蓝白斑筛选标记基因实验中，蓝色斑表示是插入了外源片段重组质粒的菌落。

题目

蓝白斑筛选标记基因实验中，蓝色斑表示是插入了外源片段重组质粒的菌落。

相似考题

1.产生转化菌A、基因载体的选择与构建B、外源基因与载体的拼接C、重组DNA分子导入受体细胞D、筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞E、表达目的基因编码的蛋白质

2.在受体细胞中能检测出目的基因是因为()A、质粒具有某些标记基因B、重组质粒能够复制C、目的基因上有标记D、以上都不正确

3.基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于A.外源基因插入质粒 B.宿主菌的生物繁殖 C.质粒的转化 D.带有目的基因的宿主菌的筛选 E.目的基因的表达

4.关于蓝白斑筛选，叙述错误的是A、又称α-互补筛选B、含有重组质粒的细菌形成白色菌落C、含有重组质粒的细菌形成蓝色菌落D、带有“空”质粒的细菌形成蓝色菌落E、不含质粒的细菌不能生长

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  • 第1题：

    某一质粒载体如图6所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
    (Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：

    (1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。
    (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述三种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____；并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的，其原因是____。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有____的固体培养基。
    (3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自____。


    答案：
    解析：
    (1)能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点(答出两点即可) (2)二者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长：二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长；四环素
    (3)受体细胞
    解析：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有：能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点等。
    (2)依题意可知，目的基因插入位点在Tetr中，导致四环素抗性基因(TEtr)失活，而氨苄青霉素抗性基因(Ampr)仍能行使正常功能。如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞,因二者均不含氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上都不能生长,所以是不能区分的；含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞，因二者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都能生长,因此也是不能区分的。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有四环素的固体培养基；因目的基因插入后，导致四环素抗性基因失活，含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌在该培养基中不能生长，而含有质粒载体的则能正常生长。
    (3)噬菌体是专性在细菌细胞中寄生的细菌病毒。在侵染细菌时，噬菌体的DNA进入到细菌细胞中，而其蛋白质外壳留在细胞外；在噬菌体DNA的指导下，利用细菌细胞中的物质和能量合成噬菌体的组成成分。其DNA复制所需的原料来自宿主(受体)细胞，即大肠杆菌。

  • 第2题：

    相对载体而言，插入的DNA片段称为（）。

    • A、筛选基因
    • B、可调节基因
    • C、外源DNA
    • D、Cdna

    正确答案:C

  • 第3题：

    为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有（）

    • A、将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。
    • B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。
    • C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的复制。
    • D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制

    正确答案:A,C

  • 第4题：

    下列与载体相符合的内容有（）.

    • A、作用是把外源细胞带入到宿主细胞中
    • B、质粒是其中的一种
    • C、应具有筛选标记
    • D、与基因工程无关

    正确答案:A,B,C

  • 第5题：

    在蓝白斑筛选中，只有同时存在α—片段和α—受体片段才能使X—gal变蓝。


    正确答案:正确

  • 第6题：

    外源基因表达的基本流程是（）。 ①重组表达载体导入宿主细胞； ②目的基因的获得； ③重组表达载体的筛选与认； ④目的基因与载体的重组； ⑤目的基因的表达。

    • A、②④①③⑤
    • B、①②④③⑤
    • C、②④③①⑤
    • D、④②①③⑤

    正确答案:A

  • 第7题：

    简述重组DNA的筛选与鉴定中蓝-白斑筛选的原理。


    正确答案:它是一种利用蓝色化合物的形成作为指示剂的筛选方法，筛选含有编码β-半乳糖苷酶的基因。当在质粒中插入外源DNA→β-半乳糖苷酶的N端基因失活→不能与宿主β-半乳糖苷酶的C端进行α-互补→产生白色菌落。

  • 第8题：

    通过溶源转变溶源性细菌所获得的新的遗传性状是来自（）。

    • A、细菌的基因
    • B、前噬菌体基因
    • C、重组噬菌体所携带的外源基因
    • D、重组质粒的基因

    正确答案:B

  • 第9题：

    单选题
    关于蓝白斑筛选，叙述错误的是（）
    A

    又称α-互补筛选

    B

    含有重组质粒的细菌形成白色菌落

    C

    含有重组质粒的细菌形成蓝色菌落

    D

    带有“空”质粒的细菌形成蓝色菌落

    E

    不含质粒的细菌不能生长


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    在进行蓝-白筛选时，pUC载体的lacZ基因位点插入外源DNA，转化细菌后，含有插入了外源DNA的重组质粒的（）。
    A

    细菌不能在含氨苄青霉素的培养板上生长

    B

    细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成白色菌斑

    C

    细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成蓝色菌斑

    D

    细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成透明的无色菌斑

    E

    无菌落形成


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    填空题
    根据噬菌斑的清晰程度筛选重组体主要是 cⅠ基因的（）。

    正确答案： 失活
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    关于DNA克隆的叙述，不正确的是（　　）。
    A

    目的基因的获取

    B

    外源基因和载体连接

    C

    将重组DNA导入受体菌

    D

    筛选出含有目的基因的转化菌

    E

    常用到DNA解链酶


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。


    正确答案:错误

  • 第14题：

    简述利用蓝白斑筛选重组子的原理。


    正确答案:β—半乳糖苷酶基因编码1021个氨基酸，基因产物装配为四聚体后才有酶活性。该蛋白质可分为两部分：α肽段和β肽段。前者负责四聚体装配，后者具β—半乳糖苷酶活性；只有当两者都存在时，才会表现出酶活性，可催化X-Gal水解为兰色产物，该作用称之为α-互补作用。这两个部分可独立存在， 分别由两个基因编码。为α肽段编码的基因称之为lacZα（编码145 AAs），lacZα编码区5‘-端可容许很大的变化（如加入多克隆位点）而不影响酶活性。当外源DNA分子插入多克隆位点后，会破坏α肽段的编码。所以重组DNA转化α肽段编码区缺失的E.coli，涂布在含X-Gal的平板上会产生白色菌落，而非重组子产生蓝色菌落。

  • 第15题：

    简单说明DNA重组技术中的蓝白斑筛选原理。


    正确答案: 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法：是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质。这样，lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补，称为α-互补。
    由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后，有重组质粒的细菌形成白色菌落。

  • 第16题：

    载体质粒pBR325共有三个选择性标记：Apr、Tcr、Cmr。它们分别含有一个单一酶切位点：PstI、SphI和EcoRI。若将一外源基因取代此载体上不含Cmr标记基因的PstI-SphI限制性DNA片段，那么用于转化子和重组子筛选的试剂应是（）

    • A、Ap
    • B、Tc
    • C、Cm
    • D、Ap+Tc
    • E、Ap+Cm

    正确答案:C

  • 第17题：

    基因工程菌中重组质粒的丢失机制是（）

    • A、重组质粒渗透至细胞外
    • B、重组质粒被细胞内核酸酶降解
    • C、重组质粒在细胞分裂时不均匀分配
    • D、重组质粒杀死受体细胞
    • E、重组质粒刺激受体细胞提高其通透性

    正确答案:C

  • 第18题：

    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（）

    • A、外源基因插入质粒
    • B、宿主菌的生物繁殖
    • C、质粒的转化
    • D、带有目的基因的宿主菌的筛选
    • E、目的基因的表达

    正确答案:D

  • 第19题：

    何谓基因工程？阐述基因工程的基本操作过程。在一利用pBR322质粒和BamHⅠ构建“工程菌”的实验中，如何筛选含有目的基因的宿主细菌？


    正确答案: 基因工程是指人们利用分子生物学的理论和技术，自觉设计操纵改造和重建细胞的遗传核心——基因组，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，以最大限度地满足人类活动的需要。基因工程的基本操作包括目的基因的取得，载体系统的选择，目的基因与载体重组体的构建，重组载体导入受体细胞，工程菌株的表达和检测等。
    大肠杆菌的pBR322质粒上有两个抗药性标记，即氨苄青霉素抗性和四环素抗性标记，限制酶BamHⅠ在该质粒上的插入点在四环素抗性基因上，当外源DNA片段插入后会引起四环素抗性基因失活。制备四环素平板、氨苄青霉素平板，将已转化的宿主细胞涂布，若在四环素平板上不能生长，在氨苄青霉素平板上能生长，则证明该菌已含有目的基因；若在两种平板上都能生长，则该菌不含目的基因。

  • 第20题：

    单选题
    通过溶源转变溶源性细菌所获得的新的遗传性状是来自：（）
    A

    细菌的基因

    B

    前噬菌体基因

    C

    重组噬菌体所携带的外源基因

    D

    重组质粒的基因


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（）
    A

    外源基因插入质粒

    B

    宿主菌的生物繁殖

    C

    质粒的转化

    D

    带有目的基因的宿主菌的筛选

    E

    目的基因的表达


    正确答案： D
    解析： 转化后，只有含有抗生素抗性基因的转化细胞才能够在含有相应抗生素的琼脂平皿上生长并形成菌落。如果在构建重组DNA时将外源基因插入抗性基因内，标志基因将失活，可通过有或无抗生素培养基的对比培养进行鉴定并将含有重组体的转化菌筛选出来，故选D。

  • 第22题：

    问答题
    简单说明DNA重组技术中的蓝白斑筛选原理。

    正确答案： 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法：是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质。这样，lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补，称为α-互补。
    由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后，有重组质粒的细菌形成白色菌落。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    多选题
    下列与载体相符合的内容有（）.
    A

    作用是把外源细胞带入到宿主细胞中

    B

    质粒是其中的一种

    C

    应具有筛选标记

    D

    与基因工程无关


    正确答案： B,A
    解析： 暂无解析

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