在重组DNA技术中，不常用到的酶是( )A.限制性核酸内切酶 B.DNA聚合酶 C.DNA连接酶 D.拓扑异构酶

第1题：

第2题：

第3题：

第4题：

第5题：

第6题：

在DNA重组技术中，最常用到的并存在于原核生物中的载体是（）。

• A、BAC
• B、人工染色体
• C、噬菌体
• D、质粒
• E、YAC

正确答案:D

第7题：

在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）

• A、限制性内切酶
• B、DNA聚合酶
• C、DNA连接酶
• D、反转录酶

正确答案:B

第8题：

在基因克隆中碱性磷酸单酯酶的主要用途有：在用P标记DNA5′端之前，（）；在DNA重组技术中，去除DNA片段的（），可防止酶切后的载体的（）与（）。

正确答案:去除5′端的磷；5′磷酸集团；自身连接；环化

第9题：

DNA重组是酶在生物技术上的成功应用，请简述DNA重组的步骤？

正确答案:1.目的基因的获得
方法有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成
2.目的基因与载体连接
方法有：——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）
定向克隆可防止高背景的产生，因为全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选过程复杂。
——平末端
酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。
——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）
由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰
反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液
3.重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染
主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的状态，方法：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。
4.选与鉴定
方法：
——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）
——酶切，在电泳（分子量、构想）
——PCR（特异性引物）
——核酸杂交（southernblot）
——免疫学方法（westernblot）
——DNA测序（sanger、焦磷酸测序）

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

第16题：

第17题：

第18题：

关于重组DNA技术的叙述，正确的是（）。

• A、质粒、噬菌体可作为载体
• B、限制性内切酶是主要工具酶之一
• C、重组DNA由载体DNA和目标DNA组成
• D、重组DNA分子经转化或传染可进入宿主细胞
• E、进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白

正确答案:A,B,C,D

第19题：

在DNA重组技术中应用的某些基本酶类进行操作，这些酶被称作（）。常用的工具酶包括（）、（）、（）、（）、（）、（）。

正确答案:工具酶；限制性内切核酸酶；DNA聚合酶；DNA连接酶；末端转移酶；反转录酶；多聚核苷酸激酶

第20题：

在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）。

• A、限制性核酸内切酶
• B、DNA 聚合酶
• C、DNA 连接酶
• D、DNA 解链酶

正确答案:D

第21题：

食品基因工程的基本过程就是利用重组DNA技术，在体外通过人工剪切和拼接等方法。对生物基因进行重组，并使重组基因在受体内表达，产生出人类所需要的特定食物。请问在重组过程中，下列哪种酶用到的频率最低？（）

• A、限制性内切酶
• B、DNA连接酶
• C、DNA聚合酶
• D、逆转录酶

正确答案:D

第22题：

第23题：