逆转录过程需要的酶是A．依赖DNA的DNA聚合酶B．依赖DNA的RNA聚合酶C．依赖RNA的DNA聚合酶D．依赖RNA的RNA聚合酶E．以上均正确

答:RNA干扰RNA干扰是1998年Fire首次在秀丽线虫中发现 并证明属于转录后水平的基因沉默。利用小片段双链RNA可以特异性地降解相应序列的mRNA,从而特异性地阻断相应基因的表达。RNA干扰广泛存在于从真菌到植物、从无脊椎动物到哺乳动物的各种生物中。RNAi的作用机制目前尚不完全清楚,学者们在线虫、果蝇、植物和动物卵细胞的RNAi实验中,最近相继发现了一些与RNAi作用相关的酶和蛋白,如dsR-NA特异性核酸内切酶、RNA依赖性RNA聚合酶、Argonaute蛋白等。 现已初步阐明RNAi的作用机制如下:各种dsRNA通过各种转染技术转入细胞内,较长dsRNA被Dicer的RNA酶III样特异性核酸内切酶切割产生21~23nt的小干扰RNA,siRNA两条单链末端为5'-磷酸和3′-羟基,且3′端都有2~3个突出的核苷酸。核酸内外切酶、ATP、解旋酶与Arg-onaute蛋白相连进而与siRNA一起形成具有多个亚单元的RNA诱导的沉默复合体RISC中的解旋酶应用ATP解开siRNA双链,使其反义链互补结合到靶向的mRNA上与之相匹配的特异性序列,RISC中的核酸酶降解mRNA,从而使目的基因沉默,产生RNAi现象。siRNA也能与RISC和mRNA联系在一起,在解开siRNA的双链后,反义RNA链能作为双链RNA合成的一个引物以mRNA为模板,在RISC中的RdRP的作用下形成新的dsRNA,再次被Dicer识别并切断,形成新的siRNA再循环,作用于 另外的靶向mRNA。这种不断放大的瀑布式作用形成大量新的siRNA,使siRNA在短时间内迅速并有效地抑制mRNA翻译形成蛋白质或多肽,从而有效地抑制靶向基因蛋白质或多肽的合成。 onaute蛋白相连进而与siRNA一起形成具有多个亚单元的RNA诱导的沉默复合体RISC中的解旋酶应用ATP解开siRNA双链,使其反义链互补结合到靶向的mRNA 上与之相匹配的特异性序列,RISC中的核酸酶降解mRNA,从而使目的基因沉默,产生RNAi现象。 siRNA也能与RISC和mRNA联系在一起,在解开siRNA的双链后,反义RNA链能作为双链RNA合成的一个引物以mRNA为模板,在RISC中的RdRP的作用下形成新的dsRNA,再次被Dicer识别并切断,形成新的siRNA再循环,作用于另外的靶向mRNA。这种不断放大的瀑布式作用形成大量新的siRNA,使siRNA在短时间内迅速并有效地抑制mRNA翻译形成蛋白质或多肽,从而有效地抑制靶向基因蛋白质或多肽的合成。

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