黏性末端

第1题：

第2题：

在重组DNA操作中为了提高连接效率常常将非互补的黏性末端修饰成平末端之后再进行连接。请问将黏性末端变为平端的方法有哪些？

正确答案: （1）5’—突出黏性末端的补平，一般选用大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow大片段聚合酶进行填补；
（2）3’—突出黏性末端的切平，一般选用T4噬菌体DNA聚合酶或单链DNA的SI核酸切平。

第3题：

限制性核酸内切酶，简称限制酶，是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶切割DNA后不会产生（）

• A、黏性末端
• B、5′黏性末端
• C、3′黏性末端
• D、平末端
• E、单链缺口

正确答案:E

第4题：

在基因工程操作过程中，E•coliDNA连接酶的作用是（）

• A、将任意两个DNA分子连接起来
• B、连接具有相同黏性末端的DNA分子，包括DNA分子的基本骨架和碱基对之间的氢键
• C、只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键
• D、只连接具有相同黏性末端的DNA分子碱基对之间的氢键

正确答案:C

第5题：

DNA连接酶作用于黏性末端之间的氢键吗？

正确答案:不。只能作用于脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA骨架上的缺口（磷酸二酯键）。

第6题：

外源基因与载体的连接方法有黏性末端连接、（）、（）、（）。

正确答案:平端连接；同聚物加尾连接；人工接头连接

第7题：

限制性内切酶在切割DNA分子时会产生哪几种缺口（）.

• A、3’黏性末端
• B、4’黏性末端
• C、平端
• D、5’黏性末端

正确答案:A,C,D

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

下列四条DNA分子中，彼此间具有黏性末端的一组是（） ①②③④

A①②

B②③

C③④

D②④

D
DNA连接酶能将具有相同黏性末端或黏性末端互补配对的DNA片段连接起来．①②③④都具有黏性末端，且黏性末端各不相同，但其中②和④的黏性末端能碱基互补配对，所以DNA连接酶能将②和④“粘连”起来形成新的DNA分子。故选：D

第14题：

简述黏性末端DNA重组体的构建过程。

正确答案:目的基因和载体可由同一种限制酶切割后产生，或由不同的限制酶切割形成互补黏性末端，经退火，彼此间很容易按碱基配对原则形成氢键。然后由DNA连接酶催化连接接头处的缺口，形成重组质粒。载体DNA在限制酶切割后，用碱性磷酸酶处理，除去5’端磷酸基，以避免载体DNA自身环化。

第15题：

某一DNA被EcoRⅠ切割一次后产生哪一种末端？产生几个？（）

• A、黏性末端；2个
• B、平末端；2个
• C、黏性末端；1个
• D、平末端；1个

正确答案:A

第16题：

下列关于DNA连接酶的叙述正确的是（） ①催化相同黏性末端的DNA片段之间的连接 ②催化不同黏性末端的DNA片段之间的连接 ③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成 ④催化DNA分子两条链的脱氧核糖与磷酸之间磷酸二酯键的形成

• A、①③
• B、②④
• C、②③
• D、①④

正确答案:D

第17题：

黏性末端

正确答案:有些限制性内切酶切割DNA后产生5’磷酸基团突出的末端和3’羟基突出的末端，统称为黏性末端。

第18题：

重组DNA的连接方式不包括（）。

• A、黏性末端连接
• B、平头末端连接
• C、黏性末端与平头末端连接
• D、DNA连接子技术
• E、DNA适配子技术

正确答案:C

第19题：

重组DNA技术中DNA的连接方式有（　）

• A、黏性末端连接
• B、平端连接
• C、黏性末端与平端的连接
• D、人工接头连接
• E、同聚物加尾连接

正确答案:A,B,D,E

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：