124、酵母双杂交体系用于A．检测细胞核内发生互作的蛋白质B．哺乳动物功能基因的表型分析C．研究功能基因的亚细胞定位D．研究RNA聚合酶对转录的激活作用

题目

124、酵母双杂交体系用于

A．检测细胞核内发生互作的蛋白质

B．哺乳动物功能基因的表型分析

C．研究功能基因的亚细胞定位

D．研究RNA聚合酶对转录的激活作用

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1.基因芯片是建立在哪种技术的基础之上( )A、核酸分子杂交B、酵母双杂交C、免疫印迹D、EMSAE、实时PCR

2.酵母双杂交技术被用来研究( )A、哺乳动物功能基因的表型分析B、酵母细胞的功能基因C、蛋白质的相互作用D、基因的表达调控E、核酸-蛋白质的相互作用

3.下列各项中通常不用于蛋白质组学研究的技术是( )A、DNA芯片B、双向电泳C、蛋白芯片D、质谱E、酵母双杂交

4.用来研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验技术是( )A、酵母双杂交技术B、原位杂交技术C、RACE技术D、SAGE技术E、PCR技术

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  • 第1题：

    可检测基因拷贝数变化的是( )

    A、质谱技术

    B、双向电泳

    C、Southernblotting

    D、RNAi

    E、酵母双杂交技术


    参考答案：C

  • 第2题：

    下述实验方法可用于蛋白质功能研究的是()。

    A、X射线衍射

    B、核磁共振分光学技术

    C、酵母双杂交技术

    D、免疫沉淀技术


    答案：C

  • 第3题：

    用于检测基因表达水平的测定技术是
    A.蛋白质印迹分析 B.酵母双杂交技术 C.电泳迁移率变动测定 D.基因剔除技术


    答案：A
    解析：
    酵母双杂交技术已成为分析细胞内未知蛋白质相互作用的主要手段之一。该技术可用于证明两种已知基因序列的蛋白质可以相互作用的生物信息；分析已知存在相互作用的两种蛋白质分子的相互作用、功能结构域或关键的氨基酸残基；还可用于筛选未知的相互作用蛋白质等。基因表达是基因转录及翻译的过程，大多数基因表达的产物是具有特定生物学功能的蛋白质分子，因此检测特定蛋白质的存在及定量即可呈现基因表达水平。而蛋白质印迹分析是用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的半定量分析等的技术。电泳迁移率变动测定用于研究DNA结合蛋白与相应DNA序列间的相互作用，目前该技术也用于研究RNA结合蛋白和特定RNA序列间 的相互作用。基因剔除技术是有目的地去除动物体内某种基因的技术，是对基因表达的人工干预。

  • 第4题：

    酵母双杂交体系常常出现假的阳性结果，应该如何正确判读得到的结论呢？


    正确答案: 1.用不同的报道基因系统的双杂交实验来重复筛选
    2.通过在体外检测诱饵蛋白与猎物蛋白在体外的相互作用情况，如免疫共沉淀
    3.基于生物学知识判断两蛋白是否会在生物细胞中发生相互作用
    4.查询前人是使用酵母双杂交系统时总结的经验

  • 第5题：

    酵母双杂交系统被用来研究（）。

    • A、真核生物基因表型分析
    • B、酵母基因的功能分析
    • C、蛋白质的相互作用
    • D、蛋白质和DNA的相互作用

    正确答案:C

  • 第6题：

    酵母双杂交系统


    正确答案: 是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子（如GAL4等）的DNA结合结构域基因和GAL4激活结构域基因，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。

  • 第7题：

    单选题
    以下哪项技术常用于基因诊断中：（）。
    A

    PCR

    B

    双向电泳

    C

    飞行质谱

    D

    酵母双杂交

    E

    基因敲除


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    名词解释题
    酵母双杂交（yeast two-hybrid）

    正确答案： 利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白质与蛋白质间的相互作用。
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    单选题
    酵母双杂交体系被用来研究（）。
    A

    哺乳动物功能基因的表型分析

    B

    酵母细胞的功能基因

    C

    蛋白质的相互作用

    D

    基因的表达调控


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    判断题
    酵母双杂交系统研究蛋白质相互作用需要分离靶蛋白。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    问答题
    酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的？在科学研究中有什么作用？

    正确答案： 酵母双杂交技术是利用真核生物转录调控因子的组件式结构特征，因为这些蛋白质往往是由两个以上相互独立的结构域构成，其中DNA结合结构域（BD）和转录激活结构域（AD）是转录因子发挥功能所必需的。单独的BD能与特定基因的启动区结合，但不能激活基因的转录，而由不同转录调控因子的BD和AD所形成的杂合蛋白却能行使激活转录的功能。将拟研究的编码“猎物”蛋白的基因与AD序列结合，编码“诱饵”蛋白的基因与BD序列结合，形成两段融合基因，并在同一菌株内表达，若“诱饵”蛋白与“猎物”蛋白在核内存在相互作用，就可以重新形成完整的有活性的转录因子，从而激活报告基因的转录。因此根据报告基因的表达与否，即可判断“诱饵”蛋白与“猎物”蛋白之间是否有相互作用。酵母双杂交常用于研究新蛋白质的相互作用和发现蛋白质的功能。
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    酵母双杂交技术被用来研究（）
    A

    哺乳动物功能基因的表型分析

    B

    酵母细胞的功能基因

    C

    蛋白质的相互作用

    D

    基因的表达调控

    E

    核酸-蛋白质的相互作用


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    下述实验方法可用于蛋白质结构分析的是()。

    A、核磁共振分光学技术

    B、化学抑制技术

    C、酵母双杂交技术

    D、荧光共振能量转移


    答案：A

  • 第14题：

    用于分析蛋白质-蛋白质相互作用的技术是
    A.蛋白质印迹分析 B.酵母双杂交技术 C.电泳迁移率变动测定 D.基因剔除技术


    答案：B
    解析：

  • 第15题：

    酵母双杂交系统（两个Pr相互作用）的原理是什么？一般由哪几部分组成？


    正确答案: 原理：在这一系统中，与诱饵蛋白融合的DNA-BD（DNA结合域）和与文库猎物蛋白融合的AD（转录激活域）均来自GAL4相应的结构域.将诱饵蛋白与猎物蛋白的编码质粒分别导入同一个GAL4缺失的酵母细胞中，通过两种相互作用蛋白结合形成复合物，可以重建GAL4的活性，转录激活相应的效应基因。
    三个基本组成部分：
    1.编码靶蛋白与DNA结合域融合蛋白的表达质粒.这种靶蛋白在双杂交系统中专称诱饵蛋白；
    2.cDNA质粒表达文库，文库cDNA表达出的蛋白与转录激活域形成融合蛋白，这些蛋白统称为猎物蛋白；
    3.能反映出体内转录因子活性重建的宿主酵母菌及体现出这种活性的报道基因系统。

  • 第16题：

    酵母双杂交系统研究蛋白质相互作用需要分离靶蛋白。


    正确答案:错误

  • 第17题：

    以下哪项技术常用于基因诊断中：（）。

    • A、PCR
    • B、双向电泳
    • C、飞行质谱
    • D、酵母双杂交
    • E、基因敲除

    正确答案:A

  • 第18题：

    简述利用“酵母双杂交系统”可以研究蛋白质间的相互作用中的内容。


    正确答案: 真核生物的转录因子可以分为两部分，Binding Domain和Activated Domain。Binding Domain负责结合在DNA上，Binding Domain负责激活转录。二者都是相互独立的区域，但二者单独都不能有转录活性，必须结合在一起或相互靠近在一起才有活性。
    在研究蛋白质相互作用中，将一种蛋白质的基因连接在Binding Domain上，将另一种蛋白质的基因结合在Binding Domain上，蛋白质基因表达后就与转录因子的两个Domain分别结合，两个蛋白质因相互作用而结合在一起，进而使Binding Domain和Activated Domain相互靠近在一起，从而形成具有转录活性的转录因子。在欲表达的基因区域连上报告基因，通过报告基因的表达与否，就可判断蛋白质之间是否发生了相互作用。

  • 第19题：

    单选题
    下列各项中通常不用于蛋白质组学研究的技术是（）
    A

    DNA芯片

    B

    双向电泳

    C

    蛋白芯片

    D

    质谱

    E

    酵母双杂交


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    酵母双杂交体系的原理及其用途是什么？

    正确答案： 原理：如同许多真核生物的转录因子一样，酵母β-半乳糖苷酶的转录因子GAL4也含有两个结构上可分开的、功能上相互独立的结构域，即DNA结合域（DNA_BD）和转录激活域（AD）。应用DNA重组技术，可以把GAL4转录因子的这两个结构域分开。如果把它们放置在同一个酵母细胞中，所产生的GAL4DNA-BD和AD多肽，彼此之间不会直接发生相互作用，所以不具有转录因子的功能活性，无法激活相关基因转录，。但是应用DNA重组技术，将两个分开的GAL4的DNA-BD和AD，甚至分别来自两个不同的转录因子的DNA-BD和AD重组成一个转录因子（使之在空间上彼此靠近）则又可重新获得转录因子的功能活性，即可激活相关基因的转录。酵母双杂交体系就是根据这种原理建立的。酵母双杂交体系包括两种大肠杆菌-酵母菌的穿梭载体（DNA-BD质粒载体和AD质粒载体）；和一种特殊的己经缺失了内源GAL4转录因子的酵母寄主菌株。
    用途：酵母双杂交体系简称Y2H，是在转录因子结构的基础上发展出来的一种敏感的体内鉴定基因的方法。可用来有效地分离与己知靶蛋白相互作的另一种蛋白质编码基因，也是分离与某种特定启动子调控元件结合的特异性转录因子的有效手段。酵母双杂交体系还可以用于产物未知基因的分离、也可用于新基因功能的鉴定。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    问答题
    酵母双杂交体系常常出现假的阳性结果，应该如何正确判读得到的结论呢？

    正确答案： 1.用不同的报道基因系统的双杂交实验来重复筛选
    2.通过在体外检测诱饵蛋白与猎物蛋白在体外的相互作用情况，如免疫共沉淀
    3.基于生物学知识判断两蛋白是否会在生物细胞中发生相互作用
    4.查询前人是使用酵母双杂交系统时总结的经验
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    名词解释题
    酵母双杂交系统

    正确答案： 是利用杂交基因通过激活报告基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。真核生物转录因子具有DNA结合结构域（BD）和转录激活结构域（AD），这两个结构域分开时仍分别具有功能，但不能激活转录，只有它们以适当途径在空间上较为接近时，才能重新具有转录因子活性，并激活报告基因表达。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    基因芯片是建立在哪种技术的基础之上（）
    A

    核酸分子杂交

    B

    酵母双杂交

    C

    免疫印迹

    D

    EMSA

    E

    实时PCR


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    单选题
    制备单克隆抗体采用的技术是（　　）。
    A

    淋巴细胞杂交瘤技术

    B

    酵母双杂交技术

    C

    酵母单杂交技术

    D

    基因定点突变技术


    正确答案： B
    解析：
    单克隆抗体技术是在体细胞融合技术基础上发展起来的。A项，骨髓瘤细胞在体外可以连续传代，而脾细胞是终末细胞，不能在体外繁殖。将小鼠的骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合，则融合细胞既具有肿瘤细胞无限繁殖的特性，又具有淋巴细胞分泌针对该抗原的高特异性的抗体-单克隆抗体，同时也克服了免疫淋巴细胞不能在体外繁殖的缺点，融合的细胞称为淋巴细胞杂交瘤。

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