简述原生质体的分离方法。
题目
简述原生质体的分离方法。
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第1题：
简述酶法分离植物原生质体的基本原理。
正确答案: 植物细胞壁由纤维素，半纤维素，果胶质等组成，通过用酶把原生质体外的细胞壁分解，便能得到完整的原生质体。 -
第2题：
简述X平板法培养植物原生质体的原理和方法。
正确答案: 为了减少一部恩细胞和组织所产生的有害物质对其他存活细胞的影响，将一定量的活性炭加到培养基，以改善细胞或组织的生长与细胞群落的形成。
将固体平板分成四块，在2和4中加入储备培养基（含1%活性炭），1和3不加活性炭培养原生质体。 -
第3题：
目前用做原生质体分离的材料有哪些？
正确答案: 幼嫩叶或无菌试管苗叶片、下胚轴和子叶、培养细胞（愈伤组织、细胞悬浮培养物）、花粉细胞。一般认为由叶肉组织分离的原生质体，遗传性较为一致。 -
第4题：
原生质体分离的方法有哪些，各有何优缺点
正确答案: （1）机械法
优点：可避免酶制剂对原生质体的破坏。
缺点：获得完整原生质体的数量少，使用此法的植物种类有限。
（2）酶解法
优点：可获得大量原生质体，条件温和，原生质体完整性好，几乎所有植物都
可用此法。
缺点：影响原生质体的活力。 -
第5题：
影响原生质体培养的因素有哪些？简述原生质体培养的程序。
正确答案: （1）原生质体的活力
（2）原生质体起始密度
（3）细胞壁再生速度
（4）培养基营养
（5）培养条件
（6）供试材料的基因型和生理状态
原生质体分离——原生质体纯化——原生质体培养——原生质体胞壁再生——细胞团形成——器官形成、植株再生。 -
第6题：
试述原生质体分离的方法和步骤。
正确答案:（1）机械法：在细胞质壁分离的状态下，用利刀切割细胞壁，使原生质体流出或释放出来。
（2）酶解法：常用的制备原生质体的酶包括；果胶酶、蜗牛酶、纤维素酶等。实际应用中需要根据不同的细胞来源选择合适的酶。
酶解法分：
顺序法（两步法）：先用果胶酶预处理，再用纤维素酶直接法（一步法）：直接用果胶酶和纤维素酶
优点：获得量大，适用广泛。
缺点：商品酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。会影响所获原生质体的活力。 -
第7题：
问答题简述几种原生质体培养方法的特点。正确答案： 固体：培养基用琼脂固化，灭菌后在45度植入原生质体。生长速度慢，容易观察培养效果和生长情况。
液体利用液体培养基培养，通气性好，排泄物容易扩散，易于补加培养基，易于转移，一旦有污染就导致实验失败。
混合两相：兼顾以上。解析： 暂无解析 -
第8题：
问答题简述两步法分离植物原生质体的程序。正确答案： 先用果胶酶离析植物组织，使植物组织从组织细胞中分离出来，然后手机细胞经洗涤后用纤维素酶解离细胞壁，最后获得原生质体。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题原生质体培养有哪些常用方法？用哪些方法可以实现原生质体融合？正确答案： 培养方法可以分为固体培养法和液体培养法两大类，后来又由此派生出一些不同形式的原生质体培养方法。常用的有液体浅层培养法、固体平板法、悬滴培养法等。
原生质体融合有自发融合、诱导融合。其中诱导融合的方法有：硝酸钠法、多聚化合物法、高pH高Ca++法、聚乙二醇法、还有电融合等方法。解析： 暂无解析 -
第10题：
填空题植物原生质体分离的方法有（）和机械法。正确答案： 酶解法解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述原生质体分离培养的主要过程。正确答案： 从植物材料的选择—分离原生质体—原生质体纯化—原生质体培养解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述酶法分离植物原生质体的基本原理。正确答案： 植物细胞壁由纤维素，半纤维素，果胶质等组成，通过用酶把原生质体外的细胞壁分解，便能得到完整的原生质体。解析： 暂无解析 -
第13题：
简述几种原生质体培养方法的特点。
正确答案: 固体：培养基用琼脂固化，灭菌后在45度植入原生质体。生长速度慢，容易观察培养效果和生长情况。
液体利用液体培养基培养，通气性好，排泄物容易扩散，易于补加培养基，易于转移，一旦有污染就导致实验失败。
混合两相：兼顾以上。 -
第14题：
什么叫植物原生质体？植物原生质体活力的鉴定方法主要有那些？
正确答案:原生质体（protoplast）：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。
1、形态观察
2、胞质环流法
3、以氧的摄入量做指标
4、染色法（FDA染色法） -
第15题：
原生质体的分离方法有哪些？
正确答案: （1）机械分离法
缺点：获得完整的原生质体的数量比较少，能够用此法产生原生质体的植物种类受到限制。
优点：该方法可避免酶制剂对原生质体的破坏作用。
（2）酶解分离法
优点：酶解法可以获得大量的原生质体，而且几乎所有植物或它们的器官、组织或细胞均可用酶解法获得原生质体。
缺点：这些酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。用酶法降解细胞壁，会影响所获原生质体的活力。 -
第16题：
人工获得一个杂种植株，需要下列哪项步骤（）
- A、分离原生质体；诱导原生质体融合；组织培养；得到杂种植株
- B、分离原生质体；原生质体融合；杂种植株
- C、获取细胞；原生质融合；组织培养；杂种植株
- D、获取细胞；原生质直接融合；组织培养
正确答案:A -
第17题：
分离原生质体的方法。
正确答案: ①机械分离法：能避免酶制剂对原生质体的破坏作用，但产量少；
②酶解分离法。 -
第18题：
简述固定化原生质体的制备方法与特点。
正确答案:固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的原生质体称为固定化原生质体。
（1）固定化原生质体的制备包括原生质体的制备和原生质体固定化两个阶段。
①原生质体的制备：一般来说，原生质体的制备过程是首先将对数生长期的细胞收集起来，悬浮在含有渗透压稳定剂的高渗缓冲液中；然后加入适宜的细胞壁水解酶，在一定的条件下作用一段时间，使细胞壁破坏；分离除去细胞壁碎片、未破坏的细胞以及细胞壁水解酶，而得到球状原生质体。
②原生质体固定化：原生质体固定化：原生质体制备好后，把离心收集到的原生质体重新悬浮在含有渗透压稳定剂的缓冲液中，配成一定浓度的原生质体悬浮液，然后采用凝胶包埋法制成固定化原生质体。
（2）、固定化原生质体具有下列显著特点：
①由于没有细胞壁，细胞结构不完整，失去增殖能力，但是由于细胞膜内的结构完整，保持了细胞原有的新陈代谢特性。
②固定化原生质体由于解除了细胞壁这一扩散屏障，可增加细胞膜的通透性，有利于氧气和营养物质的传递和吸收，也有利于胞内物质的分泌，可显著提高产率。
③固定化原生质体由于有载体的保护作用，具有较好的操作稳定性和保存稳定性，可反复使用和连续使用较长时间，利于连续化生产，在4˚C保存较长时间后仍能保持其生产能力。
④固定化原生质体易于何发酵产物分开，有利于产物的分离纯化，提高产品质量。
⑤固定化原生质体发酵的培养基中需要添加渗透压稳定剂，以保存原生质体的稳定性。这些渗透压稳定剂在发酵结束后，可用层析或膜分离技术等方法与产物分离。 -
第19题：
问答题简述固定化原生质体的制备方法与特点。正确答案： 固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的原生质体称为固定化原生质体。
（1）固定化原生质体的制备包括原生质体的制备和原生质体固定化两个阶段。
①原生质体的制备：一般来说，原生质体的制备过程是首先将对数生长期的细胞收集起来，悬浮在含有渗透压稳定剂的高渗缓冲液中；然后加入适宜的细胞壁水解酶，在一定的条件下作用一段时间，使细胞壁破坏；分离除去细胞壁碎片、未破坏的细胞以及细胞壁水解酶，而得到球状原生质体。
②原生质体固定化：原生质体固定化：原生质体制备好后，把离心收集到的原生质体重新悬浮在含有渗透压稳定剂的缓冲液中，配成一定浓度的原生质体悬浮液，然后采用凝胶包埋法制成固定化原生质体。
（2）、固定化原生质体具有下列显著特点：
①由于没有细胞壁，细胞结构不完整，失去增殖能力，但是由于细胞膜内的结构完整，保持了细胞原有的新陈代谢特性。
②固定化原生质体由于解除了细胞壁这一扩散屏障，可增加细胞膜的通透性，有利于氧气和营养物质的传递和吸收，也有利于胞内物质的分泌，可显著提高产率。
③固定化原生质体由于有载体的保护作用，具有较好的操作稳定性和保存稳定性，可反复使用和连续使用较长时间，利于连续化生产，在4˚C保存较长时间后仍能保持其生产能力。
④固定化原生质体易于何发酵产物分开，有利于产物的分离纯化，提高产品质量。
⑤固定化原生质体发酵的培养基中需要添加渗透压稳定剂，以保存原生质体的稳定性。这些渗透压稳定剂在发酵结束后，可用层析或膜分离技术等方法与产物分离。解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题简述X平板法培养植物原生质体的原理和方法。正确答案： 为了减少一部恩细胞和组织所产生的有害物质对其他存活细胞的影响，将一定量的活性炭加到培养基，以改善细胞或组织的生长与细胞群落的形成。
将固体平板分成四块，在2和4中加入储备培养基（含1%活性炭），1和3不加活性炭培养原生质体。解析： 暂无解析 -
第21题：
判断题机械法分离原生质体的主要缺点是原生质体的产量很低、方法繁琐费力。A对
B错
正确答案： 错解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述原生质体的分离方法。正确答案： （1）机械分离法：先对材料进行质壁分离处理，然后切割。
（2）酶法分离：
一步法：将果胶酶和纤维素酶等混合处理材料，直接分离获得原生质体。
二步法：先用果胶酶处理材料，降解细胞间层使细胞分离，再用纤维素酶水解胞壁释放原生质体。解析： 暂无解析 -
第23题：
判断题对分离原生质体的材料进行低温预处理的目的是为了提高原生质体的产量。A对
B错
正确答案： 错解析： 暂无解析