PCR反应的特点不包括()A.时间短,只需要数小时B.扩增产物量大C.只需要微量的模板D.底物必须标记

题目

PCR反应的特点不包括()

A.时间短,只需要数小时

B.扩增产物量大

C.只需要微量的模板

D.底物必须标记


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  • 第1题:

    简述PCR反应五要素。


    本题答案:参加PCR反应的物质主要有五种即:
    ①模板DNA,
    ②寡核苷酸引物,
    ③dNTP,
    ④反应缓冲液,
    ⑤TaqDNA聚合酶。

  • 第2题:

    PCR反应体系中不包括的成分是

    A、引物

    B、模板

    C、DNA聚合酶

    D、dNTP

    E、DNA酶


    参考答案:E

  • 第3题:

    以下关于PCR的说法错误的是()

    • A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
    • B、应用PCR技术可以进行定点突变
    • C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
    • D、PCR反应中,仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增

    正确答案:C

  • 第4题:

    影响PCR反应的因素有哪些?


    正确答案:PCR反应体系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需离子的反应缓冲液,这些因素都对PCR反应产生影响。

  • 第5题:

    PCR的特点不包括()。

    • A、只需微量模板
    • B、只需数小时
    • C、扩增产物量大
    • D、底物必须标记
    • E、变性、复性、延伸三个步骤循环进行

    正确答案:D

  • 第6题:

    什么是PCR,有什么特点,扩增反应有哪几个步骤?


    正确答案: PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤,变性、退火(复性)、延伸3个步骤。

  • 第7题:

    简述PCR反应体系,实验中注意的问题。


    正确答案:1.PCR原理:PCR是利用DNA合成的原理,合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物,在体外进行靶DNA的重复合成。
    包括3个步骤:
    (1)DNA变性:加热使靶DNA双链解离成两条单链。
    (2)引物与靶DNA退火:降低温度至适当水平,促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA的两条链的3’末端。
    (3)引物延伸:在DNA聚合酶催化下,引物沿着靶DNA3’末端向5’末端延伸(引物延伸是5’→3’方向)。新合成DNA在新一轮变性解离后形成更多的模版与引物退火,在DNA聚合酶催化行,合成新一轮的靶DNA。每一轮DNA的合成均以所有DNA为模版,靶DNA数量呈指数增加。
    2.注意问题:引物
    (1)引物长度:15~30bp,常用为20bp
    (2)引物扩增跨度:以200~500bp为宜,特点条件下课扩增至10kb
    (3)引物碱基:G+C含量以40~60%为宜,太少扩增效果不佳,太多易出血非特异性条带;ATGC最后随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸成串排列
    (4)避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异性扩增条带
    (5)引物3’末端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对
    (6)引物中有货最好加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点
    (7)引物特异性:引物与核苷酸序列数据库的其他序列无明显同源性
    (8)引物量: 每条引物浓度0.1~1μmol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,过高引起错配和非特异性扩增,增加引物之间形成聚体的机会
    P.CR循环次数:循环次数觉得PCR扩增程度。主要取决于模版DNA的浓度。一般的循环次数在30~40次,次数越多,非特异性产物量亦随之增多
    设立对照:PCR反应应设立阳性和阴性对照,是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合理的一个重要参考指标。

  • 第8题:

    关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是()

    • A、只能在DNA片段的特定部位产生突变
    • B、不需要测序确定突变结果
    • C、重组PCR定点突变法需要4种扩增,3轮PCR反应
    • D、大引物法需要3种扩增引物,3轮PCR反应
    • E、重组PCR定点突变法操作较大引物法简单

    正确答案:C

  • 第9题:

    单选题
    PCR反应体系中不包括的组分是()。
    A

    dNTP

    B

    引物

    C

    DNA模板

    D

    Taq酶

    E

    石蜡油


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    单选题
    一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为()。
    A

    普通PCR仪

    B

    梯度PCR仪

    C

    原位PCR仪

    D

    荧光PCR仪

    E

    实时PCR仪


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    填空题
    PCR的反应过程包括:________、________、________。

    正确答案: 变性,退火,延伸
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    病毒感染的分子诊断方法不包括()
    A

    聚合酶链式反应(PCR)及序列分析

    B

    核酸杂交

    C

    DNA芯片

    D

    单克隆技术


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    有关RT-PCR技术的叙述正确的是()

    A、该反应的最初起始模板不是DNA

    B、需要先进行PCR反应,再进行逆转录

    C、在进行PCR反应时模板不是cDNA

    D、合成的终产物是基因组DNA


    参考答案:A

  • 第14题:

    PCR反应的必需成分不包括

    A.dNTP
    B.RNA聚合酶
    C.DNA聚合酶
    D.DNA模版
    E.引物

    答案:B
    解析:
    PCR反应的必需成分不包括RNA聚合酶。

  • 第15题:

    在固定容积的PCR反应体系中,加入越多的模版,PCR反应的效果就会越好。()


    正确答案:错误

  • 第16题:

    下列各项中,影响PCR反应特异性的因素不包括()

    • A、Mg2+浓度
    • B、模板纯度
    • C、引物长度
    • D、退火温度
    • E、变性时间

    正确答案:E

  • 第17题:

    简述PCR原理及其基本反应步骤。


    正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
    ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
    ②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
    ③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板互补的DNA链。

  • 第18题:

    什么是PCR,请试述PCR技术的原理,以及PCR的反应过程?


    正确答案:P.CR就是聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction)。
    原理:双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。
    反应过程:首先。双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子;然后,加入到反映混合物中的引物和模板DNA的特定末端相结合;戒指,DNA聚合酶以单链DNA为模板,利用反应混合物中的三种核苷三磷酸,在引物的3’-OH端合成新生的DNA互补链。

  • 第19题:

    填充床反应器PCR


    正确答案:是将固定化酶堆叠在反应容器中进行催化反应的一种反应器,适用于固定化酶进行催化反应。

  • 第20题:

    PCR反应的温度循环周期不包括()

    • A、DNA变性
    • B、DNA表达
    • C、引物退火
    • D、反应延伸

    正确答案:B

  • 第21题:

    问答题
    说明PCR反应的基本原理并列举几种特殊的PCR方法。

    正确答案: PCR是一种模拟天然DNA复制过程,在有DNA模板、DNA聚合酶(常用TaqDNA聚合酶)、引物和4种dNTP的情况下,通过高温变性一低温退火一中温延伸这样反复循环的过程,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。
    特殊的PCR方法有:锚式PCR,可以用来快速分离cDNA末端(RACE);反向PCR,可扩增引物外侧的DNA片段,对已知DNA片段两侧的未知序列进行扩增和研究;多重PCR,,在同一反应中采用多对引物同时扩增几个不同的DNA片段,如果基因某一区段缺失,则相应的电泳图谱上此区段PCR扩增产物长度减少或消失,从而发现基因异常;反转录PCR,先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增。其他还有PCR,荧光PCR等。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    什么是PCR,有什么特点,扩增反应有哪几个步骤?

    正确答案: PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤,变性、退火(复性)、延伸3个步骤。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是()
    A

    只能在DNA片段的特定部位产生突变

    B

    不需要测序确定突变结果

    C

    重组PCR定点突变法需要4种扩增,3轮PCR反应

    D

    大引物法需要3种扩增引物,3轮PCR反应

    E

    重组PCR定点突变法操作较大引物法简单


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第24题:

    单选题
    PCR反应的温度循环周期不包括()
    A

    DNA变性

    B

    DNA表达

    C

    引物退火

    D

    反应延伸


    正确答案: A
    解析: 暂无解析