噬菌体表面展示技术的原理是什么？

题目

噬菌体表面展示技术的原理是什么？

相似考题

1.噬菌体在医学和生物学中有重要意义，其主要应用有A.噬菌体展示技术 B.细菌的鉴定与分型 C.分子生物学的重要实验工具 D.耐药性细菌感染的治疗 E.以上均包括

2.什么是噬菌体展示技术？

3.简述目前噬菌体表面显示技术的局限性。

4.NAT技术的工作原理是什么？

参考答案和解析
正确答案: 利用大肠杆菌丝状单链DNA噬菌体（fd或M13）作为载体，在重组噬菌体颗粒表面展示外源多肽分子.外源蛋白在噬菌体表面上展现，是通过外源蛋白在宿主大肠杆菌分泌性表达过程中与丝状噬菌体外膜结构蛋白（如主要外膜蛋白P8和次要外膜蛋白P3）形成牢靠的复合物而得以实现。
方法一：通过基因重组操作，构建外源基因与噬菌体外膜蛋白基因的融合基因，直接产生出外源蛋白与外膜结构蛋白的嵌合分子.外源Pr C端与P3/P8 N端；外源N端与P6C端。
方法二：在表达基因的构件上，分别使表达出的噬菌体结构蛋白P3或P8的N端和外源蛋白的C端分别融合上一种短的介导蛋白质相互作用的功能结构域。如亮氨酸拉链。
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  • 第1题：

    简述目前噬菌体表面显示技术在蛋白质研究中的应用。


    正确答案: （1）展示功能蛋白结构域：噬菌体显示技术被广泛应用于研究蛋白质与其他配基的相互作用。完整的蛋白质或结构域与噬菌体蛋白形成融合噬菌体，为研究结构与功能的相互关系提供了一个非常有效的工具。
    （2）研究蛋白质相互作用：用靶蛋白质（如受体、抗体等）对该随机文库进行筛选，就可以获得与之结合的短肽序列。对所得序列测定分析，并合成相应的短肽从而可以来研究两个蛋白质之间的相互作用。
    （3）蛋白质定向设计和空间结构改造：可利用靶蛋白从蛋白质随机展示文库中筛选一个与其相互作用的蛋白质，并定点突变，以实现对其特定位点和功能域进行定向选择。因此定点突变结合噬菌体显示技术成了筛选蛋白功能域的一个有力工具。
    （4）新受体和配体的发现：从多肽库中可分离到与天然激素相似的，与受体结合的高亲和力的多肽，利用完整细胞从多肽库中找到受体的高选择性配体，如利用噬菌体显示技术研究发现，人白细胞介素-4受体（IL-4）作为靶标是对药物筛选，及动脉粥样硬化分子成像的重要工具。
    （5）噬菌体显示技术还可用于筛选酶抑制剂、研究细胞信号转导及抗原表位分析等。

  • 第2题：

    是研究基因工程产品蛋白质间相互作用的技术（）

    • A、二维凝胶电泳
    • B、图像分析技术
    • C、质谱技术
    • D、蛋白质芯片技术
    • E、噬菌体展示

    正确答案:E

  • 第3题：

    表面式凝汽器的工作原理是什么？


    正确答案:即利用传热学原理，正常运行时，循环冷却水通过铜管内部，汽机排汽在铜管外部，通过铜管壁进行热交换，排汽的汽化潜热被冷却的循环水吸了取代走。排汽凝结成水。
    由于在相同饱和压力下，蒸汽比水的体积大的多，所以蒸汽凝结体积急骤缩小，而形成真空。

  • 第4题：

    灰阶和窗口技术的应用目的是什么？原理是什么？


    正确答案:灰阶也称灰度级，是数字图像中像素点量化后的整数灰度值。将一定范围内的灰度加以放大，以利肉眼观察的技术称为窗口技术。其目的是使兴趣区的信号得以加强，周围信号得以减弱，从而提高超声检查的对比度分辨力。其原理是，当需要分析某一灰阶范围内的细节时，使低于和高于这一范围的灰阶进行压缩，例如，理想的情况是使低于这一范围的灰阶变为0，高于这一范围的灰阶变为最大，通过灰阶扩展，使选定的灰阶范围的灰阶范围增大，从而提高对比度分辨力。

  • 第5题：

    噬菌体的检查根据什么原理？试述单层琼脂平板法检查噬菌体和双层琼脂平板法测定噬菌体效价的方法及操作过程。


    正确答案: 噬菌体侵染敏感寄主细胞后，释放出子代噬菌体，通过琼脂再扩散到周围的细胞中，继续侵染引起更多细胞裂解，从而在平板上形成一个个肉眼可见的透亮无菌近圆形的空斑，称为噬菌斑，它是噬菌体存在的一种特性标志，由此检出噬菌体的存在。单层琼脂法将指示菌液和经适当稀释的噬检液与单层培养基一起倾注平板。充分混匀并凝固后，置适温下培养约12h，观察计数。此法较简便，可用于噬菌体的效价测定。但若培养基较厚易产生上下噬菌斑重叠现象，影响计数的准确性。双层琼脂法一般采用的效价测定方法。双层琼脂法是先用含2％琼脂的固体培养基倾注底层平板，再在其上倾注一薄层半固体上层培养基，上层培养基事先已与对数期指示菌液和噬检液混合均匀。经适温培养后，便可观察计数。此法的优点是所形成的全部噬菌斑基本处于同一平面上，因而各斑大小均匀，边缘清晰易见，不发生上下噬菌斑重叠现象。此外，因上层半固体培养基较稀，使形成的噬菌斑较大，也有利于计数。因此，该法是一种被普遍采用并能精确测定效价的方法。

  • 第6题：

    问答题
    什么是噬菌体展示技术？

    正确答案： 噬菌体cDNA展示技术：以改构的噬菌体为载体，cDNA基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白基因区，使外源蛋白表达并展示于噬菌体表面，通过亲和富集法筛选表达有特异蛋白质的噬菌体。
    解析： 暂无解析

  • 第7题：

    问答题
    简述目前噬菌体表面显示技术在蛋白质研究中的应用。

    正确答案： （1）展示功能蛋白结构域：噬菌体显示技术被广泛应用于研究蛋白质与其他配基的相互作用。完整的蛋白质或结构域与噬菌体蛋白形成融合噬菌体，为研究结构与功能的相互关系提供了一个非常有效的工具。
    （2）研究蛋白质相互作用：用靶蛋白质（如受体、抗体等）对该随机文库进行筛选，就可以获得与之结合的短肽序列。对所得序列测定分析，并合成相应的短肽从而可以来研究两个蛋白质之间的相互作用。
    （3）蛋白质定向设计和空间结构改造：可利用靶蛋白从蛋白质随机展示文库中筛选一个与其相互作用的蛋白质，并定点突变，以实现对其特定位点和功能域进行定向选择。因此定点突变结合噬菌体显示技术成了筛选蛋白功能域的一个有力工具。
    （4）新受体和配体的发现：从多肽库中可分离到与天然激素相似的，与受体结合的高亲和力的多肽，利用完整细胞从多肽库中找到受体的高选择性配体，如利用噬菌体显示技术研究发现，人白细胞介素-4受体（IL-4）作为靶标是对药物筛选，及动脉粥样硬化分子成像的重要工具。
    （5）噬菌体显示技术还可用于筛选酶抑制剂、研究细胞信号转导及抗原表位分析等。
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    单选题
    是研究基因工程产品蛋白质间相互作用的技术（）
    A

    二维凝胶电泳

    B

    图像分析技术

    C

    质谱技术

    D

    蛋白质芯片技术

    E

    噬菌体展示


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    名词解释题
    噬菌体表面展示技术

    正确答案： 利用丝状噬菌体的外膜结构蛋白与某些特定的外源蛋白或多肽分子形成稳定的复合物，使目标外源蛋白质或多肽富集在噬菌体表面的一种分子展示技术
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    根据不同离子间的质量、电荷比值差异来确定分子量的技术（）
    A

    二维凝胶电泳

    B

    图像分析技术

    C

    质谱技术

    D

    蛋白质芯片技术

    E

    噬菌体展示


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    简述噬菌体肽库技术的原理。

    正确答案： 通过把大量的随机肽段与丝状噬菌体的外壳蛋白（PVIII或PIII）融合表达而被组装展示于噬菌体颗粒的表面，从而组成复个噬菌体都带有一个不同肽段的重组噬菌体库，然后用目标蛋白来筛选与之相互作用的噬菌体肽，通过分析所筛到的噬菌体肽的结构和序列，为蛋白质分子之间（如抗原与抗体，受体与配体，酶与底物）的相互作用机理提供依据，因而，这一技术在免疫学、细胞生物学和药物开发等领域中越来越受到重视。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    是目前蛋白质组研究中最有效的分离技术（）
    A

    二维凝胶电泳

    B

    图像分析技术

    C

    质谱技术

    D

    蛋白质芯片技术

    E

    噬菌体展示


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    什么是噬菌体表面显示技术？


    正确答案:噬菌体表面显示技术是将基因表达产物与亲和选择相结合的技术，其基本原理是将编码“诱饵”蛋白的DNA片段插入噬菌体基因组，并使之与噬菌体外壳蛋白编码基因相融合。该重组噬菌体浸染宿主细菌后，复制形成大量带有杂合外壳蛋白的噬菌体颗粒，直接用于捕获靶蛋白库中与“诱饵”相互作用的蛋白质。基于生物分子与药物靶分子（抗体、受体、抗原、酶的底物等）的亲和力，应用噬菌体表面显示技术可以从多肽库中进行快速筛选，从而成为药物开发的强有力工具。

  • 第14题：

    是目前蛋白质组研究中最有效的分离技术（）

    • A、二维凝胶电泳
    • B、图像分析技术
    • C、质谱技术
    • D、蛋白质芯片技术
    • E、噬菌体展示

    正确答案:A

  • 第15题：

    根据不同离子间的质量、电荷比值差异来确定分子量的技术（）

    • A、二维凝胶电泳
    • B、图像分析技术
    • C、质谱技术
    • D、蛋白质芯片技术
    • E、噬菌体展示

    正确答案:C

  • 第16题：

    细胞表面展示技术


    正确答案:通过可以锚定在细胞表面的特定蛋白质与某些外源蛋白质或多肽形成稳定的复合物，使这些外源蛋白质或多肽富集在细胞表面的一种分子展示技术

  • 第17题：

    噬菌体表面展示技术


    正确答案:利用丝状噬菌体的外膜结构蛋白与某些特定的外源蛋白或多肽分子形成稳定的复合物，使目标外源蛋白质或多肽富集在噬菌体表面的一种分子展示技术

  • 第18题：

    问答题
    简述目前噬菌体表面显示技术的局限性。

    正确答案： （1）受大肠杆菌转化效率的限制，高效转化大肠杆菌的转化效率为107-108，故一般肽库的容量只有109，高于此限制的基因难以表达，受到库容量的限制；
    （2）由于噬菌体显示技术依赖于宿主细胞内基因的表达，因此难以对毒性分子进行有效表达和展示；
    （3）编码肽的基因带有一定的偏爱性，决定了肽库的多样性受到局限；
    （4）氨基酸的修饰受宿主菌限制。
    解析： 暂无解析

  • 第19题：

    问答题
    表面式凝汽器的工作原理是什么？

    正确答案： 即利用传热学原理，正常运行时，循环冷却水通过铜管内部，汽机排汽在铜管外部，通过铜管壁进行热交换，排汽的汽化潜热被冷却的循环水吸了取代走。排汽凝结成水。
    由于在相同饱和压力下，蒸汽比水的体积大的多，所以蒸汽凝结体积急骤缩小，而形成真空。
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    工件表面的形成原理是什么？

    正确答案： 任何一个表面都可以看成是一条曲线（或直线）沿着另一条曲线（或直线）运动的轨迹。这两条曲线（或直线）称为该表面的发生线，前者称为母线，后者称为导线。而加工表面的发生线是通过刀具切削刃和工件接触并发生相对运动而形成的。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    问答题
    噬菌体表面展示技术的原理是什么？

    正确答案： 利用大肠杆菌丝状单链DNA噬菌体（fd或M13）作为载体，在重组噬菌体颗粒表面展示外源多肽分子.外源蛋白在噬菌体表面上展现，是通过外源蛋白在宿主大肠杆菌分泌性表达过程中与丝状噬菌体外膜结构蛋白（如主要外膜蛋白P8和次要外膜蛋白P3）形成牢靠的复合物而得以实现。
    方法一：通过基因重组操作，构建外源基因与噬菌体外膜蛋白基因的融合基因，直接产生出外源蛋白与外膜结构蛋白的嵌合分子.外源Pr C端与P3/P8 N端；外源N端与P6C端。
    方法二：在表达基因的构件上，分别使表达出的噬菌体结构蛋白P3或P8的N端和外源蛋白的C端分别融合上一种短的介导蛋白质相互作用的功能结构域。如亮氨酸拉链。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    名词解释题
    细胞表面展示技术

    正确答案： 通过可以锚定在细胞表面的特定蛋白质与某些外源蛋白质或多肽形成稳定的复合物，使这些外源蛋白质或多肽富集在细胞表面的一种分子展示技术
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    什么是噬菌体表面显示技术？

    正确答案： 噬菌体表面显示技术是将基因表达产物与亲和选择相结合的技术，其基本原理是将编码“诱饵”蛋白的DNA片段插入噬菌体基因组，并使之与噬菌体外壳蛋白编码基因相融合。该重组噬菌体浸染宿主细菌后，复制形成大量带有杂合外壳蛋白的噬菌体颗粒，直接用于捕获靶蛋白库中与“诱饵”相互作用的蛋白质。基于生物分子与药物靶分子（抗体、受体、抗原、酶的底物等）的亲和力，应用噬菌体表面显示技术可以从多肽库中进行快速筛选，从而成为药物开发的强有力工具。
    解析： 暂无解析

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