串联亲和纯化耦联质谱技术

题目

串联亲和纯化耦联质谱技术

相似考题

1.放射性核素标记亲和标签法是指 ( )A、二维凝胶电泳技术B、蛋白质芯片技术C、质谱技术D、图象分析技术E、蛋白质组差异显示技术

2.液相色谱-质谱联用仪是液相色谱与三重四极杆质谱串联使用的仪器设备

3.Tandem mass spectrometry(串联质谱)

4.离子阱质谱采用时间串联的串联模式

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  • 第1题：

    简述生物传感器耦联质谱技术的基本原理。


    正确答案:生物传感器耦联质谱技术是定性和定量检测蛋白质间相互作用并对其进行鉴定的简便而快速的方法。它是以表面等离子共振（SPR）为基础的生物大分子相互作用的分析技术（BIA）与MALDI-TOF质谱技术的有机结合，其原理是采用1cm*1cm大小的生物传感芯片，该芯片以金黄色的玻璃作为支持物，上面结合有羧甲基葡聚糖聚合物，通过化学修饰可将感兴趣的蛋白质（肽）固定在葡聚糖聚合物上形成传感片，将待测蛋白质或肽溶液通过微射流卡盘流过该固相载体，那些与固相蛋白质（肽）发生相互作用的蛋白质（肽）被滞留在聚合物的表面上，由于芯片表面蛋白质含量增加从而导致入射光的折射率改变，使其表面等离子共振光的共振角发生改变，该改变与表面蛋白的含量呈线性关系，通过SPR-BIA检测系统可实时检测该变化从而实现对蛋白质间相互作用的分析。

  • 第2题：

    基于质谱的蛋白质相互作用研究方法主要有（）。

    • A、串联亲和纯化耦联质谱技术
    • B、噬菌体显示技术
    • C、亲和层析耦联质谱技术
    • D、生物传感器耦联质谱技术
    • E、免疫共沉淀耦联质谱技术

    正确答案:A,C,D,E

  • 第3题：

    四级杆质谱的串联模式是（）

    • A、空间串联
    • B、时间串联
    • C、混合串联
    • D、以上都可以使用

    正确答案:B

  • 第4题：

    试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。


    正确答案: 串联亲和纯化（TAP），用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用，通过嵌入一段蛋白质标记，在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记，这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上，使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当，避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化，在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来，这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
    方法及步骤：
    （1）蛋白质标记：由蛋白A的IgG结合区（ProtA）和钙调蛋白结合区（CBP）构成，中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开；
    （2）构建表达标记蛋白的细胞或组织：将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位；
    （3）细胞抽提物的准备；
    （4）串联亲和纯化；
    （5）蛋白质复合体的鉴定。

  • 第5题：

    基于质谱技术研究蛋白质相互作用的基本步骤主要包括（）。

    • A、靶蛋白制备
    • B、噬菌体显示技术
    • C、酵母双杂交
    • D、蛋白质复合体的纯化
    • E、蛋白质复合体的质谱鉴定

    正确答案:A,D,E

  • 第6题：

    问答题
    试回答蛋白质串联亲和纯化分离原理、方法及步骤。

    正确答案： 串联亲和纯化（TAP），用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用，通过嵌入一段蛋白质标记，在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记，这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上，使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当，避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化，在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来，这样得到的蛋白质复合体接着可以用质谱技术或Edman降解法进行鉴定。
    方法及步骤：
    （1）蛋白质标记：由蛋白A的IgG结合区（ProtA）和钙调蛋白结合区（CBP）构成，中间被一个TEV蛋白酶的酶切位点隔开；
    （2）构建表达标记蛋白的细胞或组织：将编码蛋白质标记的基因片段导入目标蛋白质编码基因的特定部位；
    （3）细胞抽提物的准备；
    （4）串联亲和纯化；
    （5）蛋白质复合体的鉴定。
    解析： 暂无解析

  • 第7题：

    名词解释题
    串联亲和纯化耦联质谱技术

    正确答案： 用于研究蛋白质在生理条件下的相互作用的一种方法。通过嵌入一段蛋白质标记，在目的蛋白的一端或中部导入蛋白质标记，这样便在没有破坏目的蛋白调控序列的基础上，使得被标记的目标蛋白其表达量与其在细胞中自然表达水平相当，避免了由于过量表达的导致非自然条件下的蛋白质相互作用。经过特异性的两步亲和纯化，在生理条件下与目标蛋白发生真实作用的蛋白便可被一起洗脱下来，然后用质谱技术或Edman降解法对得到的蛋白质复合体进行鉴定。
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    单选题
    放射性核素标记亲和标签法是指（）
    A

    二维凝胶电泳技术

    B

    蛋白质芯片技术

    C

    质谱技术

    D

    图象分析技术

    E

    蛋白质组差异显示技术


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    判断题
    离子阱质谱采用时间串联的串联模式
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    简述免疫共沉淀的原理和免疫共沉淀耦联质谱技术的特点。

    正确答案： 原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
    特点：研究的是生理条件下蛋白质之间的相互作用；检测的是细胞裂解液中所有蛋白质与靶蛋白的相互作用；可检测依赖于修饰的蛋白质相互作用。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    名词解释题
    串联质谱

    正确答案： 由两个或更多的质量分析器连接在一起的质谱又称为串联质谱。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    四级杆质谱的串联模式是（）
    A

    空间串联

    B

    时间串联

    C

    混合串联

    D

    以上都可以使用


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    简述免疫共沉淀的原理和免疫共沉淀耦联质谱技术的特点。


    正确答案: 原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
    特点：研究的是生理条件下蛋白质之间的相互作用；检测的是细胞裂解液中所有蛋白质与靶蛋白的相互作用；可检测依赖于修饰的蛋白质相互作用。

  • 第14题：

    离子阱质谱的串联模式是（）

    • A、空间串联
    • B、时间串联
    • C、混合串联
    • D、以上都可以使用

    正确答案:B

  • 第15题：

    从亲和沉淀的机理和分离操作的角度出发，简述亲和沉淀纯化技术的优点。


    正确答案: 从亲和沉淀的机理和分离操作的角度可以看出，亲和沉淀纯化技术具有如下优点：
    1）配基与目标分子的亲和结合作用在自由溶液中进行，无扩散传质阻力，亲和结合速度快；
    2）亲和配基裸露在溶液之中，可更有效的结合目标分子，即亲和沉淀的配基利用率高；
    3）利用成熟的离心或过滤技术回收沉淀，易于规模放大；
    4）亲和沉析法可用于高粘度或含微粒的料液中目标产物的纯化，因此可在分离操作的较初期采用，有利于减少分离操作步骤，降低成本。
    同时，在分离过程的早期阶段除去对目标产物有毒的杂质（如蛋白酶），有利于提高目标产物质量和收率。

  • 第16题：

    下列不属于串联质谱是（）。

    • A、四级杆质谱
    • B、三重四级杆质谱
    • C、离子阱质谱
    • D、四级杆飞行时间质谱

    正确答案:A

  • 第17题：

    串联质谱


    正确答案:串联质谱法是指用质谱作质量分离的质谱方法。还可以称为质谱-质谱法、多级质谱法、二维质谱法和序贯质谱法。其作用有：诱导第一级质谱产生的分子离子裂解，有利于研究子离子和母离子的关系，进而给出该分子离子的结构信息；从干扰严重的质谱中抽取有用数据，大大提高质谱检测的选择性，从而能够测定混合物中的痕量物质。

  • 第18题：

    单选题
    离子阱质谱的串联模式是（）
    A

    空间串联

    B

    时间串联

    C

    混合串联

    D

    以上都可以使用


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第19题：

    判断题
    液相色谱-质谱联用仪是液相色谱与三重四极杆质谱串联使用的仪器设备
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 错
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    简述生物传感器耦联质谱技术的基本原理。

    正确答案： 生物传感器耦联质谱技术是定性和定量检测蛋白质间相互作用并对其进行鉴定的简便而快速的方法。它是以表面等离子共振（SPR）为基础的生物大分子相互作用的分析技术（BIA）与MALDI-TOF质谱技术的有机结合，其原理是采用1cm*1cm大小的生物传感芯片，该芯片以金黄色的玻璃作为支持物，上面结合有羧甲基葡聚糖聚合物，通过化学修饰可将感兴趣的蛋白质（肽）固定在葡聚糖聚合物上形成传感片，将待测蛋白质或肽溶液通过微射流卡盘流过该固相载体，那些与固相蛋白质（肽）发生相互作用的蛋白质（肽）被滞留在聚合物的表面上，由于芯片表面蛋白质含量增加从而导致入射光的折射率改变，使其表面等离子共振光的共振角发生改变，该改变与表面蛋白的含量呈线性关系，通过SPR-BIA检测系统可实时检测该变化从而实现对蛋白质间相互作用的分析。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    名词解释题
    Tandemaffinitypurification串联亲和纯化技术

    正确答案： 一种能子在生理条件下研究蛋白质相互作用、揭示蛋白质复合体相互作用网络的技术。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    多选题
    基于质谱的蛋白质相互作用研究方法主要有（）。
    A

    串联亲和纯化耦联质谱技术

    B

    噬菌体显示技术

    C

    亲和层析耦联质谱技术

    D

    生物传感器耦联质谱技术

    E

    免疫共沉淀耦联质谱技术


    正确答案： E,C
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    多选题
    基于质谱技术研究蛋白质相互作用的基本步骤主要包括（）。
    A

    靶蛋白制备

    B

    噬菌体显示技术

    C

    酵母双杂交

    D

    蛋白质复合体的纯化

    E

    蛋白质复合体的质谱鉴定


    正确答案： B,A
    解析： 暂无解析

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