简述PCR技术在免疫学中的应用。
题目
简述PCR技术在免疫学中的应用。
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第1题：
PCR和由PCR衍生的技术是发展最好、应用最广泛的核酸扩增技术。以下技术中不能用于PCR扩增产物分析的是（）
- A、PCR结合探针杂交
- B、显色微量滴定板系统
- C、化学发光技术
- D、扩增产物的直接测序
- E、免疫比浊
正确答案:E -
第2题：
简述兔在免疫学研究中的应用。
正确答案: 兔免疫反应灵敏，血清量产生较多，淋巴结明显，耳静脉和动脉较粗，易于注射和采血，因此兔最大用处是产生抗体，制备高效价和特异性强的免疫血清，制备的免疫血清有：病原体免疫血清、间接免疫血清、抗补体抗体血清、抗组织免疫血清等，广泛用于人、畜类抗血清和诊断血清的研制。 -
第3题：
简述PCR基因扩增仪的实际应用。
正确答案:PCR基因扩增仪广泛应用于医学领域，主要包括：感染性疾病的分子诊断和研究;遗传性疾病的分子诊断和研究;恶性肿瘤的分子诊断和研究; PCR扩增仪在移植配型上的应用;PCR扩增仪在法医学上的应用;PCR扩增仪在分子生物学中其他领域的应用。 -
第4题：
何谓易错PCR技术？简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程
正确答案:指从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行PCR，使扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
过程：双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸。 -
第5题：
简述易错PCR技术与常规PCR技术的异同点。
正确答案:易错PCR技术是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应（PCR），使扩增得到的基因出现碱基配对错误，而引起基因突变的技术过程。
易错PCR技术与常规PCR技术有很多相同之处，都是用DNA聚合酶为催化剂，使用四种脱氧核苷三磷酸为底物，都要添加镁离子，其操作过程也相同，都经过双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸三个步骤。
（1）双链DNA的变性（解链）：将待扩增的模板DNA升温至85~95℃，使DNA双链之间的氢键断开，解离为单链DNA。
（2）引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐步降低至50~70℃时，会与其碱基互补的引物结合形成双链，引物是经过设计后人工合成的与模板DNA某一片段互补的寡核苷酸链，长度为15~30个碱基。
（3）引物延伸：引物结合后，将温度升高至70~75℃，在DNA聚合酶的作用下，以引物为起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物，以目标DNA链为模板，按照碱基配对原则，由5′-端向3′-端的方向延伸，而进行DNA复制。以上三个步骤反复进行，一般经过30次循环，即可使目的基因扩增几百万倍。
易错PCR技术与常规PCR技术的主要不同点在于反应条件有所不同。
（1）在易错PCR中镁离子浓度较高：常规PCR扩增时，镁离子浓度为0.5~2.5mmol/L，进行易错PCR时，在原有基础上提高镁离子的浓度，以稳定非互补的碱基对。
（2）在易错PCR中可以添加一定浓度的锰离子，以降低聚合酶对模板的特异性，而常规PCR不用添加锰离子。
（3）在易错PCR中四种底物（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）的浓度比改版，即采用浓度不平衡的各种底物，是DNA聚合酶在催化基因扩增时，碱基配对错误的出现频率增加，而容易引起基因突变。 -
第6题：
问答题简述易错PCR技术与常规PCR技术的异同点。正确答案： 易错PCR技术是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应（PCR），使扩增得到的基因出现碱基配对错误，而引起基因突变的技术过程。
易错PCR技术与常规PCR技术有很多相同之处，都是用DNA聚合酶为催化剂，使用四种脱氧核苷三磷酸为底物，都要添加镁离子，其操作过程也相同，都经过双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸三个步骤。
（1）双链DNA的变性（解链）：将待扩增的模板DNA升温至85~95℃，使DNA双链之间的氢键断开，解离为单链DNA。
（2）引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐步降低至50~70℃时，会与其碱基互补的引物结合形成双链，引物是经过设计后人工合成的与模板DNA某一片段互补的寡核苷酸链，长度为15~30个碱基。
（3）引物延伸：引物结合后，将温度升高至70~75℃，在DNA聚合酶的作用下，以引物为起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物，以目标DNA链为模板，按照碱基配对原则，由5′-端向3′-端的方向延伸，而进行DNA复制。以上三个步骤反复进行，一般经过30次循环，即可使目的基因扩增几百万倍。
易错PCR技术与常规PCR技术的主要不同点在于反应条件有所不同。
（1）在易错PCR中镁离子浓度较高：常规PCR扩增时，镁离子浓度为0.5~2.5mmol/L，进行易错PCR时，在原有基础上提高镁离子的浓度，以稳定非互补的碱基对。
（2）在易错PCR中可以添加一定浓度的锰离子，以降低聚合酶对模板的特异性，而常规PCR不用添加锰离子。
（3）在易错PCR中四种底物（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）的浓度比改版，即采用浓度不平衡的各种底物，是DNA聚合酶在催化基因扩增时，碱基配对错误的出现频率增加，而容易引起基因突变。解析： 暂无解析 -
第7题：
问答题简述PCR技术原理。正确答案： PCR（polymerasechainreaction）技术称聚合酶链反应技术，又称无细胞克隆技术，是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。其主要过程由变性、退火和延伸三个步骤反复的循环组成。首先，在高温下（95℃，5min），待扩增的DNA双链受热变性，成为两条单链DNA模板；而后在较低温度条件下（37～55℃，30s），两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链；再在高温条件下（72℃，2—5min），通过DNA聚合酶（Taq酶）作用，以引物3′端为合成起点，单核苷酸为原料，沿模板以5′—3′方向延伸，合成DNA新链。这样，每一双链的DNA模板，经过一次解链、退火和延伸三个步骤的热循环后就形成两条双链DNA分子。解析： 暂无解析 -
第8题：
单选题应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪（）。A普通PCR仪
B梯度PCR仪
C原位PCR仪
D荧光PCR仪
E实时PCR仪
正确答案： E解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题何谓易错PCR技术？简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程正确答案： 指从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行PCR，使扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
过程：双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸。解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述PCR在动物医学上的应用。正确答案： （1）用于疾病的诊断。
（2）扩增某些核酸的片段用于制备探针。
（3）研究病毒突变的规律及突变位点，迅速鉴定突变株。
（4）用于食品检验。
（5）用于病原研究。
（6）用于种群分类。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述PCR基因扩增仪的实际应用。正确答案： PCR基因扩增仪广泛应用于医学领域，主要包括：感染性疾病的分子诊断和研究；遗传性疾病的分子诊断和研究；恶性肿瘤的分子诊断和研究；PCR扩增仪在移植配型上的应用；PCR扩增仪在法医学上的应用；PCR扩增仪在分子生物学中其他领域的应用。解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述PCR方法在食品检测中的应用。正确答案： 转基因食品的检测；病原菌、病毒的检测（RT-PCR）、过敏源的检测解析： 暂无解析 -
第13题：
传染病和免疫学诊断技术主要包括血清学诊断技术和（）。
- A、动物接种
- B、凝集试验
- C、中和实验
- D、PCR技术
- E、变态反应
正确答案:E -
第14题：
简述PCR技术的基本原理？
正确答案: PCR反应以待扩增DNA或RNA片段为模板，根据5’和3’端核苷酸顺序合成一对与之互补的寡核苷酸引物，将模板DNA经高温变性，低温退火，中温延伸，并在DNA聚合酶作用下，以四种单核苷酸为原料，单链DNA为模板逐步延伸，合成新链。这样每经过一个循环，DNA拷贝增加一倍，而进行25~35个循环，DNA得以快速扩增，可用于获取目的基因以及检测分析特定的基因缺失、重复、点突变等 -
第15题：
简述PCR的原理及其应用。
正确答案:PCR技术是模拟体内条件下，应用DNA聚合酶反应特异性扩增某一DNA片段的技术。它根据待扩增区域两端已知序列合成两个与模板DNA互补的核苷酸引物，这一单链引物的序列决定了待扩增片段的特异性和片段长度，当有模板DNA存在时，引物便可在一定的复性温度下特异地与热变性形成单链的DNA模板互补形成“退火”。当有DNA聚合酶和dNTP存在时，便可在一定条件下，按5（→3（方向从引物端合成DNA链，从而可以产生倍增的DNA片段，当经过30～35个周期后便可产生100万倍以上的所需DNA片段。由于PCR扩增技术的快速、简便、准确、可靠，因此，该技术已广泛应用于遗传病的基因诊断，病原体的检测，肿瘤的DNA诊断，法医学亲权鉴定，性别鉴定以及在DNA水平上研究生物进化等。 -
第16题：
简述PCR及其临床应用。
正确答案:聚合酶链反应（PCR）：利用DNA聚合酶（如TagDNA聚合酶）等在体外条件下，催化一对引物间的特异DNA片段合成的基因体外扩增技术。引物：单链DNA片段。过程：变性DNA双链-单链（93～98℃），退火引物与模板结合（37～65℃），延伸双链合成（70～75℃）。常见PCR技术的类型：原位PCR、逆转录PCR（RT-PCR）及定量RT-PCR、反向PCR、PCR-SSCP、PCR-ELISA.固相锚定PCR、mRNA差异显示逆转录PCR。PCR的应用：（1）在感染性疾病中的应用：对传染性疾病进行病原学确证诊断；对病原体进行基因分型和同源性比较；克隆病原体各种蛋白质的基因，用于蛋白表达，制备诊断试剂或疫苗；发现新病原体；克隆病原体各种基因，建立基因表达载体，用于基因治疗。（2）遗传性疾病的基因诊断：发现的遗传病有4000多种；产前诊断PCR-RFLP；PCR-ASO。（3）肿瘤的研究及诊断：癌基因与抑癌基因。（4）在法医学中的应用：个人认识；亲子鉴定。（5）其他应用：DNA克隆；引入点突变、缺失或插入；重组PCR；DNA测序；示差PCR。 -
第17题：
问答题简述PCR相关技术及应用。正确答案： 聚合酶链反应，是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的的方法，因此也称为基因的体外扩增法。是20世纪80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点。其应用主要是以下几个方面：
（1）科学研究：
基因克隆；DNA测序；分析突变；基因重组与融合；检测基因的修饰；鉴定与调控蛋白质结构的DNA序列；转座子插入位点的绘图；合成基因的构建；构建克隆或表达载体；检测某基因的内切酶多态性等。
（2）临床诊断：
细菌、病毒、螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体、分枝杆菌等病原体的鉴定；人类遗传病的鉴定；诊断遗传疾患；临测临床标本中病原体的核酸序列；对法医学标本做遗传学鉴定；分析激活癌基因中的突变情况；生成克隆化双链DNA中的特异序列作为探针。解析： 暂无解析 -
第18题：
问答题简述抗原抗体反应的免疫学检测技术在临床实验诊断中的应用。正确答案： (1)单向扩散试验：用于测定多种血浆蛋白(如IgG、IgA、IgM的定量测定)。
(2)双向扩散试验：可用于鉴定抗原或抗体的特征(包括检测某种抗原，如AFP；检测某种抗体，如抗核抗体)、抗原半定量滴定抗体的效价等。
(3)直接凝集反应：用于抗原或抗体的定性或半定量的检测。
(4)间接凝集反应：用于各种抗体和可溶性抗原的检测。
(5)胶乳凝集试验：用于类风湿因子等的检测。
(6)免疫电泳：定性试验，主要应用于纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常免疫球蛋白的识别与鉴定。
(7)放射免疫与放射免疫分析：用于微量蛋白质、激素、小分子药物和肿瘤标志物的定量分析。
(8)荧光免疫技术：用于组织或细胞中的抗原检测及活细胞的分类检测，自身抗体的检测等。
(9)酶免疫技术：用于待测样品中抗原或抗体的定性和定量检测。
(10)化学发光：用于检测待测样品中抗原或抗体的含量。
(11)免疫比浊法：用于检测待测样品中抗原或抗体的含量。解析： 暂无解析 -
第19题：
问答题简述兔在免疫学研究中的应用。正确答案： 兔免疫反应灵敏，血清量产生较多，淋巴结明显，耳静脉和动脉较粗，易于注射和采血，因此兔最大用处是产生抗体，制备高效价和特异性强的免疫血清，制备的免疫血清有：病原体免疫血清、间接免疫血清、抗补体抗体血清、抗组织免疫血清等，广泛用于人、畜类抗血清和诊断血清的研制。解析： 暂无解析 -
第20题：
单选题PCR和由PCR衍生的技术是发展最好、应用最广泛的核酸扩增技术。以下技术中不能用于PCR扩增产物分析的是（）APCR结合探针杂交
B显色微量滴定板系统
C化学发光技术
D扩增产物的直接测序
E免疫比浊
正确答案： D解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题简述PCR的原理及其应用。正确答案： PCR技术是模拟体内条件下，应用DNA聚合酶反应特异性扩增某一DNA片段的技术。它根据待扩增区域两端已知序列合成两个与模板DNA互补的核苷酸引物，这一单链引物的序列决定了待扩增片段的特异性和片段长度，当有模板DNA存在时，引物便可在一定的复性温度下特异地与热变性形成单链的DNA模板互补形成“退火”。当有DNA聚合酶和dNTP存在时，便可在一定条件下，按5（→3（方向从引物端合成DNA链，从而可以产生倍增的DNA片段，当经过30～35个周期后便可产生100万倍以上的所需DNA片段。由于PCR扩增技术的快速、简便、准确、可靠，因此，该技术已广泛应用于遗传病的基因诊断，病原体的检测，肿瘤的DNA诊断，法医学亲权鉴定，性别鉴定以及在DNA水平上研究生物进化等。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述PCR及其临床应用。正确答案： 聚合酶链反应（PCR）：利用DNA聚合酶（如TagDNA聚合酶）等在体外条件下，催化一对引物间的特异DNA片段合成的基因体外扩增技术。引物：单链DNA片段。过程：变性DNA双链-单链（93～98℃），退火引物与模板结合（37～65℃），延伸双链合成（70～75℃）。常见PCR技术的类型：原位PCR、逆转录PCR（RT-PCR）及定量RT-PCR、反向PCR、PCR-SSCP、PCR-ELISA.固相锚定PCR、mRNA差异显示逆转录PCR。PCR的应用：（1）在感染性疾病中的应用：对传染性疾病进行病原学确证诊断；对病原体进行基因分型和同源性比较；克隆病原体各种蛋白质的基因，用于蛋白表达，制备诊断试剂或疫苗；发现新病原体；克隆病原体各种基因，建立基因表达载体，用于基因治疗。（2）遗传性疾病的基因诊断：发现的遗传病有4000多种；产前诊断PCR-RFLP；PCR-ASO。（3）肿瘤的研究及诊断：癌基因与抑癌基因。（4）在法医学中的应用：个人认识；亲子鉴定。（5）其他应用：DNA克隆；引入点突变、缺失或插入；重组PCR；DNA测序；示差PCR。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题简述PCR在领域的广泛应用。正确答案： A.分离已知基因；
B.检测微量DNA；
C.遗传性疾病、肿瘤的诊断。解析： 暂无解析