聚丙烯酰胺电泳分离蛋白质除一般电泳电荷效应外，还有什么作用使分解力提高A.吸附作用B.电渗作用C.扩散作用D.分子筛作用E.重力作用

第1题：

第2题：

第3题：

第4题：

电泳分离蛋白质的技术是指通过（）而达到分离各种蛋白质的技术。

正确答案:蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术

第5题：

简述等电聚焦电泳分离蛋白质的原理。

正确答案: 各种蛋白质各自都有一个等电点，在一特殊的pH环境中，蛋白质分子呈电中性，在电场中不会迁移。
在电泳介质中放入载体两性电解质，当通以直流电时，两性电解质在电场中形成一个稳定的、连续的、从阳极到阴极线性提高的pH梯度。在此体系中，不同的蛋白质即移动到或聚焦于其相当的等电点位置上。因此蛋白质只能在其等电点位置被聚集成一条区带。只要凝胶中的pH梯度范围足够窄，便可将等电点相近的蛋白质分开。

第6题：

双向电泳中第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据蛋白质的哪个特点分离的？（）

• A、所带电荷
• B、等电点
• C、分子量
• D、分子形状
• E、分子大小

正确答案:C

第7题：

解释琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和脉冲电泳分离核酸的原理和区别？

正确答案:琼脂糖凝胶的凝胶孔径大，适合大分子DNA电泳和需要快速简单分析的DNA电泳，电泳方式一般采用水平潜水电泳.优点是快速简单，但分辨率不是很高，对于差异较小的DNA片段难以分辨。聚丙烯酰胺凝胶电泳适宜分离鉴定低分子量蛋白质、小于1Kb的DNA片段和DNA序列分析.其装载的样品量大，回收DNA纯度高.长度仅相差0.2%（即500bp中的1bp）的核苷酸分子即能分离.一般说来，分离鉴定小于1000个核苷酸的核酸片段可用聚丙烯酰胺电泳，分离鉴定0.1-50kb的DNA片段可用恒场常规琼脂糖电泳，而分离鉴定大于50kb的DNA片段则需采用脉冲场琼脂糖电泳。

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

聚丙烯酸胺凝胶电泳的分离原理除包括浓缩效应、电荷效应外，还包括（）

• A、重力效应
• B、电渗效应
• C、扩散效应
• D、分子筛效应
• E、渗透压效应

正确答案:D

第16题：

聚丙烯酰胺电泳分离DNA片段最佳范围是（）。

• A、1～100bp
• B、2～200bp
• C、5～500bp
• D、3～300bp
• E、4～400bp

正确答案:C

第17题：

自由流电泳分离蛋白质的机理及其优缺点。

正确答案: 自由流电泳（CFFE）是在无固相支持介质的薄的矩形分离中，以缓冲液为分离介质进行生物大分子或不溶性颗粒及细胞等物质的分离纯化技术。在CFFE中，分离介质在两块平行的矩形板组成的分离腔内形成层流（两板之间的距离通常介于0.5-3.0mm）分离腔的两侧为正负电极室。被分离物质由一口径很小的输入口进入分离介质中，形成一细带，在垂直于液流的方向上加上均匀的电场后，样品中各种组分由于各自电泳迁移率的差异而各自向与所带电荷符号相反的电极以不同的速度迁移，相同电泳迁移率的物质则迁移为一窄带，在到达分离腔出口处由分级手机器收集。
优点：CFFE是一个连续的而不是分批进行的分离过程。同时由于它不使用有机溶剂、高盐溶液，及硅胶或凝胶等支持介质，分离调节相当温和，对有活性的生物材料的分离纯化提供了十分合适的分离环境。缺点：因自由流电泳是完全无载体的液相电泳，因此除了电泳本身所固有的影响因素外（如：焦耳热，电动力学变形），还有层流（流体力学变形）以及一些综合因素的影响（电流体力学变形等），且这些过程常常互相关联，使整个过程变得极其复杂。重力对自由流电泳会产生影响。颗粒沉降、小滴沉降和热对流是影响自由流电泳的三种重力现象，在微重力条件下这些现象几乎消失，这使CFFE的放大在空间有可能得到实现。

第18题：

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子质量，其原理是什么？

正确答案:SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶性试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。强还原剂，如β-巯基乙醇和二硫苏糖醇则能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，分子被解聚为组成它们的多肽链。解聚后的氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，这就消除了不同分子之间原有的电荷差异。蛋白质-SDS胶束在水溶液中的形状像一个长椭圆棒，椭圆棒的短轴对不同的蛋白质-SDS胶束基本上是相同的。但长轴的长度与亚基分子质量的大小成正比。因此这种胶束在SDS-PAGE系统中的电泳迁移率不再受蛋白质原有电荷的影响，而主要取决于椭圆棒的长轴的长度，即蛋白质或亚基分子质量的大小。

第19题：

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：