蛋白质的分离纯化方法都基于蛋白质的理化性质。

题目

蛋白质的分离纯化方法都基于蛋白质的理化性质。

相似考题

1.分离纯化后蛋白质含量测定常用（ ）

2.从多种蛋白质混合液中分离纯化某种蛋白质，且不能变性，用下列哪种方法较好 （ ）

3.简述蛋白质分离纯化的一般程序。

4.主要用于蛋白质分离纯化的方法是（ ）

参考答案和解析
D
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  • 第1题：

    分离纯化蛋白质的意义有哪些？


    正确答案:
    研究蛋白质的结构与功能：要求纯度高，不变性；
    提取活性的酶或蛋白质：必须保持天然活性状态；
    作为药物或食品添加剂：纯度要求一般。
    一般步骤：材料的选择—原料的预处理—蛋白质的提取—从抽提液中沉淀蛋白质—纯化—蛋白质的结晶。超二级结构：又称模体，是指二级结构单元进一步聚集和组合在一起，形成规则的二级结构聚集体。其形成进一步降低了蛋白质分子的内能，使其更加稳定，它是蛋白质在二级结构基础上形成三级结构时经过的一个新的结构层次。

  • 第2题：

    比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。


    正确答案:凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术，但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开，具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱，小分子的蛋白质进入凝胶孔内，大分子的蛋白质留在外面，然后用洗脱液洗脱，蛋白质依分子大小被洗脱，然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质，具体操作是将样品装入透析袋，然后利用高压或离心力，迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜，蛋白质留在透析袋内。

  • 第3题：

    试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。


    正确答案: 串联亲和纯化（TAP），用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用，通过嵌入一段蛋白质标记，在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记，这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上，使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当，避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化，在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来，这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
    方法及步骤：
    （1）蛋白质标记：由蛋白A的IgG结合区（ProtA）和钙调蛋白结合区（CBP）构成，中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开；
    （2）构建表达标记蛋白的细胞或组织：将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位；
    （3）细胞抽提物的准备；
    （4）串联亲和纯化；
    （5）蛋白质复合体的鉴定。

  • 第4题：

    根据溶解度不同，蛋白质有几种分离纯化方法。


    正确答案: 利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。
    1）等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。
    2）盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐（NaCl）比二价离子的中性盐[（NH4）2SO4]对蛋白质溶解度的影响要小。
    3）低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。一般在0～40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开始变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。

  • 第5题：

    分离纯化蛋白质主要根据蛋白质的哪些性质（）。

    • A、分子的形状和大小
    • B、粘度不同
    • C、溶解度不同
    • D、溶液的pH值
    • E、电荷不同

    正确答案:A,C,E

  • 第6题：

    常见蛋白质分离纯化的方法有哪些？


    正确答案:按照分子大小：透析、超过滤、密度梯度离心、凝胶过滤
    按照溶解度差别：等电点沉淀法、盐析、有机溶剂沉淀
    按照电荷不同分：电泳、离子交换
    蛋白质选择吸附分：结晶磷酸钙
    配体特异性分：亲和层析

  • 第7题：

    请列举出根据蛋白质性质来分离蛋白质的几种方法.


    正确答案:根据相对分子质量用凝胶可过滤层析、SDS-PAGE、离心等；根据带电情况可用离子交换层析；根据等电点可用等电聚焦；另外开可以使用HLPC，双向电泳等其他方法。

  • 第8题：

    填空题
    蛋白质（酶）的分离纯化主要依据蛋白质（酶）的分子大小、（）、（）、（）和（）等性质的差异。

    正确答案： 电荷,溶解度,吸附性质,对配体分子的生物学亲和力
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    问答题
    试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。

    正确答案： 串联亲和纯化（TAP），用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用，通过嵌入一段蛋白质标记，在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记，这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上，使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当，避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化，在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来，这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
    方法及步骤：
    （1）蛋白质标记：由蛋白A的IgG结合区（ProtA）和钙调蛋白结合区（CBP）构成，中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开；
    （2）构建表达标记蛋白的细胞或组织：将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位；
    （3）细胞抽提物的准备；
    （4）串联亲和纯化；
    （5）蛋白质复合体的鉴定。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    填空题
    常用的蛋白质分离纯化方法有（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）等。

    正确答案： 离心,透析,沉淀,层析,电泳,蛋白印迹,蛋白质芯片,质谱法
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。

    正确答案： 凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术，但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开，具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱，小分子的蛋白质进入凝胶孔内，大分子的蛋白质留在外面，然后用洗脱液洗脱，蛋白质依分子大小被洗脱，然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质，具体操作是将样品装入透析袋，然后利用高压或离心力，迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜，蛋白质留在透析袋内。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种？各自的原理是什么？

    正确答案： 1、沉淀：向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液，可使蛋白质的溶解度降低，而从溶液中析出。
    2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。
    3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
    4、层析：A.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离性质，在某一特定pH时，各蛋白质的电荷量及性质不同，故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析，含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。B.分子筛，又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内，滞留时间长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出。
    5、超速离心：既可以用来分离纯化蛋白质，也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质因其密度与形态各不相同而分开。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    病毒纯化方法均是根据病毒的基本理化性质建立的，包括（）

    • A、病毒的核酸是DNA或是RNA；
    • B、病毒的主要化学组成是蛋白质；
    • C、病毒含有脂类和糖类；
    • D、病毒体积微小；

    正确答案:B

  • 第14题：

    以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质，在选择分离纯化方法时应注意哪些问题？


    正确答案:（1）根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质；
    （2）根据蛋白质分子形状和大小的不同来纯化蛋白质；
    （3）根据蛋白质溶解度的不同来纯化蛋白质；
    （4）根据蛋白质电离性质的不同来纯化蛋白质；
    （5）根据蛋白质功能专一性的不同来纯化蛋白质；
    （6）根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来纯化蛋白质；
    （7）根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白质；
    （8）根据蛋白质选择性吸附性质来纯化蛋白质；
    （9）根据蛋白质的某些特殊性质进行纯化。

  • 第15题：

    常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种？各自的原理是什么？


    正确答案: 1、沉淀：向蛋白质水溶液中加入浓的无机盐溶液，可使蛋白质的溶解度降低，而从溶液中析出。
    2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。
    3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
    4、层析：A.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离性质，在某一特定pH时，各蛋白质的电荷量及性质不同，故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析，含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。B.分子筛，又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内，滞留时间长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出。
    5、超速离心：既可以用来分离纯化蛋白质，也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质因其密度与形态各不相同而分开。

  • 第16题：

    简述蛋白质的性质及其分离方法


    正确答案: 1、蛋白质的酸碱性质
    在蛋白质分子中有游离的α-氨基、α-羧基，R基侧链上也有各种功能基团，因此蛋白质的很多物理化学性质与氨基酸是相同的，如蛋白质也是两性化合物；也可把它看成多价离子，也有等电点（pI）等。
    2、蛋白质的胶体性质与沉淀
    （1）蛋白质溶液属于胶体溶液
    根据分散程度可以把分散系统分成三类：分散相质点小于1nm的为真溶液；大于100nm的为悬浊液；介于1-100nm的为胶体溶液。
    分散相质点在胶体系统中保持稳定，需要具备三个条件：一是分散相的质点在1-100nm间；二是分散相质点带有同种电荷，结果质点间互相排斥，不易产生沉淀；三是分散相质点能与溶剂形成溶剂化层，如水分层。质点的水化层使质点不易相互靠近，从而不易产生沉淀。 蛋白质溶液属于胶体溶液，和一般的胶体系统一样也有布朗运动、丁达尔现象及不能通过半透膜等特性。
    （2）蛋白质分子的质点大小、带同种电荷和水化层是稳定蛋白质胶体系统的主要因素。任何影响这些条件的因素都有会影响蛋白质溶液的稳定性，使蛋白质发生沉淀。 沉淀蛋白质的几种常用方法
    ①盐析法：向蛋白质溶液中加入大量的中性盐（如氯经钠、硫酸钠等），使蛋白质脱去水化层而沉淀，这种方法一般会使蛋白质变性。
    ②有机溶剂沉淀法：向蛋白质溶液中加入一定量的有机溶剂（如乙醇、丙酮），使蛋白质脱去水化层，同时降低了溶剂的介电常数，从而使蛋白质沉淀。
    ③重金属盐沉淀法：当溶液pH大于等电点时，蛋白质颗粒带负电，这样就易和重金属离子结合成不溶性盐而沉淀。
    ④生物碱试剂和某些酸类沉淀法：当溶液pH小于等电点时，蛋白质颗粒带正电荷，易与生物碱试剂、酸根离子生成难溶性盐而沉淀 。
    ⑤加热变性沉淀法：当蛋白质处于等电点，加热凝固最完全和最迅速。

  • 第17题：

    蛋白质（酶）的分离纯化主要依据蛋白质（酶）的分子大小、（）、（）、（）和（）等性质的差异。


    正确答案:电荷；溶解度；吸附性质；对配体分子的生物学亲和力

  • 第18题：

    蛋白质分离纯化的一般步骤是什么？


    正确答案:（一）材料制备
    1、选材
    2、破碎
    3、混合物的分离
    （二）粗分级
    盐析、有机溶剂分级沉淀、超速离心法、等电点沉淀法、透 析——按照分子大小进行分离.分离取决于透析袋截留的分子量、超滤——除小分子杂质，分离、浓缩蛋白质。
    （三）细分级
    凝胶层析、离子交换层析、亲和层析、电泳法。

  • 第19题：

    （）就是将某种蛋白质与其他蛋白质杂质分离开来。

    • A、分离
    • B、提取
    • C、纯化
    • D、转化

    正确答案:C

  • 第20题：

    填空题
    分离纯化蛋白质的方法有：（）法，（）法，（）法，（）法及（）法等。

    正确答案： 分级沉淀,透析,层析,凝胶过滤,电泳
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    经典的蛋白质抗原纯化分离方法为（　　）。
    A

    B

    C

    D

    E


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    请列举出根据蛋白质性质来分离蛋白质的几种方法。

    正确答案： 根据相对分子质量用凝胶可过滤层析、SDS-PAGE、离心等；根据带电情况可用离子交换层析；根据等电点可用等电聚焦；另外开可以使用HLPC，双向电泳等其他方法。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    多选题
    分离纯化蛋白质主要根据蛋白质的哪些性质（）。
    A

    分子的形状和大小

    B

    粘度不同

    C

    溶解度不同

    D

    溶液的pH值

    E

    电荷不同


    正确答案： E,D
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    问答题
    根据溶解度不同，蛋白质有几种分离纯化方法。

    正确答案： 利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。
    1）等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。
    2）盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐（NaCl）比二价离子的中性盐[（NH4）2SO4]对蛋白质溶解度的影响要小。
    3）低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。一般在0～40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开始变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。
    解析： 暂无解析

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