简述无菌技术操作过程中应遵循的无菌观念。

第一个方面:培养基倾倒与分装 1、液体培养基分装到试管 2、液体培养基分装到三角瓶 3、固体培养基倾倒平板 第二个方面:接种 n 1 、从 eppendorf 菌种管接种到试管 n 2 、液体试管菌种转接试管或三角瓶 n 3 、液体试管菌种接种到平板培养基 n 4 、平板菌种接种到液体试管或三角瓶 n 5 、穿刺接种 第三个方面:平板分离 n 1 、平板划线法 n 2 、平板倾注法 n 3 、平板涂布法

(一)操作前的准备原则1.操作环境准备(1)操作区域要清洁、宽敞并定期消毒;无菌操作前30min停止清扫及铺床,减少人员走动,避免尘埃飞扬。(2)操作台面清洁、干燥、平坦,物品摆放合理。2. 操作者准备 无菌操作前,操作者应着装整洁,修剪指甲并洗手、戴口罩,口罩应遮住口鼻,必要时戴无菌手套、穿无菌衣。(二)操作中的无菌原则1.保护无菌区(1)明确区分无菌区、非无菌区、无菌物品、非无菌物品,非无菌物品应远离无菌物品。(2)操作者应面向无菌区,与无菌区保持适当的距离,手臂保持在腰部或治疗台面以上,操作过程中不得跨越无菌区;不可面对无菌区讲话、谈笑、咳嗽、打喷嚏。2.正确取用无菌物品(1)取用无菌物品应使用无菌持物钳;未经消毒的手及物品,不可直接接触无菌物品。如有潮湿、污染或可疑污染时,均不可使用,应予更换并重新灭菌。(2)无菌物品一经取出,不可再放回无菌容器内。(3)一套无菌物品仅供一名患者使用,以防交叉感染。(三)无菌物品的存放原则1.正确放置。无菌物品与有菌物品应分开放置,并有明确分区标志;无菌包外及一次性无菌物品外包装上应注明物品名称及灭菌日期,并按照失效期的先后顺序摆放和取用。2.保持无菌无菌物品应存放在无菌包或无菌容器内并保持无菌状态。3.定时检查有效期。定时检查无菌物品的有效期,在符合环境要求的存储条件下,无菌包的有效期一般为7天。

ABC

1.环境清洁进行无菌技术操作前半小时，须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，减少人员走动，以降低室内空气中的尘埃。防止尘埃飞扬。治疗室每日用紫外线照射消毒一次，时间20~30分钟即可，也可适当延长消毒时间。2.无菌操作衣帽穿戴要整洁。帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。必要时穿好无菌衣，带好无菌手套。3.物品管理无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌物品一经使用后，必须再经无菌处理后方可使用，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。4.无菌物品无菌物品必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，有效期一周为宜，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。无菌包在未被污染的情况下，可保存7天，过期应重新灭菌。无菌物品一经使用或过期，潮湿应重新进行灭菌处理。5.取无菌物操作者身距无菌区20cm，取无菌物品时须用无菌持物钳（镊），不可触及无菌物品或跨越无菌区域，手臂应保持在腰部以上。无菌物品取出后，不可过久暴露，若未使用，也不可放回无菌包或无菌容器内。疑有污染，不得使用。未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。6.无菌操作如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。一物一人，一套无菌物品，只能供一个病员使用，以免发生交叉感染。