参考答案和解析
B
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  • 第1题:

    基因工程所用的工具酶有();()、连接酶、修饰酶四大酶类。


    正确答案:核酸酶、聚合酶

  • 第2题:

    基因工程常用的工具酶有哪些?


    正确答案:限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA多聚酶、DNA末端转移酶、逆转录酶

  • 第3题:

    细菌中的限制性核酸内切酶的主要生物化学作用是为了基因工程提供了必不可少的工具酶。


    正确答案:错误

  • 第4题:

    常用的工具酶有哪些?其主要用途是什么?


    正确答案: 限制性核酸内切酶:识别并特异切割DNA碱基序列;DNApol1:催化缺口平移,制备高比度DNA探针;Klenow片段:合成cDNA第二条链,补齐或标记DNA3’端;逆转录酶:催化合成cDNA;DNA连接酶:催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键;末端脱氧核苷酸转移酶:给载体或cDNA加上互补的同聚尾、加标记物;碱性磷酸酶:防止载体自身连接、32p标记5’端.

  • 第5题:

    参与甘油磷脂降解的主要磷脂酶有哪些,它们的作用是什么?


    正确答案:参与甘油磷脂降解的主要磷脂酶主要有:磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶B、磷脂酶C和磷脂酶D。磷脂酶A1水解甘油磷脂1位酯键,磷脂酶A2水解甘油磷脂2位酯键,磷脂酶B水解溶血磷脂1位酯键,磷脂酶C水解甘油磷脂3位磷脂酯键,磷脂酶D水解磷酸与取代基酯键。

  • 第6题:

    氩弧焊常用的工具有哪些?其主要作用是什么?


    正确答案: 焊枪——传导电流、输送氩气、夹持电极;氩气减压器——将高压氩降至工作压力不从心;氩气流量计——控制氩气流量;电磁气阀——启、闭气路。

  • 第7题:

    ()是基因工程中最重要的工具酶,主要来源于()。


    正确答案:限制性内切酶;原核生物

  • 第8题:

    问答题
    I类限制酶具有哪些特点?在基因工程中有什么作用?

    正确答案: I类限制性内切核酸酶的分子量较大,一般在 30 万道尔顿以上,通常由三个不同的亚基所组成。例如限制性内切核酸酶 EcoB 是由 R(135kDa),M(62kDa)和 S(55kDa) 三种亚基组成的复合酶,这三个亚基分别由不同的基因编码。全酶的总分子量为 449kDa,共 5个亚基,其中 R 亚基和M 亚基各两分子。
    I类酶不仅是一种内切核酸酶,同时在酶分子上还具有甲基化酶和 ATPase 的活性,所以是具有多种酶活性的复合酶类。作用时除了需要 Mg2+作辅助因子外,还要求ATP和 S—腺苷甲硫氨酸(SAM)的存在。I类酶具有特异的识别序列,大约 15 个碱基对。I类酶虽然能够在一定序列上识别 DNA分子,并能同 DNA分子作用,因其识别DNA后,要朝一个方向或两个方向移动一段距离(通常为 1000 个碱基左右),并且要形成一个环才能切割 DNA,所以识别位点和切割位点不一致,产生的片段较大。因此在基因工程中作用不大。
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    问答题
    参与甘油磷脂降解的主要磷脂酶有哪些,它们的作用是什么?

    正确答案: 参与甘油磷脂降解的主要磷脂酶主要有:磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶B、磷脂酶C和磷脂酶D。磷脂酶A1水解甘油磷脂1位酯键,磷脂酶A2水解甘油磷脂2位酯键,磷脂酶B水解溶血磷脂1位酯键,磷脂酶C水解甘油磷脂3位磷脂酯键,磷脂酶D水解磷酸与取代基酯键。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    什么是DNA连接酶?分为哪两种?在基因工程中作用的作用特点是什么?

    正确答案: DNA连接酶:能催化DNA分子中相邻的3′-OH末端和5′-磷酸基末端间形成磷酸二酯键的酶。
    常用的DNA连接酶有两种:
    ①E·coli-DNA连接酶特点:来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端,需要DNA作为辅助因子;
    ②T4-DNA连接酶特点:来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。需要ATP作为辅助因子。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    问答题
    什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?

    正确答案: K.lenow酶是1974年 Klenow用枯草杆菌蛋白酶水解 DNA聚合酶 I,得到两个片段,其中大片段的分子量为 75kDa,它具有 5’→ 3’聚合酶和 3’→ 5’外切核酸酶的活性,小片段具有 5’→ 3’外切核酸酶活性。由于大片段失去了 DNA聚合酶 I中会降解 5’引物的 5’→ 3’外切核酸酶的活性,所以在基因工程中更有用。 Klenow酶主要有下列用途:
    (1)修复反应,制备平末端可用 Klenow酶修复限制性内切核酸酶或其分方法产生的 5’或 3’突出末端,制备平末端,这样可以使原来具有不相容的黏性末端的 DNA片段通过平末端重组。如在反应系统中加入放射性同位素标记的脱氧核苷酸,用这种末端填补的方法可以制备3’末端标记的探针。用 Klenow 酶修复 5’突出末端的反应主要是利用了 Klenow 酶的 DNA聚合酶活性,是填补反应;而修复 3’突出末端则是用 Klenow酶的 3’→ 5’外切核酸酶的活性,是切割反应。用 Klenow酶的切割反应来修复 3’突出末端是不理想的,改用 T4DNA 聚合酶或其他的酶是更好的选择。
    (2)标记 DNA3’突出末端(protmding end)该反应分两步进行:先用 3’→ 5’的外切核酸酶活性除去 3’突出末端,产生 3’隐含末端,然后在高浓度的标记底物(α~32p_dNTP)存在下,使降解(3’→ 5’)作用与聚合(5’→ 3’)作用达到平衡。这种反应也叫交换或取代反应(exchange/replacem—entreaction)。不过这一反应用 T4DNA 聚合酶的效果更好,因它的 3’→ 5’外切核酸酶活性较强。
    (3)其他的一些用途:包括用双脱氧末端终止法进行 DNA序列分析、用于 cDNA第二链的合成、在定点突变中用于合成第二链、用引物延伸法(primer extension)制备单链 DNA探针等。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    判断题
    细菌中的限制性核酸内切酶的主要生物化学作用是为了基因工程提供了必不可少的工具酶。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    基因工程的工具酶主要有()和()。


    正确答案:限制性核酸内切酶;DNA连接酶

  • 第14题:

    基因工程操作中除了限制性内切酶,还会用到哪些酶?作用各是什么?


    正确答案:①DNA连接酶;催化DNA分子中相邻的3’-OH末端和5’-磷酸基末端之间形成磷酸二酯键,即能封闭双链DNA上相邻核苷酸之间的单链缺口。
    ②DNA聚合酶Ⅰ;催化聚合脱氧核苷酸,使之逐个接到引物上去,最后形成新的DNA。
    ③碱性磷酸酯酶;催化从单链或双链DNA和RNA分子中除去5’-磷酸残基。
    ④T4多聚核核苷酸激酶;作为DNA的5’-末端标记,标记待测DNA片段。
    ⑤S1核酸酶;产生5’-磷酰基的单核苷酸或寡核苷酸。
    ⑥反向转录酶;催化合成与某种已知RNA互补的DNA链,以获取目的基因。

  • 第15题:

    基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些?


    正确答案: 1)大肠杆菌DNA聚合酶
    2)Klenowfragment
    3)T7DNA聚合酶
    4)T4DNA聚合酶
    5)修饰过的T7DNA聚合酶
    6)逆转录酶
    7)TaqDNA聚合酶

  • 第16题:

    挤压机的主要工具有哪些,各自的主要作用是什么?


    正确答案: 1)主要挤压工具:
    挤压模—用于生产所需要的形状、尺寸的制品。
    穿孔针(芯棒)—对实心锭进行穿孔或用空心锭生产管材。
    挤压垫—防止高温金属与挤压杆直接接触,并防止金属倒流。
    挤压杆—用于传递主柱塞压力。
    挤压筒—用于容纳高温锭坯。
    2)辅助工具:模垫、模支承、模座(压型嘴、模子滑架)、挡环(支承环)、针支承、针接手、导路等。

  • 第17题:

    什么是DNA连接酶?分为哪两种?在基因工程中作用的作用特点是什么?


    正确答案:DNA连接酶:能催化DNA分子中相邻的3′-OH末端和5′-磷酸基末端间形成磷酸二酯键的酶。
    常用的DNA连接酶有两种:
    ①E·coli-DNA连接酶特点:来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端,需要DNA作为辅助因子;
    ②T4-DNA连接酶特点:来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。需要ATP作为辅助因子。

  • 第18题:

    基因工程的DNA聚合酶有几类?主要有哪些活性?


    正确答案: 常用的DNA聚合酶:大肠杆菌DNA聚合酶、T4 DNA聚合酶、T7 DNA聚合酶、耐热DNA聚合酶和反转录酶等。
    活性:能够把脱氧核苷酸连续地加到双链DNA分子引物链的3’ -OH末端,催化核苷酸的聚合作用。DNA聚合酶作用时大多都需要模板,合成产物的序列与模板互补。

  • 第19题:

    简述基因工程中常用的几种工具酶。


    正确答案: (1)限制性核酸内切酶:主要用途是识别DNA特定序列,切断识别点或其周围的DNA链,分为Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类酶。其中Ⅰ类限制性核酸内切酶由3中不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列;Ⅱ类酶切割DNA特异性最强,Ⅲ类酶与Ⅰ类酶相似,是多亚基蛋白,既有内切酶活性又有修饰酶活性
    (2)DNA连接酶:催化DNA中相邻的5‘磷酸基与3’羟基间形成磷酸二酯键,是DNA片段之间的切口封和,主要是将不同的DNA片段连接起来
    (3)DNA聚合酶:催化DNA体外合成反应,大多数需DNA模板,合成产物的序列与模板互补
    (4)磷酸酶:去除DNA的5‘磷酸基团的催化特性,可被用于抑制质粒DNA的自身连接和环

  • 第20题:

    问答题
    说明碱性磷酸酶在基因工程中的主要作用。

    正确答案: 除去DNA5’端的磷酸基,防止DNA重组时载体的自连。
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    填空题
    基因工程的工具酶有:限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA多聚酶、DNA末端转移酶、()

    正确答案: 逆转录酶
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    填空题
    基因工程的工具酶主要有()和()。

    正确答案: 限制性核酸内切酶,DNA连接酶
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    填空题
    ()是基因工程中最重要的工具酶,主要来源于()。

    正确答案: 限制性内切酶,原核生物
    解析: 暂无解析

  • 第24题:

    问答题
    基因工程常用的工具酶有哪些?

    正确答案: 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA多聚酶、DNA末端转移酶、逆转录酶
    解析: 暂无解析