用以下方法进行基因工程筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。A．Southern blotB．Northern blotC．Western 印迹D．原位菌落杂交

题目

用以下方法进行基因工程筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。

A．Southern blot

B．Northern blot

C．Western 印迹

D．原位菌落杂交

相似考题

1.用下列方法进行重组体的筛选，哪项说明外源基因进行了表达 ( )A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、原位菌落杂交D、Western印迹E、基因芯片技术

2.基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于A.外源基因插入质粒 B.宿主菌的生物繁殖 C.质粒的转化 D.带有目的基因的宿主菌的筛选 E.目的基因的表达

3.下列有关基因工程叙述正确的是（）A、基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产品质优良和具有抗性的农作物B、检测转基因生物是否转录出mRNA，应通过DNA-DNA杂交方法C、基因表达载体的构建是基因工程的核心D、将目的基因导入受体细胞的过程中进行了碱基互补配对

4.举例说明比较分析基因工程制药中三大表达系统的优缺点。

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  • 第1题：

    基因工程运载体必须具备的条件中，错误的是（）

    • A、能在宿主细胞中复制并稳定保存
    • B、具有多个限制酶切点，以便于外源基因连接
    • C、能进入宿主细胞中并控制其新陈代谢过程
    • D、在限制酶切点外必须含有标记基因，便于筛选

    正确答案:C

  • 第2题：

    用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。

    • A、Southem印迹杂交
    • B、Northem印迹杂交
    • C、Western印迹
    • D、原位菌落杂交

    正确答案:C

  • 第3题：

    1972年，（）最先实现了基因的异源表达，标志着基因工程研究的开始。

    • A、Berg
    • B、Avery
    • C、CriCk
    • D、MenDel

    正确答案:A

  • 第4题：

    基因工程中值得注意观察之一是（）。

    • A、病毒能在细菌中复制
    • B、细菌能够吸收环境中的DNA
    • C、细菌能够彼此接合
    • D、外源基因能够放到细菌中而且能够表达

    正确答案:D

  • 第5题：

    用免疫化学法筛选重组体的原理是（）

    • A、根据外源基因的表达
    • B、根据载体基因的表达
    • C、根据mRNA同DNA的杂交
    • D、根据DNA同DNA的杂交

    正确答案:A

  • 第6题：

    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（）

    • A、外源基因插入质粒
    • B、宿主菌的生物繁殖
    • C、质粒的转化
    • D、带有目的基因的宿主菌的筛选
    • E、目的基因的表达

    正确答案:D

  • 第7题：

    单选题
    克隆基因的大肠杆菌表达体系（　　）。
    A

    能表达外源基因的基因组DNA

    B

    只能表达外源基因的cDNA

    C

    能进行转录后加工

    D

    能进行翻译后加工

    E

    表达产物一般是可溶性的包涵体


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    单选题
    用菌落杂交法筛选重组体时，（） 。
    A

    需要外源基因的表达

    B

    不需要外源基因的表达

    C

    要根据克隆基因同探针的同源性

    D

    上述说法都正确


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    问答题
    基因工程中常用α一互补来筛选重组质粒，请说明其原理。

    正确答案： 很多载体都携带一段细菌的lacZ基因，它编码β一半乳糖苷酶N一端的146个氨基酸，称为α一肽，载体转化的宿主细胞为lacZ△15基因型，它表达β一半乳糖苷酶的C一端肽链。当载体与宿主细胞同时表达两个片段时，宿主细胞才有β一半乳糖苷酶活性，使特异的底物X一gal变为蓝色化合物，这就是所谓的α一互补，而重组子由于基因插入使α一肽基因失活，不能形成α一互补，在含X一gal的平板上，含阳性重组子的细菌为无色菌落或噬菌斑。
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    问答题
    试述外源基因表达产物的检测方法。

    正确答案： （一）特异性mRNA的检测
    Northern杂交，即RNA-DNA杂交分析，是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似，检测目的RNA的存在与否及含量。
    （二）报告基因的酶法检测
    （1）报告基因：其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在；其表达产物便于检测。
    （2）目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因，主要有：β-葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）、氯霉素乙酰转移酶基因（CAT基因）、胸苷激酶基因（cA）、二氢叶酸还原酶基因（DHFR）等。
    （三）免疫学检测
    （1）免疫沉淀法
    （2）酶联免疫吸附法（ELISA）
    ELISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液－液抗原－抗体反应体系不同之处是建立了固－液抗原－抗体反应体系，并采用酶标记。抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性；抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后，结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时，可以催化底物的水解、氧化或还原，从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
    （3）Western印迹法
    （4）固相放射免疫（RIA）法
    RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度，可检测出1pg的靶蛋白。
    （四）表达产物的生物学活性检测
    当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时，可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有：淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达。
    A

    Southem印迹杂交

    B

    Northem印迹杂交

    C

    Western印迹

    D

    原位菌落杂交


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    多选题
    下列属于基因工程操作过程的有（）.
    A

    在供体细胞中切割目的基因

    B

    目的基因与载体组成重组体

    C

    把重组体引入到宿主细胞中

    D

    外源目的基因的筛选与鉴定


    正确答案： C,B
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    试述外源基因表达产物的检测方法。


    正确答案: （一）特异性mRNA的检测
    N.orthern杂交，即RNA-DNA杂交分析，是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似，检测目的RNA的存在与否及含量。
    （二）报告基因的酶法检测
    （1）报告基因：其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在；其表达产物便于检测。
    （2）目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因，主要有：β-葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）、氯霉素乙酰转移酶基因（CAT基因）、胸苷激酶基因（cA）、二氢叶酸还原酶基因（DHFR）等。
    （三）免疫学检测
    （1）免疫沉淀法
    （2）酶联免疫吸附法（ELISA）
    E.LISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液-液抗原-抗体反应体系不同之处是建立了固-液抗原-抗体反应体系，并采用酶标记。
    抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性；抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后，结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时，可以催化底物的水解、氧化或还原，从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
    （3）Western印迹法
    （4）固相放射免疫（RIA）法
    RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度，可检测出1pg的靶蛋白。
    （四）表达产物的生物学活性检测
    当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时，可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有：淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。

  • 第14题：

    外源基因表达的检测方法有三种（）（）（）


    正确答案:生化反应检测法；免疫学检测法；生物学活性的检测

  • 第15题：

    除下列哪一项外，转基因工程的运载体必须具备的条件是：（）

    • A、能在宿主细胞中复制并保存
    • B、具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
    • C、具有标记基因，便于进行筛选
    • D、是环状形态的DNA分子

    正确答案:D

  • 第16题：

    下列与载体相符合的内容有（）.

    • A、作用是把外源细胞带入到宿主细胞中
    • B、质粒是其中的一种
    • C、应具有筛选标记
    • D、与基因工程无关

    正确答案:A,B,C

  • 第17题：

    外源基因表达的基本流程是（）。 ①重组表达载体导入宿主细胞； ②目的基因的获得； ③重组表达载体的筛选与认； ④目的基因与载体的重组； ⑤目的基因的表达。

    • A、②④①③⑤
    • B、①②④③⑤
    • C、②④③①⑤
    • D、④②①③⑤

    正确答案:A

  • 第18题：

    下列属于基因工程操作过程的有（）.

    • A、在供体细胞中切割目的基因
    • B、目的基因与载体组成重组体
    • C、把重组体引入到宿主细胞中
    • D、外源目的基因的筛选与鉴定

    正确答案:A,B,C,D

  • 第19题：

    单选题
    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（）
    A

    外源基因插入质粒

    B

    宿主菌的生物繁殖

    C

    质粒的转化

    D

    带有目的基因的宿主菌的筛选

    E

    目的基因的表达


    正确答案： D
    解析： 转化后，只有含有抗生素抗性基因的转化细胞才能够在含有相应抗生素的琼脂平皿上生长并形成菌落。如果在构建重组DNA时将外源基因插入抗性基因内，标志基因将失活，可通过有或无抗生素培养基的对比培养进行鉴定并将含有重组体的转化菌筛选出来，故选D。

  • 第20题：

    判断题
    通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    外源基因表达的基本流程是（）。 ①重组表达载体导入宿主细胞； ②目的基因的获得； ③重组表达载体的筛选与认； ④目的基因与载体的重组； ⑤目的基因的表达。
    A

    ②④①③⑤

    B

    ①②④③⑤

    C

    ②④③①⑤

    D

    ④②①③⑤


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    基因工程中，利用载体把外源基因转入到宿主细胞后，一部分受体细胞是没有被转化的，这就需要进行（）来把他们区分开.
    A

    重组体的筛选

    B

    重组体的再制作

    C

    重组体淘汰

    D

    重组体修改


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    用下列方法进行重组体的筛选，哪项说明外源基因进行了表达（）
    A

    Southern印迹杂交

    B

    Northern印迹杂交

    C

    原位菌落杂交

    D

    Western印迹

    E

    基因芯片技术


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    判断题
    用免疫化学法筛选重组体不需要外源基因的表达。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 错
    解析： 暂无解析

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