从多种蛋白质混合液中分离纯化某种蛋白质，且不能变性，用下列哪种方法较好 （ ）

第1题：

第2题：

第3题：

盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离纯化。

正确答案:正确

第4题：

比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。

正确答案:凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术，但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开，具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱，小分子的蛋白质进入凝胶孔内，大分子的蛋白质留在外面，然后用洗脱液洗脱，蛋白质依分子大小被洗脱，然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质，具体操作是将样品装入透析袋，然后利用高压或离心力，迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜，蛋白质留在透析袋内。

第5题：

试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。

正确答案: 串联亲和纯化（TAP），用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用，通过嵌入一段蛋白质标记，在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记，这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上，使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当，避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化，在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来，这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
方法及步骤：
（1）蛋白质标记：由蛋白A的IgG结合区（ProtA）和钙调蛋白结合区（CBP）构成，中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开；
（2）构建表达标记蛋白的细胞或组织：将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位；
（3）细胞抽提物的准备；
（4）串联亲和纯化；
（5）蛋白质复合体的鉴定。

第6题：

常见蛋白质分离纯化的方法有哪些？

正确答案:按照分子大小：透析、超过滤、密度梯度离心、凝胶过滤
按照溶解度差别：等电点沉淀法、盐析、有机溶剂沉淀
按照电荷不同分：电泳、离子交换
蛋白质选择吸附分：结晶磷酸钙
配体特异性分：亲和层析

第7题：

（）就是将某种蛋白质与其他蛋白质杂质分离开来。

• A、分离
• B、提取
• C、纯化
• D、转化

正确答案:C

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

分离纯化蛋白质的意义有哪些？

正确答案:
研究蛋白质的结构与功能：要求纯度高，不变性；
提取活性的酶或蛋白质：必须保持天然活性状态；
作为药物或食品添加剂：纯度要求一般。
一般步骤：材料的选择—原料的预处理—蛋白质的提取—从抽提液中沉淀蛋白质—纯化—蛋白质的结晶。超二级结构：又称模体，是指二级结构单元进一步聚集和组合在一起，形成规则的二级结构聚集体。其形成进一步降低了蛋白质分子的内能，使其更加稳定，它是蛋白质在二级结构基础上形成三级结构时经过的一个新的结构层次。

第16题：

以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质，在选择分离纯化方法时应注意哪些问题？

正确答案:（1）根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质；
（2）根据蛋白质分子形状和大小的不同来纯化蛋白质；
（3）根据蛋白质溶解度的不同来纯化蛋白质；
（4）根据蛋白质电离性质的不同来纯化蛋白质；
（5）根据蛋白质功能专一性的不同来纯化蛋白质；
（6）根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来纯化蛋白质；
（7）根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白质；
（8）根据蛋白质选择性吸附性质来纯化蛋白质；
（9）根据蛋白质的某些特殊性质进行纯化。

第17题：

下列说法正确的是（）

• A、电泳分离法只能在蛋白质变性条件下进行分离
• B、电泳分离法只能在蛋白质非变性条件下进行分离
• C、色谱法只能在蛋白质变性条件下进行分离
• D、色谱法和电泳法均可在蛋白质变性或非变性条件下进行分离

正确答案:D

第18题：

适用于蛋白质的分离纯化，自不至于使其变性的方法为（）

• A、醇提水沉法
• B、盐析法
• C、酸碱法
• D、水提醇沉法
• E、离心分离法

正确答案:B

第19题：

盐析法分离蛋白质，用什么方法能保持蛋白质活性（）。

• A、透析法
• B、沉淀法
• C、变性
• D、加热

正确答案:A

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：