什么是基因组文库法？其构建方法是怎样的？

题目

什么是基因组文库法？其构建方法是怎样的？

相似考题

1.以下关于cDNA文库和基因组文库的关系说法正确的是()A、cDNA文库比基因组文库大B、cDNA文库比基因组文库小C、cDNA文库和基因组文库一样大D、二者大小随机，不能比较

2.简述基因组文库构建的基本操作？

3.重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）A、通过PCR合成B、化学直接合成C、构建cDNA文库D、构建基因组文库E、从基因组DNA中直接提取

4.什么叫基因组文库？cDNA文库？有什么区别？

参考答案和解析
正确答案: 采用限制性酶将基因组DNA切成片段，每一DNA片段都与一个载体分子拼接成重组DNA。将所有的重组DNA分子都引入宿主细胞并进行扩增，得到分子克隆的混合体。简单的说就是汇集某一基因组所有DNA序列的重组DNA群体。以λ噬菌体和柯斯质粒为载体构建。
其具体的构建方法：
（1）从生物体提取大片断的基因组DNA；
（2）用适当的限制性内切酶（常为4碱基识别位点）进行部分酶切或超声波打断基因组DNA；
（3）在琼脂凝胶电泳上或蔗糖梯度离心筛选适当长度的DNA片断（根据载体的要求）；
（4）载体的酶切、回收；
（5）将处理好的基因组DNA片断与载体连接；
（6）将重组子导入宿主细胞；
（7）文库的鉴定、收集、保存。
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  • 第1题：

    在基因较小、序列信息已知的情况下，获取目的基因的最方便方法是（）

    • A、化学合成法
    • B、基因组文库法
    • C、CDNA文库法
    • D、聚合酶链反应

    正确答案:A

  • 第2题：

    构建基因组文库最常用的的方法是（）和（）部分消化法。


    正确答案:λ噬菌体载体；限制性内切核酸酶

  • 第3题：

    M13噬菌体适用于（）。

    • A、构建基因组文库
    • B、构建cDNA文库
    • C、克隆较大的DNA片段
    • D、克隆单链外源DNA片段进行序列分析
    • E、以上都对

    正确答案:D

  • 第4题：

    什么是基因组文库（genomiclibrary）？它同遗传学上的基因库有什么不同？


    正确答案: 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。包括下列过程：高分子质量染色体DNA的制备；体外重组连接；将重组DNA导入寄主细胞并扩增；筛选。基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库（genepoo1）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC文库、BAC文库等。

  • 第5题：

    什么是基因文库？基因组文库与cDNA文库制备方法有何区别？


    正确答案: 通过克隆技术将大分子DNA编码的全部或者绝大多数基因或基因组进行扩增后的DNA片段混合物，称为基因文库或DNA文库、克隆库。分为基因组文库和cDNA文库两种。
    基因组DNA文库的制备：从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或YAC载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体，就是基因组文库。
    cDNA文库的制备：提取出组织细胞的全部mRNA，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，许多细胞一起组成包含着某细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。

  • 第6题：

    真核生物中序列未知的目的基因的制备常采用的方法是（）。

    • A、cDNA文库法
    • B、化学合成法
    • C、PCR法
    • D、基因组文库法

    正确答案:A

  • 第7题：

    问答题
    什么是基因组文库（genomic library）？构建基因组文库，涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？

    正确答案： 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组 DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体 DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：
    （1）高分子量染色体 DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组 DNA导人寄主细胞；
    （6）筛选。
    基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库（gene p001）是指在 进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库 的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC 文库、BAC 文库等。
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    填空题
    构建基因组文库时连接方法主要是（）；而构建 cDNA 文库，可用（）；或（）。

    正确答案： 黏性末端连接,接尾连接法,人工接头连接法
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    单选题
    真核生物中序列未知的目的基因的制备常采用的方法是（）。
    A

    cDNA文库法

    B

    化学合成法

    C

    PCR法

    D

    基因组文库法


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    什么叫基因组文库？cDNA文库？有什么区别？

    正确答案： 基因组文库（genomic DNA library）：指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA片段随机的同相应的载体重组、克隆，所产生的克隆群体代表了基因组DNA所有的序列。
    cDNA文库（cDNA library）：指只包括在特定组织或细胞类型中已经被转录成mRNA的所有的基因序列。
    区别：
    ①重组DNA片段来源不同
    基因组文库：来源于某特定生物个体的基因组DNA
    cDNA文库：来源于细胞中表达出的mRNA
    ②使用范围不同
    基因组文库：开展人类基因组计划研究，构建物理图谱等
    cDNA文库：研究某特定细胞中基因组表达状态及表达基因的功能鉴定
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    什么是cDNA文库？同基因组文库有何差别？

    正确答案： （1）cDNA是指以mRNA为模板，在逆转录酶的作用下形成的互补DNA。以细胞的全部mRNA逆转录合成的cDNA组成的重组克隆群体称为cDNA文库。
    基因组文库指的是将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞，进行克隆得到的所有重组体内的基因组DNA片段的集合，它包含了该生物的所有基因。
    （2）基因组文库与cDNA文库的差别：
    ①基因组文库中包含了甩有的基因，而cDNA文库只包含表达的基因，缺乏内元和调节序列，因此在研究基因结构时没有多大用处。
    ②cDNA文库代表了mRNA的来源，其中一些特定的转录本丰富而另一些很少，所以存在丰度的差别；而基因组文库在理论上均等地代表了所有基因序列。
    ③从不同细胞类型制备的cDNA文库包含一些共同序列和独特序列，可用于分离差别表达的基因；基因组文库中不能。
    ④基因组文库由于含有不表达序列，因此比cDNA文库大。
    ⑤mRNA在不同的组织之间存在丰度的差异，因此cDNA文库的在构建时对于mRNA含量较少的就比较困难，而基因组文库不存在这样的问题。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    问答题
    什么是基因文库？简述其构建的基本步骤。

    正确答案： 基因文库是指含有某种生物基因组中不同基因片段的DNA重组体的一群克隆。
    构建的基本步骤如下：
    （1）制备染色体DNA，并用合适的限制酶或机械切割的方法降解DNA为大小不等的插入片段。
    （2）选择处理载体。
    （3）将载体与外源DNA重组。
    （4）重组DNA分子在体外包装成噬菌体颗粒，便可直接用于筛选感兴趣的基因。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    下列哪种方法不能获得目的基因（）

    • A、物理方法
    • B、化学合成法
    • C、cDNA文库
    • D、基因组DNA文库
    • E、PCR法

    正确答案:A

  • 第14题：

    请设计试验，构建理想的小鼠基因组文库。


    正确答案:一、分离纯化基因组DNA。用小鼠的肝脏来提取DNA：
    ①取适量的新鲜肝脏制备组织匀浆。
    ②加入细胞裂解液使细胞充分的裂解。
    ③加入蛋白酶K消化细胞，注意混匀但是不能太剧烈以免DNA断裂。
    ④加氯仿去除蛋白质。混匀后离心后，分三层上层是DNA，这一步吸取上层时最好用剪过的枪头避免吸入蛋白质等杂质。
    ⑤加入异丙醇出现絮状物，离心去除上清液，加入氯化钠溶解沉淀，加入RNA酶去除RNA。
    ⑥乙醇洗涤DNA沉淀，并用TE缓冲液溶解。
    ⑦琼脂糖电泳检测DNA的质量。
    二、切割DNA成合适的片段以用于克隆。将DNA切割成大小为4~10kb的片段。
    三、载体DNA的制备。用λ噬菌体载体。载体用Sau3A酶解，用氯化铯密度梯度离心。
    四、基因组DNA与载体连接。连接反应中要考虑两个因素，即噬菌体两臂DNA插入片段的比例和反应混合液中DNA的浓度。
    五、利用体外包装系统将多联体组装成完整的颗粒。
    六、重组载体转化受体感受态细胞
    七、扩增DNA文库。大肠杆菌的液体培养基的培养。
    八、基因组文库的鉴定。

  • 第15题：

    下列关于cDNA文库和该生物基因组文库的说法中，不正确的是（）

    • A、cDNA文库中的基因都没有启动子，而基因组文库中的基因有启动子
    • B、一种生物的基因组文库只有一种，但是cDNA文库可以有多种
    • C、获得cDNA文库中的DNA和基因组文库中的DNA所需的酶相同
    • D、cDNA文库中某个基因与基因组文库中某个基因控制的性状可能相同

    正确答案:C

  • 第16题：

    什么是基因组文库（genomiclibrary）？构建基因组文库，涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？


    正确答案: 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：
    （1）高分子量染色体DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组DNA导人寄主细胞；
    （6）筛选。基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库（genepool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC文库、BAC文库等。

  • 第17题：

    什么是基因组文库（genomic library）？构建基因组文库涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？


    正确答案:基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或粘粒作载体，包括下列过程：
    （1）大片段高分子量染色体DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组DNA导入寄主细胞；
    （6）在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和粘粒载体构建基因组文库、YAC文库、BAC文库等。基因组文库和遗传学上的基因库是完全不同的概念。基因库（gene pool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。

  • 第18题：

    什么是cDNA文库法？它的构建流程是什么？


    正确答案: cDNA：指体外用逆转录酶催化，以mRNA为模板合成的互补DNA。
    cDNA文库：汇集某生物成熟mRNA为模板逆转录而成cDNA序列的的重组DNA群体.Λ噬菌体和质粒为载体构建。
    操作程序
    （1）总RNA的提取；注意抑制RNA酶的活性，盐酸胍，二乙基焦碳酸；
    （2）mRNA的分离：选用高度分化的组织，末端带有polyA；
    （3）cDNA双链的合成；
    （4）cDNA与载体的连接；
    （5）噬菌体的包装以及转染或质粒的转化。

  • 第19题：

    单选题
    根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA 文库等。在下列文库中，（）属 cDNA 文库。
    A

    YAC文库

    B

    MAC文库

    C

    扣减文库

    D

    BAC文库


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    单选题
    重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）
    A

    通过PCR合成

    B

    化学直接合成

    C

    构建cDNA文库

    D

    构建基因组文库

    E

    从基因组DNA中直接提取


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    问答题
    什么是基因组文库（genomic library）？构建基因组文库涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？

    正确答案： 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或粘粒作载体，包括下列过程：
    （1）大片段高分子量染色体DNA的制备；
    （2）体外重组连接；
    （3）包装蛋白的制备；
    （4）重组体的体外包装；
    （5）将重组DNA导入寄主细胞；
    （6）在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和粘粒载体构建基因组文库、YAC文库、BAC文库等。基因组文库和遗传学上的基因库是完全不同的概念。基因库（gene pool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    下列哪种方法不能获得目的基因（）
    A

    物理方法

    B

    化学合成法

    C

    cDNA文库

    D

    基因组DNA文库

    E

    PCR法


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    什么是cDNA文库（complement DNA library）？同基因组文库有何差别？

    正确答案： 选用适合的载体，将合成的 cDNA 重组导人寄主细胞，经筛选得到的 cDNA 克隆群称为 cDNA 文库。cDNA文库与基因组文库的主要差别是：
    （1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的 DNA序列，cDNA 文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因；
    （2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响；cDNA 文库克隆的是不完全的编码DNA序列，因它受发育和调控因子的影响；
    （3）基因组文库中的编码基因是真实基因，含有内含子和外显子；而 cDNA 克隆的是不含内含子的基因。
    解析： 暂无解析

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