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  • 第1题:

    一般来说,固定化酶相对于游离酶,其稳定性会()。

    • A、偏移
    • B、提高
    • C、下降
    • D、不变

    正确答案:B

  • 第2题:

    酶固定化后,性质会发生哪些改变,其原因是什么?


    正确答案:(1)固定化对酶活性的影响:
    固定化以后,酶活性下降,反映速率下降。原因是固定化以后,酶结构、构象的变化会导致活性中心的变化,空间位阻、内扩散阻力都会增大
    (2)最适pH的改变:
    酶经固定化后,pH活性曲线及最适pH有时会发生变化.由带负电载体制备的固定化酶的最适pH比游离酶的最适pH为高;而用带正电载体制备的则情况相反;而用不带电的载体,最适PH不变。
    (3)底物特异性的改变:
    固定化酶的活力,一般比天然酶低.其底物特异性也可能发生变化.一般认为酶被固定到载体后可引起立体障碍,使高分子底物与酶分子表面的接近受到干扰,从而显著降低了酶的活性,而低分子底物则受到立体障碍的影响较小,底物分子容易接近酶分子,因而与原酶活力无显著差别.由此看来改变了高分子底物的特异性。
    (4)最适温度的变化:
    酶固定化后,由于热稳定性提高,最适温度一般随之提高。
    (5)动力学常数的变化:载体与底物带相反电荷:由于静电相吸,固定化酶与游离酶相比,表观米氏常数往往减小;载体与底物带相同电荷,固定化酶的表观Km米氏常数往往比游离酶的米氏常数高;若载体与底物有一方不带电,则往住表现米氏常数不变.表观米氏常数的减少,对固定化酶的实际应用是有利的,可使反应更为完全。
    (6)稳定性普遍增加:主要表现在对热的稳定性;对各种有机溶剂及蛋白质变性剂尿素、盐酸胍的稳定性增加;对蛋白水解酶;贮藏的稳定性也有所提高。稳定性增加有利于酶的应用。

  • 第3题:

    酶固定化后,不仅稳定性增加,而且酶活力也有所提高。


    正确答案:错误

  • 第4题:

    简述提高固定化酶的稳定性的途径


    正确答案:⑴用化学修饰增加与载体相反的电荷
    ⑵固定化酶与底物形成复合物
    ⑶添加隋性蛋白质
    ⑷增强载体凝胶多孔性和结构有序性
    ⑸同时固定化能消除产物抑制的酶

  • 第5题:

    试述有机介质中酶的热稳定性提高的原因。


    正确答案:在惰性有机溶剂中许多酶的热稳定性显著增加,酶的热稳定性与溶剂的含水量密切相关,一般随着含水量的增加热稳定性降低。

  • 第6题:

    一般来说,固定化酶相对于游离酶,其最适温度会()。

    • A、偏移
    • B、提高
    • C、下降
    • D、不变

    正确答案:B

  • 第7题:

    问答题
    简述固定化酶稳定性提高的原因。

    正确答案: (1)固定化后酶分子与载体多点连接,可防止酶伸展变形;
    (2)酶活力的缓慢释放;
    (3)抑制酶的自降解,将酶与固态载体结合后,由于酶失去了分子间相互作用的机会,从而抑制了降解。
    解析: 暂无解析

  • 第8题:

    问答题
    简述天然酶固定化后话力下降的原因。

    正确答案: (1)活性中心重要氮基酸与载体结合;
    (2)酶的空间结构变化;
    (3)酶与底物结合时产生空间位阻。
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    问答题
    酶固定化后,性质会发生哪些改变,其原因是什么?

    正确答案: (1)固定化对酶活性的影响:
    固定化以后,酶活性下降,反映速率下降。原因是固定化以后,酶结构、构象的变化会导致活性中心的变化,空间位阻、内扩散阻力都会增大
    (2)最适pH的改变:
    酶经固定化后,pH活性曲线及最适pH有时会发生变化.由带负电载体制备的固定化酶的最适pH比游离酶的最适pH为高;而用带正电载体制备的则情况相反;而用不带电的载体,最适PH不变。
    (3)底物特异性的改变:
    固定化酶的活力,一般比天然酶低.其底物特异性也可能发生变化.一般认为酶被固定到载体后可引起立体障碍,使高分子底物与酶分子表面的接近受到干扰,从而显著降低了酶的活性,而低分子底物则受到立体障碍的影响较小,底物分子容易接近酶分子,因而与原酶活力无显著差别.由此看来改变了高分子底物的特异性。
    (4)最适温度的变化:
    酶固定化后,由于热稳定性提高,最适温度一般随之提高。
    (5)动力学常数的变化:载体与底物带相反电荷:由于静电相吸,固定化酶与游离酶相比,表观米氏常数往往减小;载体与底物带相同电荷,固定化酶的表观Km米氏常数往往比游离酶的米氏常数高;若载体与底物有一方不带电,则往住表现米氏常数不变.表观米氏常数的减少,对固定化酶的实际应用是有利的,可使反应更为完全。
    (6)稳定性普遍增加:主要表现在对热的稳定性;对各种有机溶剂及蛋白质变性剂尿素、盐酸胍的稳定性增加;对蛋白水解酶;贮藏的稳定性也有所提高。稳定性增加有利于酶的应用。
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  • 第10题:

    判断题
    酶固定化后,不仅稳定性增加,而且酶活力也有所提高。
    A

    B


    正确答案:
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  • 第11题:

    填空题
    酶经过固定化后活力大多(),稳定性获得()。

    正确答案: 下降,提高
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  • 第12题:

    问答题
    简述酶固定化技术的几种主要方法,并比较其优缺点。

    正确答案: (1)吸附法:通过载体表面和酶分子表面之间的氢键、疏水键和π-电子亲和力等物理作用力,将酶固定于不溶性载体的方法。
    (2)结合法:选择适宜的载体,使之通过共价键或离子键,与酶结合在一起的固定化方法,称为结合法。根据酶与载体结合的化学键不同,结合法分为离子键结合法和共价键结合法。
    (3)交联法:利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间,酶分子与惰性蛋白间,或酶分子与载体间进行交联反应,以共价键制备固定化酶的方法。
    (4)包埋法:将聚合物的单体和酶溶液混合后,借助聚合促进剂(包括交联剂)的作用使单体进行聚合,从而将酶包埋于聚合物中的固定化方法。吸附法的优点是酶的活性中心不易被破坏,且酶的高级结构变化少,酶活力损失很少。缺点是酶与载体相互作用力弱、酶容易从载体上脱落下来。
    离子结合法的优点是操作简单,处理条件温和,酶的高级结构和活性中心的氨基酸残基不易被破坏,能得到酶活回收率高的固定化酶。缺点是载体和酶的结合力比较弱,容易受缓冲液种类或pH的影响,在离子强度高的条件下进行反应时,酶往往会从载体上脱落。
    共价结合法的优点是酶与载体结合牢固,稳定性好,一般不会因底物浓度高或存在盐类等原因而轻易脱落,这有利于连续使用。缺点是反应条件苛刻,操作复杂,而且由于采用了比较激烈的反应条件,可能会引起酶蛋白高级结构的变化,破坏部分活性中心,因此往往不能得到比活力高的固定化酶,其酶活回收率一般为30%左右,有时甚至底物的专一性等酶的性质也会因固定化而发生变化。
    交联法的优点是操作简便。缺点是交联反应的过程往往比较激烈,许多酶易在固定化过程中失效,酶回收率不高。
    包埋法优点是一般不会与酶蛋白的氨基酸残基进行结合反应,很少改变酶的高级结构,故而一般比较安全,酶活回收率较高。缺点是聚合过程中由于自由基的产生、放热以及酶和试剂间可能发生化学反应等,也往往会导致酶的失活。而且只适合作用于小分子底物和产物的酶。
    包埋、共价结合、交联三种虽结合力强,但不能再生、回收;物理吸附法制备简单,成本低,能回收再生,但结合差,在受到离子强度、pH变化影响后,酶会从载体上游离下来;包埋法各方面较好,但不适于大分子底物和产物。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    简述固定化酶稳定性提高的原因。


    正确答案:①固定化增加了酶活性构象的牢固程度,可防止酶分子伸展变形;
    ②抑制酶的自身降解。
    ③固定化部分阻挡了外界不利因素对酶的侵袭。

  • 第14题:

    酶固定化后其性质会发生什么变化?


    正确答案:1.酶结构的改变:固定化导致酶的活性中心或调节中心的构象发生变化。
    2.微环境的改变:微环境是指在固定化酶附近的局部环境,而把主体溶液称为宏观环境。
    3.位阻效应:指载体的遮蔽作用。
    4.分配效应:由于载体的亲水和疏水性质使酶的底物、产物或其它效应物在载体和溶液间发生不等分配,改变酶反应系统的组成平衡,从而影响酶反应速度:A.如果载体与底物带相同电荷,则酶的Km值将因固定化而增大;如果带相反电荷,则Km值减小;B.当载体带正电荷时,酶活性-pH曲线向酸性方向偏移;当载体带负电荷时,酶活性-pH曲线向碱性方向偏移;C.如载体是疏水性,底物为极性物质或电荷物质,则酶的Km值将因固定化而降低。
    5.扩散限制效应:是指底物或其它效应物的迁移和运转受到限制。
    (1)外扩散限制:指底物或其它效应物从溶液穿过包围在固定化酶周围近于停滞的液膜层到固定化酶表面所受到的限制。可通过充分搅拌或混合予以减轻或消除。
    (2)内扩散限制:指底物或其它效应物从固定化酶颗粒表面进入颗粒内部酶活性位点的限制。

  • 第15题:

    简述固定化对酶性质的影响(固定化酶的性质)。


    正确答案:(1)稳定性大多数酶固定化后,稳定性都增强,操作寿命和保存寿命也延长。
    (2)固定化酶的最适温度和最适pH固定化后,大多数酶的热稳定性提高,所以最适温度也随之提高。酶固定化后,对底物作用的最适pH和酶活力-pH曲线常常会发生偏移。带负电荷的载体固定化的酶的最适pH向碱性偏移,带正电荷的载体固定化的酶的最适pH向酸性偏移。
    (3)固定化酶的动力学特征固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。
    (4)固定化酶的专一性酶固定化后,一般不会改变其专一性。但也有少数情况酶固定化后专一性会发生改变。

  • 第16题:

    简述酶固定化技术的几种主要方法,并比较其优缺点。


    正确答案:(1)吸附法:通过载体表面和酶分子表面之间的氢键、疏水键和π-电子亲和力等物理作用力,将酶固定于不溶性载体的方法。
    (2)结合法:选择适宜的载体,使之通过共价键或离子键,与酶结合在一起的固定化方法,称为结合法。根据酶与载体结合的化学键不同,结合法分为离子键结合法和共价键结合法。
    (3)交联法:利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间,酶分子与惰性蛋白间,或酶分子与载体间进行交联反应,以共价键制备固定化酶的方法。
    (4)包埋法:将聚合物的单体和酶溶液混合后,借助聚合促进剂(包括交联剂)的作用使单体进行聚合,从而将酶包埋于聚合物中的固定化方法。吸附法的优点是酶的活性中心不易被破坏,且酶的高级结构变化少,酶活力损失很少。缺点是酶与载体相互作用力弱、酶容易从载体上脱落下来。
    离子结合法的优点是操作简单,处理条件温和,酶的高级结构和活性中心的氨基酸残基不易被破坏,能得到酶活回收率高的固定化酶。缺点是载体和酶的结合力比较弱,容易受缓冲液种类或pH的影响,在离子强度高的条件下进行反应时,酶往往会从载体上脱落。
    共价结合法的优点是酶与载体结合牢固,稳定性好,一般不会因底物浓度高或存在盐类等原因而轻易脱落,这有利于连续使用。缺点是反应条件苛刻,操作复杂,而且由于采用了比较激烈的反应条件,可能会引起酶蛋白高级结构的变化,破坏部分活性中心,因此往往不能得到比活力高的固定化酶,其酶活回收率一般为30%左右,有时甚至底物的专一性等酶的性质也会因固定化而发生变化。
    交联法的优点是操作简便。缺点是交联反应的过程往往比较激烈,许多酶易在固定化过程中失效,酶回收率不高。
    包埋法优点是一般不会与酶蛋白的氨基酸残基进行结合反应,很少改变酶的高级结构,故而一般比较安全,酶活回收率较高。缺点是聚合过程中由于自由基的产生、放热以及酶和试剂间可能发生化学反应等,也往往会导致酶的失活。而且只适合作用于小分子底物和产物的酶。
    包埋、共价结合、交联三种虽结合力强,但不能再生、回收;物理吸附法制备简单,成本低,能回收再生,但结合差,在受到离子强度、pH变化影响后,酶会从载体上游离下来;包埋法各方面较好,但不适于大分子底物和产物。

  • 第17题:

    固定化酶稳定性升高表现在()

    • A、固定化增加了酶的耐热性
    • B、固定化增大了酶对变性剂、抑制剂的抵抗能力
    • C、固定化减轻了蛋白酶的破坏作用
    • D、固定化可以增强贮存稳定性和操作稳定性

    正确答案:A,B,C,D

  • 第18题:

    一般来说,固定化酶相对于游离酶,其活力会()。

    • A、偏移
    • B、提高
    • C、下降
    • D、不变

    正确答案:C

  • 第19题:

    问答题
    简述提高固定化酶的稳定性的途径

    正确答案: ⑴用化学修饰增加与载体相反的电荷
    ⑵固定化酶与底物形成复合物
    ⑶添加隋性蛋白质
    ⑷增强载体凝胶多孔性和结构有序性
    ⑸同时固定化能消除产物抑制的酶
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    问答题
    简述酶固定化后,其稳定性得以提高的原因。

    正确答案: (1)固定化增加了酶活性构象的牢固程度,并且固定化后酶分子与载体多点连接,可防止酶分子伸展变形。
    (2)抑制酶自身降解。将酶与固定化载体结合后,酶失去了分子间相互作用的机会,从而抑制了其自身的降解过程。
    (3)固定化部分阻挡了外界不利因素对酶的侵袭。
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    问答题
    简述固定化对酶性质的影响(固定化酶的性质)。

    正确答案: (1)稳定性大多数酶固定化后,稳定性都增强,操作寿命和保存寿命也延长。
    (2)固定化酶的最适温度和最适pH固定化后,大多数酶的热稳定性提高,所以最适温度也随之提高。酶固定化后,对底物作用的最适pH和酶活力-pH曲线常常会发生偏移。带负电荷的载体固定化的酶的最适pH向碱性偏移,带正电荷的载体固定化的酶的最适pH向酸性偏移。
    (3)固定化酶的动力学特征固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。
    (4)固定化酶的专一性酶固定化后,一般不会改变其专一性。但也有少数情况酶固定化后专一性会发生改变。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    一般来说,固定化酶相对于游离酶,其稳定性会()。
    A

    偏移

    B

    提高

    C

    下降

    D

    不变


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    判断题
    酶经过固定化后活力大多下降,稳定性获得提高。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析