双水相萃取在蛋白质的提取分离中具有较好的应用潜力。请谈谈你对双水相萃取的局限及今后发展方向的理解。

题目

双水相萃取在蛋白质的提取分离中具有较好的应用潜力。请谈谈你对双水相萃取的局限及今后发展方向的理解。


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  • 第1题:

    何谓双水相萃取?常见的双水相构成体系有哪些?


    正确答案: 双水相萃取又称双水相分配法:利用物质在不相溶的、两水相间分配系数的差异进行萃取的方法。
    1.高聚物-高聚物两水相;
    2.高聚物-盐两水相;
    3.非离子表面活性剂水胶束两水相体系;
    4.阴阳离子表面活性剂两水相体系;
    5.醇盐两水相体系;

  • 第2题:

    关于双水相萃取与膜分离技术结合,下列说法正确的是()。

    • A、传质面积大、萃取速率高
    • B、解决了双水相乳化问题
    • C、解决了生物大分子在两相界面吸附的问题
    • D、传质系数增大

    正确答案:A,B,C

  • 第3题:

    关于温度对双水相萃取的影响,下列正确的是()。

    • A、在临界点附近,对蛋白质分配系数影响较小
    • B、远离临界点时,对蛋白质分配系数影响较大
    • C、影响双水相黏度和密度,从而影响蛋白质的分配系数
    • D、大规模的双水相萃取操作需在冷却状态下进行

    正确答案:C

  • 第4题:

    在蛋白质初步提取的过程中,不能使用的方法()。

    • A、双水相萃取
    • B、超临界流体萃取
    • C、有机溶剂萃取
    • D、反胶团萃取

    正确答案:C

  • 第5题:

    双水相萃取主要是用于()的提取。

    • A、小分子糖
    • B、小分子蛋白质
    • C、大分子蛋白质
    • D、氨基酸

    正确答案:C

  • 第6题:

    双水相萃取和反胶束萃取的原理?各自如何在酶的分离纯化中应有?


    正确答案:双水相萃取原理:是依据样品中目标组分在两相间的分配系数不同来进行选择性分离,当样品加入双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种作用力(如疏水键、氢键和离子键等)的存在和环境条件的影响,各组分在两相中的浓度不同。由于分配系数等于系统平衡时两相中目标组分的浓度比,因此,在双水相萃取体系中可以利用各组分K值的不同对物质进行分离。
    应用:双水相萃取已经用于多种生物酶的分离,如利用PEG/磷酸盐双水相体系提取发酵液中的碱性木聚糖酶,利用PEG/羟丙基淀粉体系从黄豆中分离磷酸甘油酸和磷酸甘油醛脱氢酶,利用PEG/K3PO4双水相体系萃取纯化葡萄糖淀粉酶,利用PEG/Dextran双水相体系分离过氢氧化酶等。此外,α-淀粉酶、胆固醇氧化酶、脂肪酶、纤维素酶、L-天冬酰胺酶等在双水相体系中也得到较好的分离。
    反胶束萃取的原理:当蛋白质样品与反胶束溶液表面和蛋白质表面的相互作用,在两相界面形成了包含蛋白质的反胶束团,此时蛋白质以最大限度扩散进入反胶束中,从而实现蛋白质的正萃取。然后,含有蛋白质的反胶束与另一水相接触,通过改变水相条件(如PH、离子强度等),可以调节蛋白质反萃取回水相,从而实现正萃取或反萃取过程,回收目的蛋白质。应用:反胶束萃取已经用于多种酶蛋白的分离,如利用十六烷甲基三甲基溴化铵(CTAB)、异辛烷/正辛醇反胶束溶液萃取纤维素酶,利用二烷基磷酸盐/异辛烷反胶束溶液萃取溶菌酶,利用琥珀酸二酯磺酸钠/异辛烷反胶束溶液提取发酵液中的碱性蛋白酶和α-淀粉酶等。此外,胰蛋白酶、碱性蛋白酶、异柠檬酸脱氢酶、β-羟基丁酸脱氢酶、脂肪酶等也可以利用反胶束萃取进行分离。

  • 第7题:

    问答题
    双水相萃取在蛋白质的提取分离中具有较好的应用潜力。请谈谈你对双水相萃取的局限及今后发展方向的理解。

    正确答案: 局限:易乳化,相分离时间长,成相聚合物成本高,水溶性高聚物大多数粘度大,不易定量控制,水溶性高聚物难以挥发,使反萃剂必不可少,高聚物的回收难;而且,目前对双水相体系的双水动力学研究,双水相萃取设备流程研究,成相聚合物的重复利用以及普通有机物-无机物双水相体系等方面相关文献报道比较少,有待进一步研究和开发。
    发展方向:开发廉价的新型双水相体系,双水相分配与相关技术的集成化,双水相萃取过程的开发,双水相萃取相关理论的发展,亲和双水相萃取技术。
    解析: 暂无解析

  • 第8题:

    单选题
    关于温度对双水相萃取的影响,下列说法正确的是()
    A

    在临界点附近,对蛋白质分配系数影响较小

    B

    远离临界点时,对蛋白质分配系数影响较大

    C

    影响双水相黏度和密度,从而影响蛋白质的分配系数

    D

    大规模的双水相萃取操作需在冷却状态下进行


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    单选题
    在蛋白质初步提取的过程中,不能使用的方法()。
    A

    双水相萃取

    B

    超临界流体萃取

    C

    有机溶剂萃取

    D

    反胶团萃取


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    什么是双水相萃取?双水相萃取的优点是什么?

    正确答案: 双水相萃取是利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法。
    易于放大双水相系统之间的传质过程和平衡过程快速,因此能耗较小,可以实现快速分离。易于进行连续化操作。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    问答题
    双水相萃取的典型流程是什么?双水相有哪些应用?

    正确答案: 双水相萃取的工艺流程一般包括三部分:
    (1)目的物的萃取
    (2)PEG的循环
    (3)无机盐的循环
    应用:
    1、双水相萃取细胞、细胞器和膜
    2、双水相萃取技术在分离中应用
    3、从破碎的细胞中萃取分离酶
    4、双水相提取酶蛋白
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    什么叫双水相萃取技术?在生物产业中双水相萃取法常用于何种物质提取?

    正确答案: 双水相萃取技术((Two-aqueousphaseextraction,简称ATPS)是指亲水性聚合物水溶液在一定条件下可以形成双水相,由于被分离物在两相中分配不同,便可实现分离。
    双水相萃取法常用于胞内酶提取。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    简述双水相萃取技术的应用。


    正确答案: ①基因工程药物的分离与提取
    ②酶工程药物的分离与提取
    ③抗生素的分离与提取
    ④天然植物药用有效成分的分离与提取

  • 第14题:

    以胞内酶提取为例,说明双水相系统工业化萃取的主要流程。


    正确答案: ①使用PEG/盐系统提取胞内酶时,可先使细胞碎片分配到下相,使蛋白质分配在上相;
    ②分离后,上相中的蛋白质可以加入适当的盐,进行二次双水相萃取,目的是利用盐相(下相)去除核酸和多糖;
    ③对上相中的蛋白质进行第三次萃取,通过pH调节,使上相含色素、杂蛋白。下相含有酶,通过超滤去掉残余PEG将酶纯化,PEG回收后可循环使用。

  • 第15题:

    双水相萃取的概念?为什么要进行双水相萃取?双水相萃取的主要操作原则是什么?有何注意事项?


    正确答案: 双水相萃取:利用被提取物在二相中的分配不同而实现分离的目的;由于蛋白质在有机相中容易失活,因此采用的二相均为亲水相,如PEG/葡聚糖、PEG/无机盐等,称为双水相,两相密度不同,轻相富含一种高分子,重相可能富含另一高分子,细胞碎片和蛋白质在二相间的分配系数不同,从而实现分离的目的。
    进行双水相萃取的原因:
    核酸等大部分杂质一般处于下相,可以一并除去;
    下相是无机盐富集相,作为废弃物成本低些;
    蛋白质保持于上相的PEG层有利于其活性的保持;
    碎片在下相有利于离心机的连续分离。
    双水相萃取的主要操作原则是:将碎片分配在下层(调节PEG和无机盐浓度比例,可以控制细胞碎片在上下层间的分配)。
    做的时候要考虑以下几点:PEG浓度;PEG分子量;盐和pH值。

  • 第16题:

    怎样提高双水相体系对蛋白质萃取的选择性?


    正确答案:(1)亲和双水相分配:亲和作用的效应是从复杂的混合物中选择性分离蛋白质,其原理是通过蛋白质与辅酶、底物、产物、抑制剂和抗体的生物特异相互作用,如在亲和层析过程中那样来实现。
    (2)双水相系统中引入液体离子交换剂,对界面电位有很大的影响,导致在分配系统上选择性的增加,该过程能与离子交换层析一样。

  • 第17题:

    以下提取操作过程中,可能会出现乳化现象的有()

    • A、溶媒萃取
    • B、反微团萃取
    • C、双水相萃取
    • D、超临界萃取

    正确答案:A,B

  • 第18题:

    问答题
    怎样提高双水相体系对蛋白质萃取的选择性?

    正确答案: (1)亲和双水相分配:亲和作用的效应是从复杂的混合物中选择性分离蛋白质,其原理是通过蛋白质与辅酶、底物、产物、抑制剂和抗体的生物特异相互作用,如在亲和层析过程中那样来实现。
    (2)双水相系统中引入液体离子交换剂,对界面电位有很大的影响,导致在分配系统上选择性的增加,该过程能与离子交换层析一样。
    解析: 暂无解析

  • 第19题:

    问答题
    双水相萃取的概念是什么?为什么要进行双水相萃取?双水相萃取的主要操作原则是什么?如何做到?

    正确答案: 双水相萃取:
    利用被提取物在二相中的分配不同而实现分离的目的;由于蛋白质在有机相中容易失活,因此采用的二相均为亲水相,如PEG/葡聚糖、PEG/无机盐等,称为双水相,两相密度不同,轻相富含一种高分子,重相可能富含另一高分子,细胞碎片和蛋白质在二相间的分配系数不同,从而实现分离的目的。
    双水相萃取的一般原则:
    一般的原则是将碎片分配在下层(调节PEG和无机盐浓度比例,可以控制细胞碎片在上下层间的分配)其好处有:
    核酸等大部分杂质一般处于下相,可以一并除去;
    下相是无机盐富集相,作为废弃物成本低些;
    蛋白质保持于上相的PEG层有利于其活性的保持;
    碎片在下相有利于离心机的连续分离。
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    多选题
    关于双水相萃取与膜分离技术结合,下列说法正确的是()。
    A

    传质面积大、萃取速率高

    B

    解决了双水相乳化问题

    C

    解决了生物大分子在两相界面吸附的问题

    D

    传质系数增大


    正确答案: B,C
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    问答题
    双水相萃取和反胶束萃取的原理?各自如何在酶的分离纯化中应有?

    正确答案: 双水相萃取原理:是依据样品中目标组分在两相间的分配系数不同来进行选择性分离,当样品加入双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种作用力(如疏水键、氢键和离子键等)的存在和环境条件的影响,各组分在两相中的浓度不同。由于分配系数等于系统平衡时两相中目标组分的浓度比,因此,在双水相萃取体系中可以利用各组分K值的不同对物质进行分离。
    应用:双水相萃取已经用于多种生物酶的分离,如利用PEG/磷酸盐双水相体系提取发酵液中的碱性木聚糖酶,利用PEG/羟丙基淀粉体系从黄豆中分离磷酸甘油酸和磷酸甘油醛脱氢酶,利用PEG/K3PO4双水相体系萃取纯化葡萄糖淀粉酶,利用PEG/Dextran双水相体系分离过氢氧化酶等。此外,α-淀粉酶、胆固醇氧化酶、脂肪酶、纤维素酶、L-天冬酰胺酶等在双水相体系中也得到较好的分离。
    反胶束萃取的原理:当蛋白质样品与反胶束溶液表面和蛋白质表面的相互作用,在两相界面形成了包含蛋白质的反胶束团,此时蛋白质以最大限度扩散进入反胶束中,从而实现蛋白质的正萃取。然后,含有蛋白质的反胶束与另一水相接触,通过改变水相条件(如PH、离子强度等),可以调节蛋白质反萃取回水相,从而实现正萃取或反萃取过程,回收目的蛋白质。应用:反胶束萃取已经用于多种酶蛋白的分离,如利用十六烷甲基三甲基溴化铵(CTAB)、异辛烷/正辛醇反胶束溶液萃取纤维素酶,利用二烷基磷酸盐/异辛烷反胶束溶液萃取溶菌酶,利用琥珀酸二酯磺酸钠/异辛烷反胶束溶液提取发酵液中的碱性蛋白酶和α-淀粉酶等。此外,胰蛋白酶、碱性蛋白酶、异柠檬酸脱氢酶、β-羟基丁酸脱氢酶、脂肪酶等也可以利用反胶束萃取进行分离。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    简述双水相萃取技术的应用。

    正确答案: ①基因工程药物的分离与提取
    ②酶工程药物的分离与提取
    ③抗生素的分离与提取
    ④天然植物药用有效成分的分离与提取
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    双水相萃取主要是用于()的提取。
    A

    小分子糖

    B

    小分子蛋白质

    C

    大分子蛋白质

    D

    氨基酸


    正确答案: A
    解析: 暂无解析