一个理想的纯化程序，随着分离纯化的迸行，比活力应增加。

第1题：

第2题：

简述蛋白质分离纯化的一般程序。

正确答案:首先根据所需蛋白质的性质选取生物体组织细胞作为材料，对所选材料进行细胞破碎、离心等前期处理，获得粗提蛋白质溶液。其次利用蛋白质溶解度的差异对蛋白质进行盐析，使其与杂蛋白分离开来，称为蛋白质的粗分离，再次根据蛋白质的分子大小及形状、电离性质、生物学功能的差异选用凝胶过滤层析、离子交换层析、电泳法、亲和层析等方法进行细分离，可得到较纯的蛋白质，此为蛋白质分离纯化的一般程序。

第3题：

以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质，在选择分离纯化方法时应注意哪些问题？

正确答案:（1）根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质；
（2）根据蛋白质分子形状和大小的不同来纯化蛋白质；
（3）根据蛋白质溶解度的不同来纯化蛋白质；
（4）根据蛋白质电离性质的不同来纯化蛋白质；
（5）根据蛋白质功能专一性的不同来纯化蛋白质；
（6）根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来纯化蛋白质；
（7）根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白质；
（8）根据蛋白质选择性吸附性质来纯化蛋白质；
（9）根据蛋白质的某些特殊性质进行纯化。

第4题：

纯化酶时，酶纯度的主要指标是（）

• A、蛋白质浓度
• B、酶量
• C、酶的总活力
• D、酶的比活力

正确答案:D

第5题：

酶的分离纯化应注意的问题有哪些？

正确答案:根据溶解度变化的纯化方法较适宜于早期纯化阶段，规模较大；而柱层析法或电泳分离更适宜于后期的纯化过程，规模较小。某些价格昂贵的层析介质方法，只适用于纯化过程的最后几步。

第6题：

简述酶分离纯化方法及工艺程序的选择策略。

正确答案:（1）先选用非特异的、低分辨的技术，去除主要的杂质并使酶溶液浓缩；如沉淀、超滤和吸附等。
（2）随后采用高效分离的手段；如离子交换层析、亲和层析。
（3）将最昂贵、最费时的分离单元放在最后阶段。如凝胶过滤层析。

第7题：

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

如何纯化分离的植物原生质体并鉴定其活力？

正确答案: （1）原生质体的纯化
①沉降法：应用原生质体的比重大于溶液的性质而使原生质体沉于底部。
②漂浮法：应用渗透剂含量较高的洗涤液使原生质体漂浮于液体表面。
③梯度离心法：选两种不同渗透浓度的溶液，其中一种溶液密度大于原生质体的密度，另一种溶液小于原生质体的密度。
（2 原生质体活力的测定
①形态识别：形态上完整，呈圆形，含有饱满的细胞质，颜色鲜艳的即为存活的原生质体。
②染色识别
1、0.1%酚番红或Evans蓝染色：有活力的不被染色，死亡的被染上色。
2、双醋酸盐荧光素（FDA）染色法：在荧光显微镜下有荧光的即为有活性的原生质体。

第14题：

琼脂糖凝胶电泳的用途（）

• A、分离和纯化蛋白
• B、盐的分离
• C、糖的分离
• D、水的净化
• E、核酸的分离和纯化

正确答案:E

第15题：

在酶的分离纯化中最理想的实验结果是下列中的哪一项：（）

• A、纯化倍数高，蛋白含量低
• B、回收率小但纯化倍数高
• C、蛋白回收率最高
• D、比活力最大

正确答案:D

第16题：

酶的分离纯化包括（）

• A、抽提
• B、纯化
• C、定型
• D、制剂

正确答案:A,B,D

第17题：

如何对酶分离纯化方法及工艺程序的优劣进行评价？

正确答案:一个完整的酶制备方案包括酶测定方法的建立、材料的选择、预处理对酶性质的初步探索、制定酶的纯化程序、酶成品的保存。
评价分离纯化方法及工艺程序优劣的指标：
1.活力的回收率
2.化倍数：比活力提高的倍数
因此在酶的分离纯化过程中必需测定每一步的酶液体积（mL）、蛋白含量（mg/mL）、酶活（U/mL）.

第18题：

酶的分离纯化

正确答案:包括三个基本环节：
一是抽提，即把酶从材料转入溶剂中来制成酶溶液；
二是纯化，即把杂质从酶溶液中除掉或从酶溶液中把酶分离出来；
三是制剂，即将酶制成各种剂型。

第19题：

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：