更多“实时定量PCR反应中,各模板的Ct值与模板的起始拷贝数的对数不存在线性关系。”相关问题
  • 第1题:

    以下关于PCR的说法错误的是()

    • A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
    • B、应用PCR技术可以进行定点突变
    • C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
    • D、PCR反应中,仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增

    正确答案:C

  • 第2题:

    试证明Ct值与模板DNA的起始拷贝数成反比。


    正确答案: 一般来说,第n次PCR循环的荧光信号强度(Rn)等于背景信号强度(RB)加上每个分子的荧光强度(即单位荧光强度RS与分子数目的乘积),用数学式表示如下:Rn=RB+XO(1+Ex)nRs式中:Rn代表荧光信号强度;RB代表背景信号强度;Xo代表起始模板拷贝数;Ex代表扩增效率;Rs代表单位荧光强度;N代表循环次数。
    对每一个特定的PCR反应来说,Ex、RT、RB、和Rs都是常数,所发Ct值与lgXo成反比,也就是说,Ct值与起始模板DNA的拷贝数(Xo)的对数成反比,起始DNA浓度每增一倍,Ct值减小一个循环。因此,Ct值的引入确保了实时荧光PCR定量的精确和严格。

  • 第3题:

    什么是定量PCR的Ct值?Ct值是如何确定的?


    正确答案: Cycle threshold(Ct):每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数,即在PCR中,荧光信号开始由本底进入指数增长的拐点处所对应的循环数。
    Ct值的含义是:PCR扩增过程中,荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数。
    确定:PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光阈值的缺省没置是3~15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。实验操作中,Ct值定义为极限上方产生可检测到的统计学上显著的荧光发射所对应的PCR循环次数。“基线上方”也就是阈值高度的量化,定义是基线范围内荧光信号强度标准偏差的10倍。阈值所在的横线与PCR扩增曲线的交点所指的PCR循环次数就是Ct值。Ct值越小,模板DNA的起始拷贝数越多;Ct值越大,反之。正常:18~30。Ct值取决于阈值,阈值取决于基线,基线取决于试验质量。

  • 第4题:

    RT-PCR是()。

    • A、包括反转录反应
    • B、PCR的模板是mRNA
    • C、可以进行基因表达定量分析
    • D、PCR的模板是cDNA
    • E、不需要DNA聚合酶

    正确答案:A,C,D

  • 第5题:

    实时定量PCR反应中,每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。


    正确答案:正确

  • 第6题:

    在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数()。

    • A、普通PCR仪
    • B、梯度PCR仪
    • C、原位PCR仪
    • D、荧光实时PCR仪
    • E、定性PCR仪

    正确答案:D

  • 第7题:

    多选题
    实时荧光定量RT-PCR是()。
    A

    可以实现初始模板拷贝数的定量

    B

    SYBR GreenⅠ特异性强

    C

    原理利用了临界点循环

    D

    利用PCR最终产物量高低进行定量

    E

    特异的分子信标探针可以提高定量的准确性


    正确答案: D,A
    解析: 暂无解析

  • 第8题:

    多选题
    RT-PCR是()。
    A

    包括反转录反应

    B

    PCR的模板是mRNA

    C

    可以进行基因表达定量分析

    D

    PCR的模板是cDNA

    E

    不需要DNA聚合酶


    正确答案: D,B
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    判断题
    实时定量PCR反应中,每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    单选题
    以空气为加热介质的PCR仪是()
    A

    金属板式实时定量PCR仪

    B

    96孔板式实时定量PCR仪

    C

    离心式实时定量PCR仪

    D

    各孔独立控温的定量PCR仪

    E

    荧光实时定量PCR仪


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    单选题
    在定量PCR中,对原始模板准确定量的影响因素中,最大的是()
    A

    原始模板的量

    B

    扩增效率

    C

    循环次数

    D

    扩增产物的量

    E

    循环阈值


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    多选题
    PCR反应体系中,需要的成分为:()
    A

    DNA模板

    B

    引物

    C

    dNTP

    D

    DNA聚合酶


    正确答案: C,D
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    荧光定量PCR结果中样品的Ct值受下列哪些因素的影响()。

    • A、阈值设定
    • B、模版的起始浓度
    • C、PCR反应的循环数
    • D、引物的扩增效率

    正确答案:A,B,D

  • 第14题:

    在定量PCR中,对原始模板准确定量的影响因素中,最大的是()

    • A、原始模板的量
    • B、扩增效率
    • C、循环次数
    • D、扩增产物的量
    • E、循环阈值

    正确答案:B

  • 第15题:

    PCR反应对模板有什么要求?


    正确答案:基因组DNA、噬菌体DNA、质粒DNA、cDNA、mRNA、预先扩增的DNA均可作为模板。PCR反应对模板纯度要求不是很高,经过标准分子生物学方法制备的样品即可以作为模板;但是模板中绝对不能含有蛋白酶、核酸酶、Taq酶抑制剂和任何可以结合DNA的蛋白;虽然片段长短不是影响PCR效率的关键因素,短片段模板PCR效率更高;为保证反应的特异性,应使用ng级的克隆DNA、μg级的单拷贝染色体DNA、或104拷贝的待扩增片段。

  • 第16题:

    实时荧光定量RT-PCR是()。

    • A、可以实现初始模板拷贝数的定量
    • B、SYBR GreenⅠ特异性强
    • C、原理利用了临界点循环
    • D、利用PCR最终产物量高低进行定量
    • E、特异的分子信标探针可以提高定量的准确性

    正确答案:A,C,E

  • 第17题:

    目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别()。

    • A、金属板式实时定量PCR仪
    • B、梯度定量PCR仪
    • C、原位定量PCR仪
    • D、离心式实时定量PCR仪
    • E、各孔独立控温的定量PCR仪

    正确答案:A,D,E

  • 第18题:

    判断题
    实时定量PCR反应中,各模板的Ct值与模板的起始拷贝数的对数不存在线性关系。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第19题:

    问答题
    PCR反应对模板有什么要求?

    正确答案: 基因组DNA、噬菌体DNA、质粒DNA、cDNA、mRNA、预先扩增的DNA均可作为模板。PCR反应对模板纯度要求不是很高,经过标准分子生物学方法制备的样品即可以作为模板;但是模板中绝对不能含有蛋白酶、核酸酶、Taq酶抑制剂和任何可以结合DNA的蛋白;虽然片段长短不是影响PCR效率的关键因素,短片段模板PCR效率更高;为保证反应的特异性,应使用ng级的克隆DNA、μg级的单拷贝染色体DNA、或104拷贝的待扩增片段。
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    问答题
    试证明Ct值与模板DNA的起始拷贝数成反比。

    正确答案: 一般来说,第n次PCR循环的荧光信号强度(Rn)等于背景信号强度(RB)加上每个分子的荧光强度(即单位荧光强度RS与分子数目的乘积),用数学式表示如下:Rn=RB+XO(1+Ex)nRs式中:Rn代表荧光信号强度;RB代表背景信号强度;Xo代表起始模板拷贝数;Ex代表扩增效率;Rs代表单位荧光强度;N代表循环次数。
    对每一个特定的PCR反应来说,Ex、RT、RB、和Rs都是常数,所发Ct值与lgXo成反比,也就是说,Ct值与起始模板DNA的拷贝数(Xo)的对数成反比,起始DNA浓度每增一倍,Ct值减小一个循环。因此,Ct值的引入确保了实时荧光PCR定量的精确和严格。
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    多选题
    目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别()。
    A

    金属板式实时定量PCR仪

    B

    梯度定量PCR仪

    C

    原位定量PCR仪

    D

    离心式实时定量PCR仪

    E

    各孔独立控温的定量PCR仪


    正确答案: C,D
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    有关RT-PCR实验的叙述中正确的是()
    A

    需要先进行PCR,再进行逆转录

    B

    该反应的最初起始模板不是DNA

    C

    合成的终产物是基因组DNA

    D

    在进行PCR时,模板不是cDNA

    E

    逆转录合成的产物是RNA


    正确答案: D
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    下列关于Ct值的叙述,错误的是()
    A

    是扩增曲线与荧光本底基线的交叉点处相应的反应循环数

    B

    可以根据Ct值的大小估计模板的初始量

    C

    Ct值大小与模板量呈正比,Ct值越大,模板量越多

    D

    是定量PCR外参照系统中重要的参数

    E

    Ct值大小与模板量呈反比,Ct值越小,模板量越多


    正确答案: E
    解析: 暂无解析