动物转基因的方法有哪些，有何进展？

题目

动物转基因的方法有哪些，有何进展？

相似考题

1.转基因产品食用安全评价的动物试验有哪些？各有什么作用？

2.我国转基因技术研发和应用都有哪些新进展？

3.我国转基因产品的标识方法有哪些？

4.转基因技术与传统育种技术有何异同？

参考答案和解析
正确答案: 胚胎移植操作步骤：供受体母牛的选择，供受体同期发情，供体的超数排卵，供体的配种，胚胎采集，胚胎质量鉴定和北欧村内，胚胎的移植技术等环节。
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  • 第1题：

    人工诱发动物细胞融合方法有哪些？动物杂交细胞的分离方法有哪些？


    正确答案: 1、生物诱导细胞融合
    2、化学方法诱导细胞融合
    3、物理方法诱导细胞融合
    4、激光诱导融合
    非选择性筛选、选择性筛选

  • 第2题：

    下列产品属农业转基因生物的有（）

    • A、转基因微生物产品
    • B、转基因农产品的直接加工品
    • C、转基因水产苗种
    • D、含有转基因动物成份的添加剂产品

    正确答案:A,B,C,D

  • 第3题：

    转基因动物制备过程中，转基因的方法主要有（）、（）、（）、（）、（）、（）等。


    正确答案:微量注射；胚胎干细胞法；生殖细胞载体法；逆转录和慢病毒转染法；精子载体法；受体介导法

  • 第4题：

    目前常用的转基因动物制作方法有：（）、（）、（）、（）、（）、（）。


    正确答案:受精卵雄原核显微注射法；胚胎干细胞（ES细胞）法；逆转录病毒感染法；体细胞核移植法；精子载体法；YAC法

  • 第5题：

    生产转基因动物包括哪些主要技术？


    正确答案: 转基因技术：是指在DNA操作过程中用到的：重组子构建技术、重组分子导入动植物体内的转化技术、转基因在受体细胞染色体上的稳定整合及可靠表达技术。
    （一）外源基因的构建：转移到受体中的外源基因，一般包括三部分：启动子、目的基因和转录终止信号。
    （二）外源基因的导入：显微注射法，电穿孔转化法，精子介导法，基因枪转化法，病毒（噬菌体）颗粒转导法，组织注射法。
    （三）源基因的检测，外源基因导入的检测包括DNA斑点杂交，PCR阳性检测技术；外源基因整合的检测采用Southern技术，以外源DNA作为探针，进行杂交检测，可以检测到外源基因整合到基因组；外源基因表达产物的检测包括特异性mRNA的检测，报告基因的酶法检测，免疫学检测，表达产物的生物学活性检测。

  • 第6题：

    什么是转基因动物？生产转基因动物的一般步骤？常用的技术有那些？


    正确答案:转基因动物（transgenicanimal）指用人工方法将外源基因导入动物受精卵或早期胚胎细胞，使外源基因与动物本身的基因组整合，并随细胞的分裂而增殖，从而将外源基因稳定的遗传给下一代的工程化动物。
    步骤：
    ①外源目的基因的制备，外源目的基因有效的导入生殖细胞或胚胎干细胞；
    ②选择获得携有目的基因的细胞，选择合适的体外培养系统和宿主动物；
    ③转基因细胞胚胎发育及鉴定；
    ④筛选所得的转基因动物品系。
    技术：基因显微注射法、胚胎干细胞移植法、反转录病毒感染法、精子载体等。

  • 第7题：

    转基因动物制作基本步骤有哪些？


    正确答案:（1）获取外源目的基因；
    （2）含有外源目的基因的重组载体导入生殖细胞或胚胎干细胞；
    （3）选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统和宿主动物；
    （4）转基因胚胎的发育及鉴定；
    （5）筛选所得的转基因动物。

  • 第8题：

    问答题
    动物试验的特点有何和基本要求有哪些？

    正确答案： 动物试验的特点有：
    ①试验干扰因素多。首先动物本身存在差异，其次，自然环境存在差异；第三，饲养管理条件存在差异；第四，试验人员操作技术上存在差异。②试验具有复杂性。③试验周期长。
    动物试验的基本要求：
    ①试验要有代表性。动物试验的代表性包括生物学和环境条件两个方面的代表性。代表性决定了试验结果的可利用性，如果一个试验没有充分的代表性，再好的试验结果也不能推广和应用，就失去了实用价值。
    ②试验要有正确性。在进行试验的过程中，应严格执行各项试验要求，将非试验因素的干扰控制在最低水平，以避免系统误差，降低试验误差，提高试验的正确性。
    ③试验要有重演性。重演性是指在相同条件下，重复进行同一试验，能够获得与原试验相类似的结果，即试验结果必须经受得起再试验的检验。
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    问答题
    简述转基因动物的原理及培育转基因动物的方法。

    正确答案： 转基因动物原理是将改建后的目的基因（或基因组片段）用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前胚胎细胞，然后将此受精卵（着床前胚胎细胞）再植入受体动物的输卵管或子宫中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物。
    其方法有：
    1.显微注射法。
    2.胚胎干细胞（ES细胞）技术。
    3.基因打靶技术。
    4.逆转录病毒载体技术。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    转基因生物的外源基因检测方法有哪些？

    正确答案： （1）形态标记。形态标记是指在杂种后代中那些可被直接观察到的性状，如植株的茎、叶、穗、籽粒各部分大小、色泽、形状及抗病性表现等。这是检测外源基因最常用的、也是最直观的方法。一般是参照双亲的特征，根据杂咱后代的表现情况，来确定杂种后代中是否有外源基因导入。
    （2）细胞标记。细胞标记，即细胞学鉴定。通过对染色体的数目和形态特征观察、染色体带型和核型分析以及减数分裂染色体配对行为的观察，来检测外源基因。这是检测外源基因最基本、最经典的方法。
    具体包括：
    A.杂种细胞学，观察通过对杂种体细胞染色体观察，统计其染色体数目，并结合花粉母细胞减数分裂中期染色体配对行为观察，来确是否有外源基因导入。通过染色体计数和配对行为观察，很容易确定双二倍体、部分双二倍体、附加系、单体、缺体、端体等染色体的数目和类型。利用有无随体染色体，也可鉴定外源基因。
    B.核型及核型分析，核型通常是指体细胞染色体所有可测定的表型特证的总称。核型分析就是对核型的各种特征进行定量或定性的表达。核型分析的染色体，一般以体细胞分裂中期的染色体作为基本形态。在核型分析的表述格式中，一般包括染色体数目和染色体形态特征，形态特征主要包括相对长度、臂比、着丝点位置和随体的有无。染色体的分类目前采用应用最广泛的两点四区系统，我国于1984年第一届全国植物染色体学术讨论会上稍加修改后推行。根据臂比值将染色体分为正中部着丝点（M）、中部着丝点区（m）、近中部着丝点区（sm）、近端部着丝点区（st）、端部着丝点区（t）和端着丝点（T）即所谓的两点四区。
    C.染色体分带，染色体分带技术是通过一定的碱、酸、盐、温度等因素对染色体进行处理，借助Giemsa等染料染色，使染色体在一定部位呈现深浅程度不同的染色区段而形成特定的带纹，由于其带纹在各染色体上显示的位置、宽窄、大小、数目、浓淡等具有相对的稳定性，故可用来进行染色体的鉴别和分析。
    （3）生化标记。生化标记是利用电泳等技术对生物大分子，如蛋白质、酶等进行鉴定。因为蛋白质是由基因编码的，特定的基因型决定了蛋白质的特定组成，因此，不同种、属所特有的蛋白质组成能够反映出该种、属的基因型。
    具体包括：
    A、贮藏蛋白分析法，按其溶解特性可分成谷蛋白和醇溶蛋白两大类，其蛋白的亚基存在着丰富的变异类型，不受环境条件影响而能稳定遗传。
    B、同工酶分析法，同工酶是结构不同但功能相同的一类酶。在一定条件下电泳染色，同一遗传材料可同时显示几条酶带，而不同的遗传材料可具有不同的酶带。同工酶是基因的直接产物，是基因表达的结果。
    （4）分子标记。分子标记是继形态标记、细胞标记、生化标记之后的一种新的分子遗传标记方法，它是以DNA多态性与性状间的紧密连锁关系为基础的遗传标记，能够稳定遗传，且遗传方式比较简单，是性状基因的真实反映，能在不同发育阶段对不同组织DNA进行检测分析。目前，用于检测小麦外源基因的分子标记主要有限制性片段长度多态性（restriction fragment length length polymorphism 简称 RFLP）、随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA 简称 RAPD ）和基因组原位杂交（genomic in situ hybridization 简称 GISH）。这项新技术越来越受到重视，特别是在检测外源小片断染色时更是倍受青睐。 
    具体包括：
    A、RFLP，RFLP技术是基于不同物种、不同材料间基因组DNA的限制性内切酶识别位不同的原理，通过对基因组DNA经特定的限制性内切酶消化，产生不同大小的DNA片断，经电泳后转移到固定支撑物上，用特定的放射性标记的DNA片断（探针）杂交检测多态性。它是检测不同物种个体间基因细微差异的可靠手段，标记的数量较大，呈简单的孟德尔显性遗传。RFLP是较早应用于植物基因标记的一项分子标记技术。 
    B、RAPD，RAPD技术是基于聚合酶链式反应原理，通过运用不同核苷酸序列的随机引物（通常为10个碱基）对基因组DNA进行扩增，对扩增产物进行电泳寻找多态性标记。这类标记通常也是显性遗传，由于它在技术上非常简单，也无需对基因组序列有多少了解，只要合成一套随机引物就可用于作物物种，因而应用最为广泛。RAPD技术最大的缺点是稳定性差，易受不同药品的影响。为了提高该标记的稳定性和重复性，有必要将RAPD技术转化为特异序列扩增的SCAR(Sequence characterized amplified region )标记。即将RAPD作为初步筛选鉴定的一种方法，一旦发现所需的DNA扩增产物之后，再用特异序列扩增的方法，将RAPD转变成经典的PCR方法。 
    C、FISH，这是一项利用标记的DNA探针与染色体上的DNA杂交，在染色体上直接进行检测的分子标记技术。该项技术在研究内容，研究方法上将传统的细胞遗传学与现代分子遗传学结合起来，形成一门新的交叉学科――分子细胞遗传学。制作良好的染色体分裂相片子是该技术的关键。其最大优点是利用普通的显微镜，可以直接鉴定到所要研究的基因在染色体上的位置和分布。
    总之，形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记是检测外源基因重要的遗传标记形式。形态标记检测方法简便易行，提供直接的结果，但标记数少、多态性差、易受环境条件影响。 •细胞标记检测是最经典的方法，但工作量大，费人才。生化标记检测设备简单，试剂价格低廉，但标记数目有限。分子标记检测结果可靠，但仪器、试剂都较昂贵，其利用受到一定的限制。各种遗传标记形式都有其局限性，在检测外源基因时，可根据研究条件、研究目的及研究对象，合理地选择相应的检测方法。在实际应用中，常常将几种标记结合起来使用，其结果相互印证，提高了检测结果的准确性和可靠性。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    常用的转基因动物的方法有哪些？

    正确答案： 显微注射法、逆转录病毒法、胚胎干细胞法。其中以显微注射法可转录的外援基因的容量最大。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    转基因鱼对生态环境有何影响？

    正确答案： 在长期演化过程中，生态系统是遵循一定规律演变的。转基因鱼类是由人工创造的，它在养殖和其他生产中不可避免地会发生逃逸事件，转基因水产动物作为人工遗传修饰的个体在环境释放后，可能与野生种交配导致外源基因的扩散，改变物种原来的基因组成，造成种质资源的混乱。转基因物种比其他个体更具有适应性和竞争力，而某些野生品种不具有竞争力，因此还可能破坏种群生态平衡，并威胁物种的遗传多样性。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    转基因生物的外源基因检测方法有哪些？


    正确答案: （1）形态标记。形态标记是指在杂种后代中那些可被直接观察到的性状，如植株的茎、叶、穗、籽粒各部分大小、色泽、形状及抗病性表现等。这是检测外源基因最常用的、也是最直观的方法。一般是参照双亲的特征，根据杂咱后代的表现情况，来确定杂种后代中是否有外源基因导入。
    （2）细胞标记。细胞标记，即细胞学鉴定。通过对染色体的数目和形态特征观察、染色体带型和核型分析以及减数分裂染色体配对行为的观察，来检测外源基因。这是检测外源基因最基本、最经典的方法。
    具体包括：
    A.杂种细胞学，观察通过对杂种体细胞染色体观察，统计其染色体数目，并结合花粉母细胞减数分裂中期染色体配对行为观察，来确是否有外源基因导入。通过染色体计数和配对行为观察，很容易确定双二倍体、部分双二倍体、附加系、单体、缺体、端体等染色体的数目和类型。利用有无随体染色体，也可鉴定外源基因。
    B.核型及核型分析，核型通常是指体细胞染色体所有可测定的表型特证的总称。核型分析就是对核型的各种特征进行定量或定性的表达。核型分析的染色体，一般以体细胞分裂中期的染色体作为基本形态。在核型分析的表述格式中，一般包括染色体数目和染色体形态特征，形态特征主要包括相对长度、臂比、着丝点位置和随体的有无。染色体的分类目前采用应用最广泛的两点四区系统，我国于1984年第一届全国植物染色体学术讨论会上稍加修改后推行。根据臂比值将染色体分为正中部着丝点（M）、中部着丝点区（m）、近中部着丝点区（sm）、近端部着丝点区（st）、端部着丝点区（t）和端着丝点（T）即所谓的两点四区。
    C.染色体分带，染色体分带技术是通过一定的碱、酸、盐、温度等因素对染色体进行处理，借助Giemsa等染料染色，使染色体在一定部位呈现深浅程度不同的染色区段而形成特定的带纹，由于其带纹在各染色体上显示的位置、宽窄、大小、数目、浓淡等具有相对的稳定性，故可用来进行染色体的鉴别和分析。
    （3）生化标记。生化标记是利用电泳等技术对生物大分子，如蛋白质、酶等进行鉴定。因为蛋白质是由基因编码的，特定的基因型决定了蛋白质的特定组成，因此，不同种、属所特有的蛋白质组成能够反映出该种、属的基因型。
    具体包括：
    A、贮藏蛋白分析法，按其溶解特性可分成谷蛋白和醇溶蛋白两大类，其蛋白的亚基存在着丰富的变异类型，不受环境条件影响而能稳定遗传。
    B、同工酶分析法，同工酶是结构不同但功能相同的一类酶。在一定条件下电泳染色，同一遗传材料可同时显示几条酶带，而不同的遗传材料可具有不同的酶带。同工酶是基因的直接产物，是基因表达的结果。
    （4）分子标记。分子标记是继形态标记、细胞标记、生化标记之后的一种新的分子遗传标记方法，它是以DNA多态性与性状间的紧密连锁关系为基础的遗传标记，能够稳定遗传，且遗传方式比较简单，是性状基因的真实反映，能在不同发育阶段对不同组织DNA进行检测分析。目前，用于检测小麦外源基因的分子标记主要有限制性片段长度多态性（restriction fragment length length polymorphism 简称 RFLP）、随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA 简称 RAPD ）和基因组原位杂交（genomic in situ hybridization 简称 GISH）。这项新技术越来越受到重视，特别是在检测外源小片断染色时更是倍受青睐。 
    具体包括：
    A、RFLP，RFLP技术是基于不同物种、不同材料间基因组DNA的限制性内切酶识别位不同的原理，通过对基因组DNA经特定的限制性内切酶消化，产生不同大小的DNA片断，经电泳后转移到固定支撑物上，用特定的放射性标记的DNA片断（探针）杂交检测多态性。它是检测不同物种个体间基因细微差异的可靠手段，标记的数量较大，呈简单的孟德尔显性遗传。RFLP是较早应用于植物基因标记的一项分子标记技术。 
    B、RAPD，RAPD技术是基于聚合酶链式反应原理，通过运用不同核苷酸序列的随机引物（通常为10个碱基）对基因组DNA进行扩增，对扩增产物进行电泳寻找多态性标记。这类标记通常也是显性遗传，由于它在技术上非常简单，也无需对基因组序列有多少了解，只要合成一套随机引物就可用于作物物种，因而应用最为广泛。RAPD技术最大的缺点是稳定性差，易受不同药品的影响。为了提高该标记的稳定性和重复性，有必要将RAPD技术转化为特异序列扩增的SCAR(Sequence characterized amplified region )标记。即将RAPD作为初步筛选鉴定的一种方法，一旦发现所需的DNA扩增产物之后，再用特异序列扩增的方法，将RAPD转变成经典的PCR方法。 
    C、FISH，这是一项利用标记的DNA探针与染色体上的DNA杂交，在染色体上直接进行检测的分子标记技术。该项技术在研究内容，研究方法上将传统的细胞遗传学与现代分子遗传学结合起来，形成一门新的交叉学科――分子细胞遗传学。制作良好的染色体分裂相片子是该技术的关键。其最大优点是利用普通的显微镜，可以直接鉴定到所要研究的基因在染色体上的位置和分布。
    总之，形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记是检测外源基因重要的遗传标记形式。形态标记检测方法简便易行，提供直接的结果，但标记数少、多态性差、易受环境条件影响。 •细胞标记检测是最经典的方法，但工作量大，费人才。生化标记检测设备简单，试剂价格低廉，但标记数目有限。分子标记检测结果可靠，但仪器、试剂都较昂贵，其利用受到一定的限制。各种遗传标记形式都有其局限性，在检测外源基因时，可根据研究条件、研究目的及研究对象，合理地选择相应的检测方法。在实际应用中，常常将几种标记结合起来使用，其结果相互印证，提高了检测结果的准确性和可靠性。

  • 第14题：

    胆管疾病的诊断方法有哪些进展？


    正确答案: （1）B超及超声内镜。
    （2）选择性逆行胰胆管造影（ERCP），对胆道肿瘤和胰腺肿瘤的诊断阳性率高于超声和CT。
    （3）经皮经肝胆囊内镜检查。
    （4）超声引导下的经皮肝穿胆管造影（PTC）。
    （5）腹腔镜检查。
    （6）放射性核素胆管显像---核素99mTc-二乙基亚氨二醋酸（EHIDA）或99mTc-三甲基溴静脉注射后通过γ照相，能显示肝、胆囊、胆道和肠道；如定时检查肠道不显影或显影欠佳，提示肝外胆道阻塞。（7）选择性腹腔动脉造影。
    （8）CT及核磁共振成像（MRI）检查。

  • 第15题：

    转基因动物常用的方法有：（）、（）、（）。


    正确答案:逆转录病毒感染法；DNA显微注射法；胚胎干细胞法

  • 第16题：

    基因打靶法联合体细胞核移植法生产转基因动物有何优越性？还有哪些技术障碍？


    正确答案: 优越性：
    （1）动物转基因效率大幅度提高；
    （2）体细胞克隆技术可将基因整合和生产胚胎分开操作，有利于使用基因打靶技术；
    （3）使用基因打靶技术，可以使消除基因位置效益，以达到高效表达的目的；两者相配合，将会大大促进这项技术的产业化，是未来生产动物乳腺反应器的希望和必然趋势。技术障碍：克隆技术的效率比较低，克隆胚胎移植后的流产率相当的高，有时高达80%。

  • 第17题：

    动物转基因常用的外源基因导入方法有哪些？各有何优缺点？


    正确答案: 显微注射法：优点：准确、快捷。缺点：成本很高。
    体细胞核移植方法：优点：经济、有效。缺点：耗时。

  • 第18题：

    生产转基因动物的常用方法有哪些？各有何优缺点？


    正确答案:六种方法：
    （1）原核期胚胎的显微注射技术，优点：有外源基因长度不受限制，可直接用不含原核载体DNA片段的外源基因进行转移；实验周期相对较短。缺点：大动物原核胚的胚胎胞质中含有大量的泡状颗粒，影响其透光性，且显微操作技术含量较高，需要特殊的仪器并可能在注射过程中对胚胎造成损伤等；外源基因能否整合到受体基因组中，要等到子一代出生后经过选择才能确定，这对生育周期长，产仔少的大动物来说，效率就很低，而且整合位点随机，易造成宿主基因组内生命活动所必需的基因失活和导致胚胎或动物死亡；整合一般是指多拷贝首尾串联相接，不利于研究基因结构、功能及表达调控。
    （2）反转录病毒技术，优点：感染率高，易转染，操作简单，而且多数为单拷贝，并可稳定的整合到可识别插入位点。缺点：反转录病毒作为载体，其插入的外源基因最大不能超过10KB，并且容易产生嵌合体。另外，插入的外干扰源基因容易丢失，反转录病毒本身的DNA序列也会干扰外源基因的表达。还有反转录病毒在安全方面仍存在问题。
    （3）慢病毒载体技术，优点：高效的转染率和转基因的高表达。缺点：插入外源基因需小于8.5kb和插入突变，经传代整合后所得原病毒DNA易发生甲基化，影响外源基因表达。
    （4）精子载体技术，优点：简单易行，直接可以用精子作为外源DNA载体进行基因转移。可以对大量的精子细胞进行处理，不损伤卵母细胞，在短时间内生产转基因胚胎，而且整合率高，成本低。缺点：结果不稳定，有的外源DNA并未整合到宿主的基因组中，而是以附加体的形式存在于染色体之外，由于存在于正常的细胞有丝分裂中，附加体丢失的概率很高。
    （5）体细胞核移植转基因技术，优点：动物转基因效率大幅提高，体细胞克隆技术可将基因整合和生产胚胎分开操作，有利于使用基因打靶技术。缺点：克隆技术的效率有待提高。
    （6）胚胎干细胞介导技术，优点：可以将外源基因整合到细胞的染色体组中，然后把这些干细胞经过筛选，找到理想的干细胞，大大减少了整合突变率，还可以消除随机整合产生的位置效应的影响。

  • 第19题：

    转基因动物的筛选方法有哪些？


    正确答案: 转基因动物的筛选方法主要有PCR法、Southern杂交法、荧光原位杂交法和表型观察法。

  • 第20题：

    问答题
    简述转基因动物有那些进展？

    正确答案： （1）将大鼠生长激素注射到小鼠获得超级鼠
    （2）将人生长激素注射到鱼
    （3）克隆羊“多利”
    （4）克隆猴子
    （5）含人体基因的猪
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    问答题
    转基因动物检测的方法有哪些？

    正确答案： 转基因动物产生后，需通过不同水平检测基因的整合、表达等诸多生物学指标。
    （1）DNA水平的检测。
    a.基因组DNA的提取。
    b.基因组PCR的检测。
    c.基因组DNA的分子杂交。
    d.染色体原位杂交。
    （2）RNA水平的检测。
    a.Northern-blotting。
    b.Rnass保护法分析。
    c.逆转录—聚合酶链反应（RT—PCR）。
    （3）蛋白质水平的检测。
    a.ELISA方法。
    b.放射免疫方法。
    c.Western印迹法。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    移植性肿瘤动物模型常用的移植部位有哪些？有何特点？

    正确答案： （1）皮下移植。操作简单、便于观察，但转移发生少，与人体实际有一定距离。
    （2）腹腔移植。位置深、不易观察，可出现一定比例的转移和腹水。
    （3）原位移植。将人类肿瘤移置于动物体的相应部位，是国际上普遍采用的研究方法，其发生率，转移机制较类似人类肿瘤。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    获得转基因哺乳动物细胞的方法有哪些？

    正确答案： ①借助于载体的基因转移；
    ②不需载体的基因转移，如显微注射法、Ca3（PO4）2介导的DNA导入、电击法、脂质体介导的基因转移、染色体介导的基因转移、血影细胞介导的基因转移等。
    解析： 暂无解析

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