简述凝胶过滤层析的优缺点。
题目
简述凝胶过滤层析的优缺点。
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第1题：
凝胶过滤层析法依据的原理是什么?参考答案：凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构，形成很多孔穴。当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后，各个组分就向固定相的孔穴内扩散，组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部，完全被排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动，它们经历的流程短，流动速度快，所以首先流出;而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部，经历的流程长，流动速度慢，所以最后流出。
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第2题：
下列利用分子筛原理的技术是（）
- A、凝胶过滤
- B、凝胶电泳
- C、阳离子交换层析
- D、阴离子交换层析
- E、透析
正确答案:A -
第3题：
简述以多孔硅胶作为凝胶过滤介质的优缺点。
正确答案: 多孔硅胶是具有刚性亲水性的填料，具有一定直径的多孔网状结构的球状颗粒。
优点：物理化学稳定性高，耐热耐压，使用寿命长。
缺点：柱效较低、表面具有离子性，对蛋白质有吸附性、不能在强碱性环境中使用。 -
第4题：
针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（）。
- A、凝胶过滤
- B、离子交换层析
- C、亲和层析
- D、纸层析
正确答案:C -
第5题：
凝胶过滤层析和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同,为什么？
正确答案:凝胶过滤层析中每一个凝胶珠相当于一个分子筛，故小分子所经过的路径长，落在大分子后面；而凝胶电泳中整块胶板相当于一个分子筛，故大分子受到的阻力大而迁移慢，落在小分子后面。 -
第6题：
凝胶过滤层析（gel filtration chromatography）
正确答案: 也叫做分子排阻层析（molecular-exclusion chromatography）。一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。 -
第7题：
名词解释题凝胶过滤层析正确答案： 也叫做分子排阻层析。一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。解析： 暂无解析 -
第8题：
单选题依据分子大小不同而进行的层析法是（）。A吸附层析
B分配层析
C离子交换层析
D凝胶过滤层析
E亲和层析
正确答案： E解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？正确答案： 离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。b洗脱：增加溶液的离子强度c梯度洗脱法：改变溶液的pHd再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。解析： 暂无解析 -
第10题：
判断题吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换层析等都是利用各种分子间的理化特性的差异等进行分离的。A对
B错
正确答案： 对解析： 暂无解析 -
第11题：
名词解释题Gel-filtrationchromatography凝胶过滤层析柱法正确答案： 一种在层析柱中以凝胶为过滤介质的用于分离纯化蛋白质的方法。解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述以多孔硅胶作为凝胶过滤介质的优缺点。正确答案： 多孔硅胶是具有刚性亲水性的填料，具有一定直径的多孔网状结构的球状颗粒。
优点：物理化学稳定性高，耐热耐压，使用寿命长。
缺点：柱效较低、表面具有离子性，对蛋白质有吸附性、不能在强碱性环境中使用。解析： 暂无解析 -
第13题：
抗AFP-sepharose4B提取AFP的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
粗提免疫球蛋白的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
应用DEAE纤维素提取IgG的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
应用SPA-sepharose4B提取IgG的技术属于A.选择性沉淀(盐析)
B.凝胶过滤层析
C.离子交换层析
D.亲和层析
E.超速离心
请帮忙给出每个问题的正确答案和分析，谢谢！
问题 1 答案解析：D
问题 2 答案解析：A
问题 3 答案解析：C
问题 4 答案解析：D
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第14题：
简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？
正确答案:离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。b洗脱：增加溶液的离子强度c梯度洗脱法：改变溶液的pHd再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。 -
第15题：
简述凝胶层析有哪些用途？
正确答案: ①作为分析工具；作为脱盐工具
②生物大分子的浓缩
③除热原物质
④生物大分子的分离纯化；分子量的测定 -
第16题：
分子筛层析指的是（）
- A、吸附层析
- B、分配层析
- C、凝胶过滤
- D、亲和层析
正确答案:C -
第17题：
凝胶过滤层析
正确答案: 也叫做分子排阻层析。一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。 -
第18题：
单选题可用于测定寡聚蛋白质的分子量，而（）可用于测定寡聚蛋白质各个亚基的分（）子量。ASDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；核磁共振
B聚丙烯酰胺凝胶电泳；凝胶过滤层析
C凝胶过滤层析；等电聚焦电泳
D凝胶过滤层析；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
正确答案： A解析： 暂无解析 -
第19题：
问答题凝胶过滤层析和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同,为什么？正确答案： 凝胶过滤层析中每一个凝胶珠相当于一个分子筛，故小分子所经过的路径长，落在大分子后面；而凝胶电泳中整块胶板相当于一个分子筛，故大分子受到的阻力大而迁移慢，落在小分子后面。解析： 暂无解析 -
第20题：
单选题下列利用分子筛原理的技术是（）A凝胶过滤
B凝胶电泳
C阳离子交换层析
D阴离子交换层析
E透析
正确答案： A解析： 凝胶过滤又称分子筛层析，层析柱内填满带有小孔的颗粒，一般由葡聚糖制成。蛋白质溶液加于柱的顶部，任其往下渗漏，小分子蛋白质进入孔内，因而在柱中滞留时间较长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出，因此不同大小的蛋白质得以分离。 -
第21题：
名词解释题凝胶过滤层析（gel filtration chromatography）正确答案： 也叫做分子排阻层析（molecular-exclusion chromatography）。一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述凝胶过滤层析的优缺点。正确答案： 优点：凝胶属于惰性载体，不带电荷，吸附力弱，操作条件比较温和，温度范围广，不需要有机溶剂，分离效果好
缺点：样品被不断稀释，上样量不能太大，否则分辨率变差解析： 暂无解析 -
第23题：
单选题分子筛层析指的是（）A吸附层析
B分配层析
C凝胶过滤
D亲和层析
正确答案： C解析： 暂无解析