比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。

题目

比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。

相似考题

1.可用于分离亚细胞成分和蛋白质，是可溶性抗原纯化的第一次过筛的方法是A、选择沉淀法B、亲和层析法C、凝胶过滤法D、离子交换层析法E、超速离心分离法

2.凝胶过滤色谱中,适合于分离糖、蛋白质、苷类成分的葡聚糖凝胶G(Sephadex G),其分离原理是A、吸附性能B、分配比C、离子交换D、分子大小E、水溶性大小

3.蛋白质分离分析技术常用的有哪几种？简述凝胶过滤、电泳基本原理。

4.经典的蛋白质抗原纯化分离方法为A.盐析沉淀法B.有机溶剂沉淀法C.凝胶过滤D.离子交换层析E.亲合层析

参考答案和解析
正确答案:凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术，但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开，具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱，小分子的蛋白质进入凝胶孔内，大分子的蛋白质留在外面，然后用洗脱液洗脱，蛋白质依分子大小被洗脱，然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质，具体操作是将样品装入透析袋，然后利用高压或离心力，迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜，蛋白质留在透析袋内。
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  • 第1题：

    经典的蛋白质抗原纯化分离方法为（）。

    • A、盐析沉淀法
    • B、有机溶剂沉淀法
    • C、凝胶过滤
    • D、离子交换层析
    • E、亲合层析

    正确答案:A

  • 第2题：

    在生物大分子的分离纯化过程中，能将生物大分子与无机盐及有机小分子分离的方法是以下哪些？（）

    • A、离子交换层析
    • B、凝胶过滤层析
    • C、滤纸过滤
    • D、透析
    • E、离心

    正确答案:B,D

  • 第3题：

    常用的纯化多糖的方法有（），（），（），（），凝胶过滤法，还有（）和（）适用于粘多糖的纯化。


    正确答案:乙醇沉淀法；分级沉淀发；季铵盐络合法；离子交换层析法；乙醇分级沉淀法；电泳法

  • 第4题：

    简述凝胶过滤分离氨基酸及蛋白质的原理。


    正确答案:原理：不同分子大小的蛋白质流入凝胶层析柱时，比网孔的分子不能进入网状结构排阻在凝胶珠外，小的分子进入凝胶珠，由于不同大小的分子所经历的路径不同而得到分离。利用了凝胶的多孔性，根据溶剂分子的大小进行分离，大分子先洗下来，小分子后洗下来。

  • 第5题：

    凝胶过滤色谱又称排阻色谱、（），其分离原理主要是（），根据凝胶的（）和被分离化合物分子的（）而达到分离目的。


    正确答案:分子筛色谱；分子筛作用；孔径大小；大小差别

  • 第6题：

    根据分子量的不同达到分离纯化蛋白质目的的方法是（）。

    • A、凝胶过滤
    • B、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
    • C、两者均是
    • D、两者均否

    正确答案:C

  • 第7题：

    问答题
    简述凝胶过滤分离氨基酸及蛋白质的原理。

    正确答案： 原理：不同分子大小的蛋白质流入凝胶层析柱时，比网孔的分子不能进入网状结构排阻在凝胶珠外，小的分子进入凝胶珠，由于不同大小的分子所经历的路径不同而得到分离。利用了凝胶的多孔性，根据溶剂分子的大小进行分离，大分子先洗下来，小分子后洗下来。
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    问答题
    蛋白质分离分析技术常用的有哪几种？简述凝胶过滤、电泳基本原理。

    正确答案： 常见分离技术：离心、盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、电泳、柱层析、透析等。
    凝胶过滤原理：多聚糖具有大小不一的孔径，大分子在孔径中运动距离短，洗脱快，小分子路径长，洗脱时间长。
    电泳原理：凝胶中存在电场效应和分子筛效应：电荷多，运动快；分子小运动快。
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    单选题
    根据分子量的不同达到分离纯化蛋白质目的的方法是（）。
    A

    凝胶过滤

    B

    SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

    C

    两者均是

    D

    两者均否


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    多选题
    以下是利用大小差别来分离纯化蛋白质的技术手段有（）
    A

    凝胶过滤层析

    B

    双向电泳

    C

    差速离心

    D

    亲和层析


    正确答案： A,D
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。

    正确答案： 凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术，但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开，具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱，小分子的蛋白质进入凝胶孔内，大分子的蛋白质留在外面，然后用洗脱液洗脱，蛋白质依分子大小被洗脱，然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质，具体操作是将样品装入透析袋，然后利用高压或离心力，迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜，蛋白质留在透析袋内。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    凝胶过滤和SDS-PAGE 均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？

    正确答案： 凝胶过滤时，凝胶颗粒排阻Mr较大的蛋白质，仅允许Mr较小的蛋白质进入颗粒内部，所以Mr较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过，可以用较小体积的洗脱液从层析柱中洗脱出来。而Mr小的蛋白质必须用较大体积的洗脱液才能从层析柱中洗脱出来。SDS- PAGE分离蛋白质时，所有的蛋白质均要从凝胶的网孔中穿过，蛋白质的相对分子质量越小，受到的阻力也越小，移动速度就越快。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    纯化标记物的方法中利用分子筛效应与电荷效应的是（）

    • A、PAGE法
    • B、HPLC法
    • C、凝胶过滤法
    • D、离子交换层析法
    • E、柱层析分离纯化

    正确答案:A

  • 第14题：

    由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质，可采用（）

    • A、SDS凝胶电泳
    • B、盐析法
    • C、凝胶过滤
    • D、吸附层析

    正确答案:C

  • 第15题：

    试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。


    正确答案: 串联亲和纯化（TAP），用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用，通过嵌入一段蛋白质标记，在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记，这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上，使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当，避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化，在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来，这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
    方法及步骤：
    （1）蛋白质标记：由蛋白A的IgG结合区（ProtA）和钙调蛋白结合区（CBP）构成，中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开；
    （2）构建表达标记蛋白的细胞或组织：将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位；
    （3）细胞抽提物的准备；
    （4）串联亲和纯化；
    （5）蛋白质复合体的鉴定。

  • 第16题：

    分子筛层析（凝胶层析）分离纯化蛋白质的原理是什么？


    正确答案: 1.分子量大的物质不能进入凝胶粒子内部，随洗脱液从凝胶粒子之间的空隙挤落下来，所以大分子物质迁移速度快；
    2.小分子物质要通过凝胶网孔进入凝胶粒子内部，所以小分子物质迁移速度慢。

  • 第17题：

    根据分子量和电量的不同达到分离纯化蛋白质目的的方法是（）。

    • A、凝胶过滤
    • B、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
    • C、两者均是
    • D、两者均否

    正确答案:D

  • 第18题：

    凝胶过滤和SDS-PAGE 均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？


    正确答案:凝胶过滤时，凝胶颗粒排阻Mr较大的蛋白质，仅允许Mr较小的蛋白质进入颗粒内部，所以Mr较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过，可以用较小体积的洗脱液从层析柱中洗脱出来。而Mr小的蛋白质必须用较大体积的洗脱液才能从层析柱中洗脱出来。SDS- PAGE分离蛋白质时，所有的蛋白质均要从凝胶的网孔中穿过，蛋白质的相对分子质量越小，受到的阻力也越小，移动速度就越快。

  • 第19题：

    单选题
    纯化标记物的方法中利用分子筛效应与电荷效应的是（　　）。
    A

    离子交换层析法

    B

    PAGE法

    C

    凝胶过滤法

    D

    HPLC法

    E

    柱层析分离纯化


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    分子筛层析（凝胶层析）分离纯化蛋白质的原理是什么？

    正确答案： 1.分子量大的物质不能进入凝胶粒子内部，随洗脱液从凝胶粒子之间的空隙挤落下来，所以大分子物质迁移速度快；
    2.小分子物质要通过凝胶网孔进入凝胶粒子内部，所以小分子物质迁移速度慢。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    根据分子量和电量的不同达到分离纯化蛋白质目的的方法是（）。
    A

    凝胶过滤

    B

    SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

    C

    两者均是

    D

    两者均否


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    经典的蛋白质抗原纯化分离方法为（）。
    A

    盐析沉淀法

    B

    有机溶剂沉淀法

    C

    凝胶过滤

    D

    离子交换层析

    E

    亲合层析


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    纯化标记物的方法中利用分子筛效应与电荷效应的是（）
    A

    PAGE法

    B

    HPLC法

    C

    凝胶过滤法

    D

    离子交换层析法

    E

    柱层析分离纯化


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

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