参考答案和解析
正确答案:稀释法;透析法;液相色谱法
更多“指出蛋白质复性的三种方法:()、()、()等。”相关问题
  • 第1题:

    简述蛋白质变性与复性的概念。


    正确答案: 在酸、碱、热、有机溶剂或辐照处理时,蛋白质的二、三、四级结构会发生不同程度的改变,这个过程称之为变性;变性的天然蛋白质,有时在引起变性的因素解除后,恢复原来结构性质的过程称之为蛋白质的复性。

  • 第2题:

    辨脓有无的方法有______、______、______等三种常用方法。


    正确答案:手法辨脓;透光辨脓;穿刺辨脓

  • 第3题:

    从细胞破碎到蛋白质复性可以走不同的工艺路线。此工艺路线主要有哪三种?分别有哪些特点?


    正确答案: 1)机械破碎(高压匀浆、高速珠磨法)-离心法提取出包涵体-加变性剂溶解-除去变性剂。
    此路线利用了包涵体与细胞碎片的密度差,用离心法将包涵体与细胞碎片和可溶性蛋白质分开,获得了干净的包涵体,在对包涵体溶解复性。
    这样首先就摆脱了大量的杂蛋白、核酸、热原、内毒素等杂质,使后面的分离纯化简单化了。
    缺点:要经过几次离心才能除去大部分细胞碎片,加工时间较长。
    2)机械破碎-膜分离除可溶性蛋白-变性剂溶解包涵体-除变性剂复性。
    此路线应用了膜分离技术,用微孔膜除去可溶性蛋白质,但细胞碎片却和包涵体一起被膜挡住,难以分开;而且膜的堵塞和浓差极化常常导致可溶性蛋白质的直流,因此这条路线的问题较多。
    优点:膜分离是封闭式操作,不污染环境也不受环境污染,能量消耗也比离心法少。
    3)化学破碎(加变性剂),离心除细胞碎片-除变性剂复性。
    此路线是用化学法破菌,所采用的试剂既可以破菌有可以溶解包涵体,将两道工序合为一道,节省了设备和时间,比前两者更适合于实验室操作。
    缺点:所有的可溶性杂质都没有被除去,混杂在产物中间,给后分离带来困难。

  • 第4题:

    蛋白质复性


    正确答案:包涵体蛋白质溶解于变性剂溶液中,呈变性状态,所有的氢键、疏水键全部被破坏,疏水侧链完全暴露,但一级结构和共价键不被破坏,当除去变性剂后,一部分蛋白质可以自动折叠成具有活性的正确构型,这一折叠过程称为蛋白质复性。

  • 第5题:

    简述蛋白质的变性与复性


    正确答案: 1、蛋白质的变性作用:在某些物理、化学因素的影响下,蛋白质分子中次级键被破坏,结果蛋白质分子从有序紧密的构象变为无序而松散的构象,即蛋白质分子构象改变至解体的过程。
    变性作用不涉及共价键(肽键和二硫键等)的断裂,一级结构保持完好;变性作用是一个协同过程,此过程是在变性剂浓度很窄范围内;或很窄的pH范围内,或很窄的温度间隔内突然发生的。
    2、引起蛋白质变性因素
    物理因素:热、紫外线照射、高压和表面张力等; 化学因素:酒精、尿素、丙酮等有机溶剂,酸,碱等。 3、变性过程中蛋白质分子的变化:
    (1)蛋白质内部一些侧链基团暴露,如疏水基团外露等。
    (2)蛋白质理化性质改变,如溶解度下降,蛋白质分子伸展,不对称性增加等。
    (3)生物化学性质的改变,如变性后的蛋白质更易被蛋白酶水解等。
    4、生物活性的丧失:生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。有时空间结构只有轻微的局部变化,甚至这些变化还没有影响物理化学性质时,蛋白质的生物活性就已经丧失了。 蛋白质的复性:当变性因素除去后,有些变性的蛋白质又可重新回复其天然构象,这一过程称为复性。

  • 第6题:

    美国哲学家皮尔斯(C.S.Pierce)指出,除科学方法外,还有另外三种确立信念的方法:()、()和()。


    正确答案:权威、注意凝聚、先验

  • 第7题:

    蛋白质的变性与复性是什么?为何蛋白质具有生物活性?


    正确答案:蛋白质的变性:分子内部原有的高度规律性结构发生变化,但一级结构未被破坏 蛋白质的变性作用,如不过于剧烈,在一定条件下可恢复活性,称为蛋白质的复性。
    对一条多肽链构成的蛋白质,具有三级结构才具有生物学活性。对多亚基蛋白质而言,单独的亚基没有生物学活性,只有完整的四级结构寡聚体才有生物学活性。 大多数酶是蛋白质,蛋白质结构完整时具有催化活性。

  • 第8题:

    填空题
    美国哲学家皮尔斯(C.S.Pierce)指出,除科学方法外,还有另外三种确立信念的方法:()、()和()。

    正确答案: 权威、注意凝聚、先验
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    问答题
    从细胞破碎到蛋白质复性可以走不同的工艺路线。此工艺路线主要有哪三种?分别有哪些特点?

    正确答案: 1)机械破碎(高压匀浆、高速珠磨法)-离心法提取出包涵体-加变性剂溶解-除去变性剂。
    此路线利用了包涵体与细胞碎片的密度差,用离心法将包涵体与细胞碎片和可溶性蛋白质分开,获得了干净的包涵体,在对包涵体溶解复性。
    这样首先就摆脱了大量的杂蛋白、核酸、热原、内毒素等杂质,使后面的分离纯化简单化了。
    缺点:要经过几次离心才能除去大部分细胞碎片,加工时间较长。
    2)机械破碎-膜分离除可溶性蛋白-变性剂溶解包涵体-除变性剂复性。
    此路线应用了膜分离技术,用微孔膜除去可溶性蛋白质,但细胞碎片却和包涵体一起被膜挡住,难以分开;而且膜的堵塞和浓差极化常常导致可溶性蛋白质的直流,因此这条路线的问题较多。
    优点:膜分离是封闭式操作,不污染环境也不受环境污染,能量消耗也比离心法少。
    3)化学破碎(加变性剂),离心除细胞碎片-除变性剂复性。
    此路线是用化学法破菌,所采用的试剂既可以破菌有可以溶解包涵体,将两道工序合为一道,节省了设备和时间,比前两者更适合于实验室操作。
    缺点:所有的可溶性杂质都没有被除去,混杂在产物中间,给后分离带来困难。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    简述蛋白质的复性操作的主要方法。

    正确答案: (1)将溶液稀释,降低变性剂的浓度和降低蛋白质的浓度,使蛋白质复性。
    该法的缺点是增大了后处理体积。
    (2)利用透析、超滤等膜分离技术去除变性剂。
    该法适用于较高浓度的蛋白质复性。复性的效果取决于蛋白质聚集和正确折叠之间的竞争。为了减轻聚集,复性通常在低浓度(10~100μg/ml)下进行。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    填空题
    指出蛋白质复性的三种方法:()、()、()等。

    正确答案: 稀释法,透析法,液相色谱法
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    预测蛋白质三级结构的三种方法

    正确答案: 1)同源建模法:依据蛋白质与已知结构蛋白比对信息构建3D模型;
    2)折叠识别法:寻找与未知蛋白最合适的模板,进行序列与结构比对,最终建立结构模型;
    3)从头预测法:根据序列本身从头预测蛋白质结构。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    解释蛋白质的复性?


    正确答案:若蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后,有些蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能,称为复性。但许多蛋白质变性后,空间构象破坏严重,不能复原,称为不可逆性变性。

  • 第14题:

    指出三种指定形状尺寸的方法。


    正确答案: A选择该形状:使用变换调板,指定宽W和高H尺寸。
    B选取该形状,使用工具箱中,比例缩放工具,按Option键并单击,在对话框中设置原点和尺寸。
    C选择该形状,拖拽边界框上的手柄,调整其大小,按Shift会约束比例。

  • 第15题:

    利用液相色谱方法对包含体蛋白质进行复性比稀释复性法优越。


    正确答案:正确

  • 第16题:

    什么是蛋白质变性与复性?


    正确答案:蛋白质因受某些物理或化学因素的影响,分子的空间构象被破坏,从而导致其理化性质发生改变并失去原有的生物学活性的现象称为蛋白质的变性作用。如果变性条件剧烈持久,蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈,这种变性作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时,如果除去变性因素,在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性,这种现象称为蛋白质的复性。

  • 第17题:

    蛋白质变性与复性


    正确答案:DNA的变性是指在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。DNA复性是指:在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。

  • 第18题:

    蛋白质的复性


    正确答案:指在一定条件下,变性的蛋白质分子恢复其原有的天然构象并恢复生物活性的现象。

  • 第19题:

    问答题
    指出三种指定形状尺寸的方法。

    正确答案: A选择该形状:使用变换调板,指定宽W和高H尺寸。
    B选取该形状,使用工具箱中,比例缩放工具,按Option键并单击,在对话框中设置原点和尺寸。
    C选择该形状,拖拽边界框上的手柄,调整其大小,按Shift会约束比例。
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    填空题
    美国哲学家皮尔斯(C·S·Pierce)指出,除科学方法外,还有另外三种确立信念的方法:()、()和()。

    正确答案: 权威,注意凝聚,先验
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    名词解释题
    蛋白质的复性

    正确答案: 包含体蛋白质溶解于变性剂溶液中,呈变性状态,所有的氢键、疏水键全部被破坏,疏水侧链完全暴露,但一级结构和共价键不被破坏,当除去变性剂后,一部分蛋白质可以自动折叠成具有活性的正确构型,这一折叠过程称为蛋白质复性。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    判断题
    利用液相色谱方法对包含体蛋白质进行复性比稀释复性法优越。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    名词解释题
    蛋白质复性

    正确答案: 包涵体蛋白质溶解于变性剂溶液中,呈变性状态,所有的氢键、疏水键全部被破坏,疏水侧链完全暴露,但一级结构和共价键不被破坏,当除去变性剂后,一部分蛋白质可以自动折叠成具有活性的正确构型,这一折叠过程称为蛋白质复性。
    解析: 暂无解析