某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活 (Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即

题目
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:

(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。


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更多“某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活 ”相关问题
  • 第1题:

    关于转基因操作的过程,正确的顺序是:() ①目的基因插入Ti质粒的T-DNA中  ②农杆菌侵染植物伤口并进入细胞  ③重组质粒导入到农杆菌,T-DNA插入植物基因组中  ④遗传特性在受体植物中表达 

    • A、①②④③
    • B、①②③④
    • C、①③④②
    • D、①③②④

    正确答案:D

  • 第2题:

    相对载体而言,插入的DNA片段称为()。

    • A、筛选基因
    • B、可调节基因
    • C、外源DNA
    • D、Cdna

    正确答案:C

  • 第3题:

    下列有关基因工程中运载体的说法,正确的是()

    • A、在进行基因工程的操作中,作为运载体的质粒都是天然质粒
    • B、所有的质粒都可以作为基因工程中的运载体
    • C、质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子
    • D、作为运载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA分子进行鉴定和选择的标记基因

    正确答案:D

  • 第4题:

    将一段外源DNA插入到PBR322的BamHI位点,转化后,阳性重组体的筛选标记是()。

    • A、氨苄青毒素抗性(Ampr)和四环素抗性(Tetr
    • B、Ampr,Tets
    • C、Amps,Tetr
    • D、Amps,Tets

    正确答案:B

  • 第5题:

    pBR322质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件()

    • A、AmPr和Tetr
    • B、ori复制子
    • C、LacZ标记
    • D、多克隆位点

    正确答案:A,B,D

  • 第6题:

    关于多克隆位点描述不正确的是()。

    • A、用于插入外源基因的多种DNA限制性内切酶作用位点
    • B、该位点既可位于抗性基因区域外,也可位于抗性基因区域内
    • C、仅位于质粒载体中
    • D、可能位于标记基因的区域内

    正确答案:C

  • 第7题:

    填空题
    基因敲除是指通过()定向的将外源基因插入宿主细胞染色体DNA,从而使特定的基因在细胞内或生物活体内失活的过程。

    正确答案: 同源重组
    解析: 暂无解析

  • 第8题:

    单选题
    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因,这是为了便于()
    A

    外源基因插入质粒

    B

    宿主菌的生物繁殖

    C

    质粒的转化

    D

    带有目的基因的宿主菌的筛选

    E

    目的基因的表达


    正确答案: D
    解析: 转化后,只有含有抗生素抗性基因的转化细胞才能够在含有相应抗生素的琼脂平皿上生长并形成菌落。如果在构建重组DNA时将外源基因插入抗性基因内,标志基因将失活,可通过有或无抗生素培养基的对比培养进行鉴定并将含有重组体的转化菌筛选出来,故选D。

  • 第9题:

    单选题
    关于转基因操作的过程,正确的顺序是:() ①目的基因插入Ti质粒的T-DNA中  ②农杆菌侵染植物伤口并进入细胞  ③重组质粒导入到农杆菌,T-DNA插入植物基因组中  ④遗传特性在受体植物中表达
    A

    ①②④③

    B

    ①②③④

    C

    ①③④②

    D

    ①③②④


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    判断题
    外源基因(或 DNA片段)插入到某一基因内的位点后,这个基因不再有任何功能。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    填空题
    根据噬菌体的包装能力,将野生型λ噬菌体的基因组 DNA 改造成插入型载体,该载体的最小分子大小约为()kb,插入的外源片段最大不超过()kb。

    正确答案: 36,14
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    下列关于质粒pBR322DNA的叙述哪一个是错误的?()
    A

    它的分子量较小,易于进入细胞

    B

    含有抗四环素(TetR)和抗氨苄青霉素(AmpR)的基因

    C

    若用EcoRI切割该质粒,不破坏它的两个抗生素抗性基因

    D

    用BamHI限制酶切割pBR322质粒,将破坏它的抗氨苄青霉素基因


    正确答案: D
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    载体是能携带目的基因进入宿主细胞,实现外源DNA的无性繁殖,或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子,是重组DNA技术中一个重要的工具。人工构建的含有噬菌体DNAcos序列和质粒载体复制子序列的特殊类型的载体称为()

    • A、黏粒载体
    • B、人工染色体
    • C、质粒载体
    • D、噬菌体载体
    • E、病毒载体

    正确答案:A

  • 第14题:

    下列有关基因工程中载体的说法正确的是()

    • A、质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DNA分子
    • B、所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
    • C、质粒载体的复制和表达不遵循中心法则
    • D、作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因

    正确答案:D

  • 第15题:

    将DNA插入人细胞的基因组中的适合的载体是()。

    • A、T质粒
    • B、噬菌体
    • C、反转录病毒
    • D、所有上述各项

    正确答案:C

  • 第16题:

    在基因克隆中常用的载体有质粒、柯斯质粒等4种,按载体所能克隆的外源DNA片段的大小,其从大到小的顺序是()、()、()、()。


    正确答案:YAC载体;柯斯质粒;噬菌体载体;质粒

  • 第17题:

    基因敲除是指通过()定向的将外源基因插入宿主细胞染色体DNA,从而使特定的基因在细胞内或生物活体内失活的过程。


    正确答案:同源重组

  • 第18题:

    基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因,这是为了便于()

    • A、外源基因插入质粒
    • B、宿主菌的生物繁殖
    • C、质粒的转化
    • D、带有目的基因的宿主菌的筛选
    • E、目的基因的表达

    正确答案:D

  • 第19题:

    问答题
    在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。 如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?

    正确答案: 除 No.2 的2.5kb,No.6 的1.5kb 和1.0kb 没有带外,其他都有带。
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    单选题
    将一段外源DNA插入到PBR322的BamHI位点,转化后,阳性重组体的筛选标记是()。
    A

    氨苄青毒素抗性(Ampr)和四环素抗性(Tetr

    B

    Ampr,Tets

    C

    Amps,Tetr

    D

    Amps,Tets


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    单选题
    载体是能携带目的基因进入宿主细胞,实现外源DNA的无性繁殖,或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子,是重组DNA技术中一个重要的工具。人工构建的含有噬菌体DNAcos序列和质粒载体复制子序列的特殊类型的载体称为()
    A

    黏粒载体

    B

    人工染色体

    C

    质粒载体

    D

    噬菌体载体

    E

    病毒载体


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    关于多克隆位点描述不正确的是()。
    A

    用于插入外源基因的多种DNA限制性内切酶作用位点

    B

    该位点既可位于抗性基因区域外,也可位于抗性基因区域内

    C

    仅位于质粒载体中

    D

    可能位于标记基因的区域内


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    某一质粒载体具有 Tetr和 Kanr的表型,在 Kan抗性基因内有一 Bgl I的切点。现用 Bgl I切割该载体进行基因克隆,问:(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?

    正确答案: (1)加四环素;
    (2)TetrKans和TetrKanr
    (3)重新点种在含Tet、Kan和只加Tet的平板上,选择只在Tet平板上生长的菌落,即为所需的重组体。
    解析: 暂无解析