第5题:
亲和层析的原理是什么?主要特点是什么?
亲和层析的设计和过程大致分为以下三步: 1)配基固定化:选择合适的配基与不溶性的支撑载体偶链,或共价结合成具有特异亲和性的分离介质; 2)吸附样品:亲和层析介质选择性吸附酶或其他生物活性物质,杂质与层析介质间没有亲和作用,故不能被吸附而被洗涤去除; 3)样品解析:选择适宜的条件使被吸附的亲和介质上的酶或其他生物活性物质解析下柱。 亲和层析技术的最大优点在于,利用它从提取液中经过一次简单的处理便可得到所需的高纯度活性物质。 此外亲和层析还有对设备要求不高、操作简便、适用范围广、特异性强、分离速度快、分离效果好、分离条件温和等优点: 其主要缺点是亲和吸附剂通用性较差,故要分离一种物质差不多都得重新制备专用的吸附剂。 另外由于洗脱条件较苛刻,须很好地控制洗脱条件,以避免生物活性物质的变性失活。