关于碱变性法分离质粒 DNA,下面哪些说法是正确?A.溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体B.溶液Ⅱ的作用是使 DNA变性C.溶液Ⅲ的作用是使 DNA复性D.质粒 DNA分子小,所以没有变性,染色体变性后不能复性

题目

关于碱变性法分离质粒 DNA,下面哪些说法是正确?

A.溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体

B.溶液Ⅱ的作用是使 DNA变性

C.溶液Ⅲ的作用是使 DNA复性

D.质粒 DNA分子小,所以没有变性,染色体变性后不能复性


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  • 第1题:

    关于质粒DNA的叙述正确的是


    A.是基因组DNA的组成部分
    B.具有独立复制功能
    C.具有编码蛋白质的功能
    D.含有感兴趣的目的DNA

    答案:B,C
    解析:

  • 第2题:

    质粒是基因工程中最常用的载体,有关质粒的说法正确的是()

    • A、质粒不仅存在于细菌中,某些病毒也具有
    • B、细菌的基因只存在于质粒上
    • C、质粒为小型环状DNA分子,存在于拟核(或细胞核)外的细胞质基质中
    • D、质粒是基因工程中的重要工具酶之一

    正确答案:C

  • 第3题:

    下列关于细菌质粒的叙述,正确的是()

    • A、所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
    • B、是独立于细菌拟核DNA之外的双链DNA分子,不与蛋白质结合
    • C、质粒对侵入的宿主细胞都是无害的
    • D、细菌质粒的复制过程都是在宿主细胞内独立进行的

    正确答案:B

  • 第4题:

    下列关于质粒的叙述,正确的是()

    • A、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
    • B、质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链DNA分子
    • C、质粒只有在侵入宿主细胞后在宿主细胞内复制
    • D、细菌质粒都带有标记基因

    正确答案:B

  • 第5题:

    碱裂解法制备质粒DNA的方法有哪些?


    正确答案: (1)接种菌落于含抗生素的LB中,37℃剧烈振荡反应;
    (2)培养液4℃12000rpm30min离心;
    (3)重悬细菌于100μl冰预冷的溶液I(50mM葡萄糖25mMTris-HCL(pH8.0),10mMEDTAPh8.0)中剧烈振荡;(4)加200μl亲配制液溶液II(0.2MNaOH1%SDS),混合内容物,不要振荡,置冰上;
    (5)加150μl冰预冷溶液III(5MKac60ml,冰乙酸11.5ml,水28.5ml),温和振荡10s置于阔步3-5min;
    (6)40℃。12000rpm离心5min,转移上清;
    (7)上清加等量酚;氯仿抽提,4℃,12000rpm离心2min,收集上清;
    (8)加入2倍体积乙醇,振荡混合,室温放置2min;
    (9)4℃,12000rpm,离心5min,弃上清;
    (10)倒置离心管,倾干液体;
    (11)1ml70%乙醇4℃洗涤沉淀,弃上清,空气中干燥10min;
    (12)用500μl含无DNA酶的胰RNA酶(20μg/ml)的TE重新溶解核酸,振荡,贮于-20℃。

  • 第6题:

    关于碱解法分离质粒DNA,下面哪一种说法不正确?()

    • A、溶液I的作用是悬浮菌体
    • B、溶液Ⅱ的作用是使DNA变性
    • C、溶液Ⅲ的作用是使DNA复性
    • D、质粒DNA分子小,所以没有变性,染色体变性后不能复性

    正确答案:D

  • 第7题:

    下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是()

    • A、质粒DNA复制为自主复制
    • B、质粒DNA复制为非自主复制
    • C、具有相容性
    • D、细菌内结构相似质粒相对稳定
    • E、质粒DNA不能复制

    正确答案:A

  • 第8题:

    有关质粒的叙述正确的是()

    • A、质粒是细菌核质以外的遗传物质
    • B、质粒是细菌生命活动的所必需的结构
    • C、质粒能自行复制
    • D、质粒是双股环状DNA

    正确答案:A,C,D

  • 第9题:

    单选题
    关于碱解法分离质粒 DNA,下面哪一种说法不正确?()
    A

    溶液I的作用是悬浮菌体

    B

    溶液Ⅱ的作用是使 DNA变性

    C

    溶液Ⅲ的作用是使 DNA复性

    D

    质粒DNA分子小,所以没有变性,染色体变性后不能复性


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    判断题
    碱法和煮沸法分离质粒 DNA的原理是不相同的。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    单选题
    从细菌中分离质粒DNA的方法都包括的基本步骤是()
    A

    培养细菌检测质粒

    B

    培养细菌使质粒扩增

    C

    收集和裂解细胞

    D

    分离和纯化质粒DNA

    E

    B+C+D


    正确答案: D
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    关于碱解法分离质粒DNA,下面哪一种说法不正确( )
    A

    溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体

    B

    溶液Ⅱ的作用是使DNA变性

    C

    溶液Ⅲ的作用是使DNA复性

    D

    质粒DNA分子小,所以没有变性,染色体变性后不能复性

    E

    该方法简单,重复性好,在实验中经常使用


    正确答案: A
    解析: 碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的碱裂解法基本原理为:溶液I使细胞悬浮,EDTA与Ca“、Mg“螯合,抑制DNase活性;溶液Ⅱ裂解细菌、变性蛋白质和少量质粒;溶液Ⅲ使大部分蛋白质与细菌基因组DNA共沉淀,质粒DNA复性。故此题答案选D。

  • 第13题:

    下列有关根瘤农杆菌的说法不正确的是:()

    • A、根瘤农杆菌可侵染植物细胞并诱发产生根瘤
    • B、Ti质粒位于根瘤农杆菌染色体内
    • C、Ti质粒是双链环状DNA分子
    • D、T-DNA可以从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞中

    正确答案:B

  • 第14题:

    从细菌中分离质粒DNA的方法都包括的基本步骤是()。

    • A、培养细菌检测质粒
    • B、培养细菌使质粒扩增
    • C、收集和裂解细胞
    • D、分离和纯化质粒DNA
    • E、B+C+D

    正确答案:E

  • 第15题:

    下列有关基因工程中运载体的说法,正确的是()

    • A、在进行基因工程的操作中,作为运载体的质粒都是天然质粒
    • B、所有的质粒都可以作为基因工程中的运载体
    • C、质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子
    • D、作为运载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA分子进行鉴定和选择的标记基因

    正确答案:D

  • 第16题:

    关于磷酸二酯键的说法正确的是()

    • A、只有目的基因中存在
    • B、只有质粒分子中存在
    • C、DNA单链或双链分子都存在
    • D、只存在于双链DNA分子中

    正确答案:C

  • 第17题:

    简述质粒DNA的分离提取方法。


    正确答案: (1)选择性抽提法,(2)碱性SDS法

  • 第18题:

    下列关于质粒的叙述错误的是().

    • A、质粒是细菌染色体以外的遗传物质
    • B、质粒具有自我复制能力
    • C、质粒可在细菌间转移
    • D、质粒是细菌生存必需的结构
    • E、质粒DNA编码产物可赋予细菌某些特性

    正确答案:D

  • 第19题:

    简述快速氯化铯密度梯度离心法提取分离大质粒DNA的原理。


    正确答案: 用氯化铯密度梯度离心分离核酸时,在高浓度氯化铯溶液中和溴化乙锭(EB.过量的情况下,EB-DNA络合物的浮力密度发生改变,改变的大小与EB结合量成反比。因此,用氯化铯密度梯度超速离心法,可分离双链RNA和单链RNA。也可分离共价闭合环状DNA与线形或带缺口的环状DNA。同时,EB-DNA络合物在紫外光下能产生荧光,可见到离心后形成的区带,便于收集DNA,所得的EB-DNA络合物用异戊醇抽提去EB,即可回收所需的DNA。此法得到的DNA纯度很高。

  • 第20题:

    有关质粒的叙述不正确的是()

    • A、质粒是细菌核质以外的遗传物质
    • B、质粒是细菌必需结构
    • C、质粒具有相容性和不相容性
    • D、质粒是双股环状DNA

    正确答案:B

  • 第21题:

    问答题
    分离pBR322 DNA可考虑用氯霉素扩增,分离 pUCl8质粒 DNA则不必用氯霉素扩增,为什么?

    正确答案: pUCl8的拷贝数可达 500—700,即使扩增到 3000,也只扩大 5—6倍。但是,菌的生长时间至少减少 4~6 小时,按 20 分钟一代计算,4小时减少 12代,由此可见,其质粒数不仅不能增加,反而会减少。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    微量碱法分离纯化质粒DNA的原理及其主要步骤。

    正确答案: 原理及其主要步骤:
    ①质粒DNA与染色体线性DNA在拓扑学上的差异:质粒DNA(cccDNA)是共价闭合双链超盘旋构型的小分子DNA,而细胞染色体DNA在细胞裂解分离过程中断裂成线性DNA(LDNA),虽然在化学本质上没有本质区别,但在高级结构拓扑学上存在差异。
    ②差异碱变性:在pH12.0-12.5高pH条件下,线性的DNA容易变性解链,而质粒DNA不易变性或很少变性。
    ③酸复性:在pH4.8条件下,cccDNA很快复性,而线性的染色体DNA不可逆的变性并与蛋白质、RNA形成沉淀物,通过离心可以把LDNA与cccDNA分开。cccDNA在上清液中。
    ④酒精沉淀cccDNA:以2.5倍的95%酒精沉淀质粒DNA,(浓度为66%沉淀最好)。保存在TE(pH8.0)缓冲液中,放置在-20℃下保存备用。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是()
    A

    质粒DNA复制为自主复制

    B

    质粒DNA复制为非自主复制

    C

    具有相容性

    D

    细菌内结构相似质粒相对稳定

    E

    质粒DNA不能复制


    正确答案: B
    解析: 质粒是细菌拟核裸露DNA外的遗传物质,为环形闭合的双股DNA,存在于细胞质中,质粒编码非细菌生命所必须的某些生物学性状,如性菌毛、细菌素、毒素和耐药性等.质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性,与细菌的遗传变异有关.在DNA重组中,质粒或经过改造后的质粒载体可通过连接外源基因构成重组体.从宿主细胞中提取质粒DNA,是DNA重组技术中最基础的实验技能.有标记基因和多个限制酶切位点.

  • 第24题:

    单选题
    下列有关根瘤农杆菌的说法不正确的是:()
    A

    根瘤农杆菌可侵染植物细胞并诱发产生根瘤

    B

    Ti质粒位于根瘤农杆菌染色体内

    C

    Ti质粒是双链环状DNA分子

    D

    T-DNA可以从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞中


    正确答案: C
    解析: 暂无解析