简述PCR反应体系主要包括哪些组分。

题目
简述PCR反应体系主要包括哪些组分。
相似考题

1.简述标准的PCR反应体系。

2.进行PCR扩增DNA时反应体系应加入什么物质?

3.PCR反应体系中不包括的成分是A、引物B、模板C、DNA聚合酶D、dNTPE、DNA酶

4.简述PCR反应五要素。

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  • 第1题：

    简述有效的流动性风险管理内部控制体系包括哪些主要内容?


    正确答案：银行应制定适当的内部控制制度以确保流动性风险管理程序的完整和有效。有效的流动性风险管理内部控制体系应至少包括以下内容：(一)良好的内部控制环境。(二)充分的程序以识别、计量、监测和评估流动性风险。(三)完善的信息管理系统。(四)根据业务发展和市场变化适时更新有关政策和程序

  • 第2题：

    在固定容积的PCR反应体系中，加入越多的模版，PCR反应的效果就会越好。（）


    正确答案:错误

  • 第3题：

    PCR中阳性对照没有出现的原因包括（）。

    • A、反应体系配制出错
    • B、阳性对照失效
    • C、反应体系中组分失效
    • D、漏加

    正确答案:A,B,C,D

  • 第4题：

    简述PCR扩增包括3个步骤。


    正确答案:A.DNA变性：通过加热使靶DNA双链解离成两条单链。
    B.引物与靶DNA退火：降低温度至适当水平，促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA两条链的3’末端。
    C.引物延伸：在DNA聚合酶催化下，引物沿着靶DNA3’末端向5’末端延伸。

  • 第5题：

    简述PCR的主要优缺点。


    正确答案:优点：
    ①使用时快速而容易；
    ②灵敏；
    ③稳定可靠。
    缺点：
    ①需要靶序列的信息；
    ②PCR产物短小；
    ③DNA复制的不精确性，1kb片段经20周期复制大约有3.5％产物有1个错误的碱基。

  • 第6题：

    简述PCR原理及其基本反应步骤。


    正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
    ①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
    ②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
    ③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板互补的DNA链。

  • 第7题：

    简述PCR反应体系，实验中注意的问题。


    正确答案:1.PCR原理：PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。
    包括3个步骤：
    （1）DNA变性：加热使靶DNA双链解离成两条单链。
    （2）引物与靶DNA退火：降低温度至适当水平，促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA的两条链的3’末端。
    （3）引物延伸：在DNA聚合酶催化下，引物沿着靶DNA3’末端向5’末端延伸（引物延伸是5’→3’方向）。新合成DNA在新一轮变性解离后形成更多的模版与引物退火，在DNA聚合酶催化行，合成新一轮的靶DNA。每一轮DNA的合成均以所有DNA为模版，靶DNA数量呈指数增加。
    2.注意问题：引物
    （1）引物长度：15~30bp，常用为20bp
    （2）引物扩增跨度：以200~500bp为宜，特点条件下课扩增至10kb
    （3）引物碱基：G+C含量以40~60%为宜，太少扩增效果不佳，太多易出血非特异性条带；ATGC最后随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸成串排列
    （4）避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异性扩增条带
    （5）引物3’末端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对
    （6）引物中有货最好加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点
    （7）引物特异性：引物与核苷酸序列数据库的其他序列无明显同源性
    （8）引物量： 每条引物浓度0.1~1μmol或10~100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，过高引起错配和非特异性扩增，增加引物之间形成聚体的机会
    P.CR循环次数：循环次数觉得PCR扩增程度。主要取决于模版DNA的浓度。一般的循环次数在30~40次，次数越多，非特异性产物量亦随之增多
    设立对照：PCR反应应设立阳性和阴性对照，是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合理的一个重要参考指标。

  • 第8题：

    双底物反应体系包括哪些类型？


    正确答案:双底物反应体系包括：
    1）三元复合物体系（序列反应：① 有序反应；② 随机反应）
    2）不含三元复合物的体系（乒乓反应）

  • 第9题：

    问答题
    影响PCR反应的因素有哪些？

    正确答案： PCR反应体系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需离子的反应缓冲液，这些因素都对PCR反应产生影响。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    PCR反应包括哪些基本要素？

    正确答案： PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有六种，即引物、耐热DNA聚合酶、dNTPs（包括dATP，dCTP，dGTP，dTTP，是PCR反应中靶DNA序列扩增的原料）、模板DNA和缓冲液（通常含有MGCl2、Tris一HCl、KCl等）、MG2+（DNA聚合酶的激活剂）。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    简述聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）的定义。

    正确答案： 聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外酶促合成、扩增特异DNA片段的一种方法，该方法可以使目的DNA在特定的条件下几个小时内扩增千百万倍。由于它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点已经成为近十几年发展和普及最迅速的分子生物学新技术之一。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    PCR反应体系中的耐热酶是（　　）。
    A

    B

    C

    D

    E


    正确答案： B
    解析： PCR反应体系主要由寡核苷酸(引物)、4种dNTP、Taq DNA聚合酶（耐热）、靶序列DNA和PCR反应缓冲液体系组成。

  • 第13题：

    PCR反应体系中不包括的组分是（）。

    • A、dNTP
    • B、引物
    • C、DNA模板
    • D、Taq酶
    • E、石蜡油

    正确答案:E

  • 第14题：

    PCR循环数设置得太多会出现______期，原因是体系内组分耗尽。（）

    • A、滞后
    • B、衰退
    • C、潜伏
    • D、平台

    正确答案:D

  • 第15题：

    PCR产物过少的原因包括（）。

    • A、延伸时长太短
    • B、引物不足
    • C、循环数不足
    • D、体系中存在反应抑制物

    正确答案:A,B,C,D

  • 第16题：

    影响PCR反应的因素有哪些？


    正确答案:PCR反应体系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需离子的反应缓冲液，这些因素都对PCR反应产生影响。

  • 第17题：

    简述聚合酶链反应（PCR）方法的原理和应用。


    正确答案:PCR是体外DNA扩增技术，是利用耐热DNA聚合酶及天然复制螺旋结构的原理，使极微量DNA片断在短时间内通过变性、退火、延伸等循环周期扩增到106-107倍，达到极易检测DNA的敏感方法。具有高度敏感、操作简便、快速等特点。目前，此法已在医学中广泛应用，如病原体DNA检测，细胞因子、T细胞受体、免疫球蛋白及补体研究，肿瘤基因、遗传基因检测，遗传性疾病的产前诊断及DNA克隆、重组，基因工程等；但要选择适当的阳性和阴性对照，以排除假阴性和假阳性。

  • 第18题：

    简述繁育体系包括哪些方面？


    正确答案: 繁育体系包括育种和制种两部分。
    育种部分由品种资源场，育种场，配合力测定站和原种场组成，主要任务是育种素材的收集和保存，纯系的培育，杂交组合测定，品系配套和扩繁。
    制种部分由祖代鸡场，父母代鸡场，孵化厂组成，承担两次杂交制种任务，为商品鸡场供应大量的高产商品杂交鸡。

  • 第19题：

    PCR反应包括（）、（）和（）三个步骤。


    正确答案:变形；复性；延伸

  • 第20题：

    单选题
    PCR反应体系中不包括的组分是（）。
    A

    dNTP

    B

    引物

    C

    DNA模板

    D

    Taq酶

    E

    石蜡油


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    问答题
    简述PCR反应五要素。

    正确答案： 参加PCR反应的物质主要有五种即：
    ①模板DNA，
    ②寡核苷酸引物，
    ③dNTP，
    ④反应缓冲液，
    ⑤TaqDNA聚合酶。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    简述PCR反应体系，实验中注意的问题。

    正确答案： 1.PCR原理：PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。
    包括3个步骤：
    （1）DNA变性：加热使靶DNA双链解离成两条单链。
    （2）引物与靶DNA退火：降低温度至适当水平，促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA的两条链的3’末端。
    （3）引物延伸：在DNA聚合酶催化下，引物沿着靶DNA3’末端向5’末端延伸（引物延伸是5’→3’方向）。新合成DNA在新一轮变性解离后形成更多的模版与引物退火，在DNA聚合酶催化行，合成新一轮的靶DNA。每一轮DNA的合成均以所有DNA为模版，靶DNA数量呈指数增加。
    2.注意问题：引物
    （1）引物长度：15~30bp，常用为20bp
    （2）引物扩增跨度：以200~500bp为宜，特点条件下课扩增至10kb
    （3）引物碱基：G+C含量以40~60%为宜，太少扩增效果不佳，太多易出血非特异性条带；ATGC最后随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸成串排列
    （4）避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异性扩增条带
    （5）引物3’末端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对
    （6）引物中有货最好加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点
    （7）引物特异性：引物与核苷酸序列数据库的其他序列无明显同源性
    （8）引物量： 每条引物浓度0.1~1μmol或10~100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，过高引起错配和非特异性扩增，增加引物之间形成聚体的机会
    P.CR循环次数：循环次数觉得PCR扩增程度。主要取决于模版DNA的浓度。一般的循环次数在30~40次，次数越多，非特异性产物量亦随之增多
    设立对照：PCR反应应设立阳性和阴性对照，是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合理的一个重要参考指标。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    简述PCR反应体系主要包括哪些组分。

    正确答案： P.CR反应组分：
    ①模板（特定序列的DNA分子）。
    ②两个特异寡核苷酸片段-引物primer，这一对引物位于欲扩增DNA区的两侧，与靶序列两端互补。
    ③耐热DNA聚合酶Taq酶以及酶的缓冲液-buffer。
    ④4种脱氧核糖核苷酸dNTP。
    解析： 暂无解析

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