更多“什么是蓝白斑筛选?其原理是什么?”相关问题
  • 第1题:

    蓝-白筛选的原理。


    正确答案:有些载体含有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和氨基端145个氨基酸的编码序列,这个编码区中插入了一个多克隆位点,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶羧基端部分序列的宿主细胞。宿主和载体编码的β-半乳糖苷酶片段各自均无酶活性,但它们可以互补形成具有酶学活性的蛋白质,使X-gal转化成蓝色的代谢产物,出现蓝色的菌落(菌斑)。如果在多克隆位点上插入外源DNA片段,将使载体的lac Z基因灭活,不能互补形成有活性的β-半乳糖苷酶,结果菌落(菌斑)呈现白色。由于这种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然,这种筛选方法称为“蓝-白筛选”。

  • 第2题:

    什么是保护接零?其适用于什么电网?其原理是什么?


    正确答案:保护接零是将电气设备在正常情况下,外露的不带电导体(金属外壳)经接零线与配电网的保护零线(保护导体,包括PE线和PEN线)紧密连接起来的做法和措施。它是在中性点直接接地,电压为380/220伏的三相四线制配电网中,防止在故障带电体上发生触电事故的安全措施。其工作原理是使漏电形成单相短路,由短路电流促使线路上的过电流保护装置迅速动作以切断该漏电设备的电源。

  • 第3题:

    简述利用蓝白斑筛选重组子的原理。


    正确答案:β—半乳糖苷酶基因编码1021个氨基酸,基因产物装配为四聚体后才有酶活性。该蛋白质可分为两部分:α肽段和β肽段。前者负责四聚体装配,后者具β—半乳糖苷酶活性;只有当两者都存在时,才会表现出酶活性,可催化X-Gal水解为兰色产物,该作用称之为α-互补作用。这两个部分可独立存在, 分别由两个基因编码。为α肽段编码的基因称之为lacZα(编码145 AAs),lacZα编码区5‘-端可容许很大的变化(如加入多克隆位点)而不影响酶活性。当外源DNA分子插入多克隆位点后,会破坏α肽段的编码。所以重组DNA转化α肽段编码区缺失的E.coli,涂布在含X-Gal的平板上会产生白色菌落,而非重组子产生蓝色菌落。

  • 第4题:

    筛选法清理的基本原理是什么?


    正确答案: 筛选法清理的基本原理是利用粮油原料与杂质在粒度和粒形上的差异,通过运动适宜、筛孔形状和大小都合理的筛面,使粮油原料和杂质分别成为筛上物和筛下物,从而达到清理目的。

  • 第5题:

    在蓝白斑筛选中,只有同时存在α—片段和α—受体片段才能使X—gal变蓝。


    正确答案:正确

  • 第6题:

    在筛选抗青霉素营养缺陷型菌株时,必须在培养基中加入青霉素,其原理是什么?


    正确答案: 其原理是青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成,因而能杀死生长繁殖着的细菌,但不能杀死处于休止状态的细菌。如果将诱变后的细菌培养在含有青霉素的基本培养基中,就可淘汰大部分生长繁殖活跃的野生型细胞,从而“浓缩”营养缺陷型细胞的目的。

  • 第7题:

    什么是路由抑制?其工作原理是什么?


    正确答案: 路由抑制是BGP路由器为路由变化的状态指定一个惩罚值的机制。路由状态变化得越频繁(路由抖动),积累的惩罚值越大。如果惩罚值超过一定的门限,路由被抑制一段时间。这样不稳定的路由能较少地影响BGP网络互连。

  • 第8题:

    什么是等电点沉淀?其原理是什么?


    正确答案: 电点沉淀:调节体系pH值,使两性电解质的溶解度下降,析出的操作称为等电点沉淀。
    原理:蛋白质是两性电解质,当溶液pH值处于等电点时,分子表面净电荷为0,双电层和水化膜结构被破坏,由于分子间引力,形成蛋白质聚集体,进而产生沉淀。

  • 第9题:

    问答题
    蓝白斑筛选法为什么也会有假阳性?

    正确答案: β—半乳糖苷酶的 N末端是非必需的,可以进行修饰,并不影响酶的活性或。肽的互补性。如果插入的外源DNA引起。肽的可读框的改变,或者插入片段在正确的可读框中含有终止密码的话,就会形成白色噬菌斑。如果插入DNA的碱基数正好是3的倍数,或者插入的DNA中不含有终止密码的话,仍然会形成蓝色噬菌斑。这种插人物的长度可达几百个碱基对。M13载体的这种性质可以用来检测和选择产生新的终止密码或改变可读框,即移码突变。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    高致病性猪蓝耳病的病原监测采用什么试验方法?其与经典猪蓝耳病鉴别的原理是什么?

    正确答案: RT-PCR或荧光定量PCR。针对猪蓝耳病病毒的NSP2基因的特征性缺失进行鉴别检测。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    名词解释题
    Blue-whitescreening蓝白斑筛选

    正确答案: 指利用携带半乳糖苷酶α段重组质粒转化对应缺陷型大肠杆菌,产生β-半乳糖苷酶可将无色化合物X-gal切割出深蓝色的物质,使菌落产生颜色变化,从而根据颜色变化鉴定和筛选重组子的方法。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    筛选法清理的基本原理是什么?

    正确答案: 筛选法清理的基本原理是利用粮油原料与杂质在粒度和粒形上的差异,通过运动适宜、筛孔形状和大小都合理的筛面,使粮油原料和杂质分别成为筛上物和筛下物,从而达到清理目的。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    蓝-白斑筛选


    正确答案: 含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。

  • 第14题:

    什么是分层开采?其原理是什么?


    正确答案: ①分层开采就是根据生产井的开采油层情况,通过井下工艺管柱把各个目的层分开,进而实现分层注水、分层采油的目的;
    ②其原理是:根据注水井、采油井井下各层段性质上的差异,将各层段分隔开,进行分层定量控制注水和分层定量控制采油,同时进行分层测试,分层研究,分层管理和改造。在开发多油层非均质油田中,实现长期保持高产稳产。

  • 第15题:

    简单说明DNA重组技术中的蓝白斑筛选原理。


    正确答案: 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。
    由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。

  • 第16题:

    什么是蓝白斑筛选法?


    正确答案: 这种方法是根据组织化学的原理来筛选重组体。主要是在载体的非必要区插入一个带有大肠杆菌—半乳糖苷酶的基因片段,携带有lac基因片段的载体转入lac的宿主菌后,在含有5—溴—4—氯—3—引哚——D—半乳糖苷(X-gal)平板上形成浅蓝色的噬菌斑。外源基因插人lac(或lac基因部分被取代)后,重组的噬菌体将丧失分解X-gal的能力,转入lac-宿主菌后,在含有5—溴—4—氯—3—引哚——D—半乳糖苷(X-gal)平板上形成白色的噬菌斑,非重组的噬菌体则为蓝色噬菌斑。

  • 第17题:

    什么是大孔树脂?其分离的原理是什么?


    正确答案:大孔树脂是一种不含离子交换基团具有大孔网状结构的高分子材料。它是利用本身的吸附性和筛选性,使各成分获得分离。

  • 第18题:

    在筛选抗青霉素菌株时,必须在培养基中加入青霉素,其原理是什么?


    正确答案:其原理是青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成,因而能杀死生长繁殖着的细菌,但不能杀死处于休止状态的细菌。如果将诱变后的细菌培养在含有青霉素的基本培养基中,就可淘汰大部分生长繁殖活跃的野生型细胞,从而“浓缩”营养缺陷型细胞的目的。

  • 第19题:

    简述重组DNA的筛选与鉴定中蓝-白斑筛选的原理。


    正确答案:它是一种利用蓝色化合物的形成作为指示剂的筛选方法,筛选含有编码β-半乳糖苷酶的基因。当在质粒中插入外源DNA→β-半乳糖苷酶的N端基因失活→不能与宿主β-半乳糖苷酶的C端进行α-互补→产生白色菌落。

  • 第20题:

    蓝-白筛选的原理是什么?


    正确答案: 某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段,在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列。这些位点上如果没有克隆外源性DNA片段,在质粒被导入lac-的大肠杆菌后,质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达,与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补,产生有活性的半乳糖苷酶,加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后,出现蓝色的菌落。如果在多克隆位点上插入外源DNA片段,将使lacZ基因灭活,不能生成半乳糖苷酶,结果菌落出现白色。由于这种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然。

  • 第21题:

    问答题
    简单说明DNA重组技术中的蓝白斑筛选原理。

    正确答案: 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。
    由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    种子窝眼筛选的优点是什么?窝眼筒清选机的工作原理是什么?

    正确答案: 种子窝眼筛选的优点:可以分选在宽度和厚度上有较大重叠的物种,根据物种之间长度差异较大的特点进行分选,如可清除混在小麦中的野燕麦、燕麦中的小麦和野豌豆、以及水稻中的脱壳米粒和大巢菜子等。
    窝眼筒清选机的工作原理:窝眼筒清选机的主要工作部件是一个内壁冲压有匀布窝眼的圆筒,工作时,物料从一端喂入筒中,当筒身绕自轴旋转时,各窝眼能像勺子一样将落入其中的籽粒带起。籽粒越长,超出窝眼的部分越大,能越早地从窝眼内滑出去,重新回落到筒身底部的物料中。较短的籽粒可以进入窝眼内、并被带上去落入与筒身平行的短料槽中,然后在短料槽自身振动或螺旋输送器的推动下,排出机器。短籽粒被窝眼带走后,滞留在筒身中的较长籽粒、在后续来料的推动和筒身倾角的影响下,逐步移至桶身另一端排出。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    蓝-白筛选的原理。

    正确答案: 有些载体含有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和氨基端145个氨基酸的编码序列,这个编码区中插入了一个多克隆位点,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶羧基端部分序列的宿主细胞。宿主和载体编码的β-半乳糖苷酶片段各自均无酶活性,但它们可以互补形成具有酶学活性的蛋白质,使X-gal转化成蓝色的代谢产物,出现蓝色的菌落(菌斑)。如果在多克隆位点上插入外源DNA片段,将使载体的lac Z基因灭活,不能互补形成有活性的β-半乳糖苷酶,结果菌落(菌斑)呈现白色。由于这种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然,这种筛选方法称为“蓝-白筛选”。
    解析: 暂无解析