简述凝胶层析有哪些用途？

第1题：

简述层析方法的种类有哪些？

正确答案: 层析方法的种类很多，常用的有：
①吸附柱层析
②薄层层析
③分配柱层析；凝胶层析；干柱层析 F 纸层析；离子交换层析；气相层析；液相层析等。

第2题：

简述凝胶层析分离的定义及原理

正确答案: 定义：凝胶层析又称为凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等。指以各种多孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术。
原理：凝胶层析柱中装有多孔凝胶，当含有各种组分的混合溶液流经凝胶层析柱时，大分子物质由于分子直径大，不能进入凝胶的微孔，只能分布于凝胶颗粒的间隙中，以较快的速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶的微孔内，不断地进出于一个个颗粒的微孔内外，这就使小分子物质向下移动的速度比大分子的速度慢，从而使混合溶液中各组分按照相对分子质量由大到小的顺序先后流出层析柱，而达到分离的目的。

第3题：

下列哪个不属于高度纯化：（）

A、层析
B、吸附法
C、亲和层析
D、凝胶层析

正确答案:B

第4题：

何谓凝胶层析技术？在发酵工业上有何用途？

正确答案:指混合物随流动相流经装有凝胶作为固定相的层析柱时，混合物中各物质因分子大小不同而被分离的技术。
（1）用于蛋白质、核酸、多糖等溶液的脱盐
（2）用于除去热源物质
（3）用于高分子溶液的浓缩

第5题：

试述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点。

正确答案:（1）凝胶层析：凝胶层析柱中装有多孔凝胶，当含有各组分的混合溶液流经凝胶层析柱时，各组分在层析柱内同时进行两种运动。
①随着溶液流动而进行的垂直向下的移动
②无定向的分子扩散运动（布朗运动）。大分子物质由于直径大，不能进入凝胶的微孔，只能分布于凝胶颗粒的间隙中，以较快的速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶微孔内，使小分子物质向下移动的速度比大分子的慢，从而使混合液中各组分按照相对分子质量由大到小的顺序先后流出层析柱，达到分离的目的。操作过程一般包括装柱、上柱、洗脱等过程。
（2）亲和层析：原理：亲和层析是利用生物分子与配基之间所具有的的可逆的亲和力，使生物分子分离纯化的层析技术。当酶液流经亲和层析试剂时，酶分子与其配基分子结合留在柱内，而其他杂质不与配基结合，可洗涤流出，然后用适当的洗脱液进行洗脱，达到酶的分离纯化。方法：分子对亲和层析、免疫亲和层析、共价亲和层析、疏水层析、金属离子亲和层析、染料亲和层析、凝集素亲和层析。
（3）离子交换层析：原理：离子交换层析是用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析方法。离子交换剂是含有若干活性基因的不溶性高分子物质，通过在不溶性高分子物质（母体）上引入若干可解离基团（活性基团）而制成。带电量小，亲和力小的先被洗脱下来，带电量多，亲和力大的后被洗脱下来。操作过程一般包括：装柱、上柱、洗脱和收集、再生。

第6题：

凝胶过滤层析

正确答案:也叫做分子排阻层析。一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。

第7题：

简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质

正确答案:不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。
b洗脱：增加溶液的离子强度
c梯度洗脱法：改变溶液的pH
d再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。
凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：
a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。
b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。
c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。
d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。

第8题：

问答题

何谓凝胶层析技术？在发酵工业上有何用途？

正确答案：指混合物随流动相流经装有凝胶作为固定相的层析柱时，混合物中各物质因分子大小不同而被分离的技术。
（1）用于蛋白质、核酸、多糖等溶液的脱盐
（2）用于除去热源物质
（3）用于高分子溶液的浓缩

解析：暂无解析

第9题：

问答题

凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。

正确答案：分离生物大分子浓缩和脱盐除热原物质蛋白质分子量测定。
凝胶过滤层析：是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质在凝胶颗粒的微孔中扩散的速度进行分离，大分子移动的速度快，先被洗脱出来而小分子物质移动的速度慢，后被洗脱出来。从而将大分子和小分子分开。

解析：暂无解析

第10题：

问答题

简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？

正确答案：离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。b洗脱：增加溶液的离子强度c梯度洗脱法：改变溶液的pHd再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。

解析：暂无解析

第11题：

问答题

简述葡聚糖凝胶层析的基本操作程序。

正确答案：操作：固定相准备、加样、冲洗展层、分步收集、固定相再生。葡聚糖凝胶在水中浸泡1~3d，装柱，排除气泡，展层剂洗脱，分步收集器收集，用紫外检测等手段确定目标物质管位，合并洗脱液，得到分离纯化的生物大分子。
用过的凝胶可洗涤后反复使用，使用次数过多应反冲法洗去除污染杂质。用后凝胶短期不用，加0.02%叠氮化钠，防霉菌生长；长期不用，用递增浓度酒精浸泡，至酒精95%，沥干，70℃烘干保存。

解析：暂无解析

第12题：

多选题

下列哪些方法能将Glu和Lys分开（　）

A

阴离子交换层析

B

凝胶过滤

C

阳离子交换层析

D

低层析

E

电泳

正确答案： A,B

解析：暂无解析

第13题：

凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。

正确答案:分离生物大分子浓缩和脱盐除热原物质蛋白质分子量测定。
凝胶过滤层析：是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质在凝胶颗粒的微孔中扩散的速度进行分离，大分子移动的速度快，先被洗脱出来而小分子物质移动的速度慢，后被洗脱出来。从而将大分子和小分子分开。

第14题：

分子筛层析指的是（）

A、吸附层析
B、分配层析
C、凝胶过滤
D、亲和层析

正确答案:C

第15题：

下列（）不属于高度纯化

A、层析
B、吸附法
C、亲和层析
D、凝胶层析

正确答案:B

第16题：

简述葡聚糖凝胶层析的基本操作程序。

正确答案: 操作：固定相准备、加样、冲洗展层、分步收集、固定相再生。葡聚糖凝胶在水中浸泡1~3d，装柱，排除气泡，展层剂洗脱，分步收集器收集，用紫外检测等手段确定目标物质管位，合并洗脱液，得到分离纯化的生物大分子。
用过的凝胶可洗涤后反复使用，使用次数过多应反冲法洗去除污染杂质。用后凝胶短期不用，加0.02%叠氮化钠，防霉菌生长；长期不用，用递增浓度酒精浸泡，至酒精95%，沥干，70℃烘干保存。

第17题：

氨基酸的分离（）

A、离子交换层析
B、聚酰胺层析
C、凝胶层析

正确答案:A

第18题：

简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？

正确答案:离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。b洗脱：增加溶液的离子强度c梯度洗脱法：改变溶液的pHd再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。

第19题：