下列蛋白质通过凝胶过滤层析时，最后一个被洗脱下来的是( )A、马肝过氧化氢酶(相对分子质量247500)B、肌红蛋白(相对分子质量16900)C、人血清清蛋白（相对分子质量68500）D、牛β-乳球蛋白（相对分子质量35000）E、胰岛素（相对分子质量5733）

凝胶过滤层析柱，层析柱内填满带有小孔的颗粒，一般由葡聚糖制成，蛋白质溶液加于柱的顶部，任其往下渗漏，小分子蛋白质进入孔内，因而在柱中滞留时间较长，大分子蛋白质不能进入孔内而径直流出，因此可以使不同大小的蛋白质分离。本题中D答案的马肝过氧化氢酶的Mr为247500最大，是比较大的蛋白质分子，所以最先被洗脱。

子筛又称凝胶过滤，是层析的一种，是根据蛋白质分子大小不同进行分离提纯。在层析柱内 充满带小孔的颗粒，一般由葡聚糖制成。蛋白质溶液加入柱的上部,让其自然下渗。这时,小分子蛋白质 进入凝胶微孔，大分子不能进人先洗脱下来,小分子后洗脱下来。并不是想当然的小分子由于滤过快,先 洗脱下来。由于马肝过氧化氢酶分子量为247500,在给出的5个选项中最大，因此最先被洗脱下来。被 洗脱下来的顺序应该为A—C—D—B—E。

分子量最大的物质在凝胶过滤层析时最先洗脱。