个循环周期；每个周期合成的产物又可作为下一个周期的模板，如此循环往复，经过n轮循环后，靶DNA的拷贝数理论上呈2n增长。
影响PCR反应的因素主要有：引物、TaqDNA聚合酶、dNTP、模板和Mg2+离子，此外，pH、温度、循环次数也会影响PCR反应。 -
第17题：
支护的基本原理是什么？
正确答案: 支护的作用原理可以用支护与围岩相互作用情况来描述，一般用支护与围岩共同作用曲线来表示，。巷道在开挖前，其围岩处于原岩应力状态，所受原岩应力为p0。当巷道开挖后，巷道周边处的径向应力被解除，围岩中的应力随时间很快下降，并产生围岩沿着径向巷道空间内位移，不同的围岩性质其碎胀变形不同，在围岩变形曲线。 -
第18题：
问答题PCR 的基本原理是什么？用 PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息？正确答案： （1）DNA半保留复制的原理，在体外进行 DNA的变性、复性和引物延伸。
（2）至少要预先知道足够合成一对引物的靶 DNA序列。解析： 暂无解析 -
第19题：
问答题PCR技术的基本原理正确答案： 该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。
DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。
在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端，并以此为起始点，沿模板5´→3´方向延伸，合成一条新的DNA互补链解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题简述PCR基本原理。正确答案： PCR技术是模拟生物体内DNA的半保留复制，在体外合成DNA链的方法，在模板、DNA、引物、dNTP、Taq酶存在的条件下经过：
“高温变性→低温退火→中温延伸”三步循环，获得大量扩增片段。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题说明PCR反应的基本原理并列举几种特殊的PCR方法。正确答案： PCR是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶）、引物和4种dNTP的情况下，通过高温变性一低温退火一中温延伸这样反复循环的过程，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。
特殊的PCR方法有：锚式PCR，可以用来快速分离cDNA末端（RACE）；反向PCR，可扩增引物外侧的DNA片段，对已知DNA片段两侧的未知序列进行扩增和研究；多重PCR，，在同一反应中采用多对引物同时扩增几个不同的DNA片段，如果基因某一区段缺失，则相应的电泳图谱上此区段PCR扩增产物长度减少或消失，从而发现基因异常；反转录PCR，先将mRNA反转录成cDNA，然后再以cDNA为模板，用PCR方法加以扩增。其他还有PCR，荧光PCR等。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述PCR技术的基本原理。正确答案： P.CR技术的基本原理：类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：1）模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
2）模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；3）引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。（Plateau）。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题解释RT-PCR的基本原理。正确答案： RT-PCR是一种从细胞mRNA中高效灵敏地扩增cDNA序列的方法。由两大步骤组成，一是反转录(RT)；另一是PCR。反转录的起始材料为RNA(mRNA)。解析： 暂无解析