Klenow片段的主要用途有哪些？
题目
Klenow片段的主要用途有哪些？
相似考题
参考答案和解析
正确答案:
（1）补齐双链DNA的3ˊ末端；
（2）通过补齐3ˊ端，标记3ˊ末端；
（3）在cDNA克隆中，合成第二股链；
（4）DNA序列分析。
（2）通过补齐3ˊ端，标记3ˊ末端；
（3）在cDNA克隆中，合成第二股链；
（4）DNA序列分析。
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第1题：
不需要引物的酶是（）。
- A、Klenow片段
- B、RNA聚合酶
- C、反转录酶
- D、Taq DNA聚合酶
正确答案:B -
第2题：
Klenow片段有5ˊ→3ˊ聚合酶活性及3ˊ→5ˊ外切酶活性，没有5ˊ→3ˊ外切酶活性。
正确答案:正确 -
第3题：
Klenow片段（Klenow fragment）具有5ˊ→3ˊ聚合酶活性及（）外切酶活性，失去了（）外切酶活性。
正确答案:3ˊ→5ˊ；5ˊ→3ˊ -
第4题：
Klenow片段具有5ˊ→3ˊ聚合酶活性、3ˊ→5ˊ和5ˊ→3ˊ核酸外切酶活性。
正确答案:错误 -
第5题：
Klenow 片段(Klenow fragment)
正确答案:E.coliDNA聚合酶I经部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性。 -
第6题：
Klenow片段指的是（）
- A、DNA-polⅠ水解后的小片段
- B、DNA-polⅠ水解后的大片段
- C、DNA-polⅡ水解后的大片段
- D、DNA-polⅡ水解后的小片段
- E、DNA-polⅢ水解后的大片段
正确答案:B -
第7题：
问答题Klenow片段有几种酶活性？说明其主要用途。正确答案： K.lenow片段有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，无5’→3’外切酶活性。
主要用途：
①补平限制性内切酶切割DNA产生的3’凹端；
②用[32P]dNTP补平3’凹端，末端标记DNA片段；
③对带3’突出端DNA末端标记；
④cDNA克隆中，用于合成cDNA第二链；
⑤在体外诱变中，从单链模板合成双链DNA；
⑥应用双脱氧链末端终止法进行DNA测序。解析： 暂无解析 -
第8题：
判断题突出的3’末端或凹缺的 3’末端都可以用 Klenow 大片段酶进行末端标记。A对
B错
正确答案： 对解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题什么是Klenow酶？有哪些活性？在基因工程中有什么作用？正确答案： K.lenow酶是1974年 Klenow用枯草杆菌蛋白酶水解 DNA聚合酶 I，得到两个片段，其中大片段的分子量为 75kDa，它具有 5’→ 3’聚合酶和 3’→ 5’外切核酸酶的活性，小片段具有 5’→ 3’外切核酸酶活性。由于大片段失去了 DNA聚合酶 I中会降解 5’引物的 5’→ 3’外切核酸酶的活性，所以在基因工程中更有用。 Klenow酶主要有下列用途：
（1）修复反应，制备平末端可用 Klenow酶修复限制性内切核酸酶或其分方法产生的 5’或 3’突出末端，制备平末端，这样可以使原来具有不相容的黏性末端的 DNA片段通过平末端重组。如在反应系统中加入放射性同位素标记的脱氧核苷酸，用这种末端填补的方法可以制备3’末端标记的探针。用 Klenow 酶修复 5’突出末端的反应主要是利用了 Klenow 酶的 DNA聚合酶活性，是填补反应；而修复 3’突出末端则是用 Klenow酶的 3’→ 5’外切核酸酶的活性，是切割反应。用 Klenow酶的切割反应来修复 3’突出末端是不理想的，改用 T4DNA 聚合酶或其他的酶是更好的选择。
（2）标记 DNA3’突出末端（protmding end）该反应分两步进行：先用 3’→ 5’的外切核酸酶活性除去 3’突出末端，产生 3’隐含末端，然后在高浓度的标记底物（α～32p_dNTP）存在下，使降解（3’→ 5’）作用与聚合（5’→ 3’）作用达到平衡。这种反应也叫交换或取代反应（exchange／replacem—entreaction）。不过这一反应用 T4DNA 聚合酶的效果更好，因它的 3’→ 5’外切核酸酶活性较强。
（3）其他的一些用途：包括用双脱氧末端终止法进行 DNA序列分析、用于 cDNA第二链的合成、在定点突变中用于合成第二链、用引物延伸法（primer extension）制备单链 DNA探针等。解析： 暂无解析 -
第10题：
填空题Klenow片段（Klenow fragment）具有5ˊ→3ˊ聚合酶活性及（）外切酶活性，失去了（）外切酶活性。正确答案： 3ˊ→5ˊ,5ˊ→3ˊ解析： 暂无解析 -
第11题：
填空题DNA聚合酶 I的 Klenow大片段是用（）切割DNA聚合酶 I得到的分子量76kDa的大片段，具有两种酶活性： （1）（）；（2）（）的活性。正确答案： 枯草杆菌蛋白酶,5’3’合成酶的活性,3’5’外切核酸酶解析： 暂无解析 -
第12题：
判断题Klenow片段具有5ˊ→3ˊ聚合酶活性、3ˊ→5ˊ和5ˊ→3ˊ核酸外切酶活性。A对
B错
正确答案： 对解析： 暂无解析 -
第13题：
Klenow片段的主要用途有（）。
- A、补齐双链DNA的3ˊ末端。
- B、通过补齐3ˊ端，标记3ˊ末端。
- C、在cDNA克隆中，第二股链的合成。
- D、DNA序列分析
- E、平端连接
正确答案:A,B,C,D -
第14题：
Klenow片段
正确答案:DNA聚合酶I用枯草杆菌蛋白酶（subtilisin）裂解后产生的大片段。 -
第15题：
用蛋白水解酶作用于原核生物的DNA聚合酶I，可将其分为大、小两个片段，其中大片段叫Klenow片段，具有（）和（）活性，另外一个片段具有（）活性。
正确答案:5→3聚合酶；3→5外切酶；5→3外切酶 -
第16题：
大肠杆菌DNA聚合酶I催化功能有（）、（）和（）。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I，可将其分为大、小两个片段，其中（）片段叫Klenow，具有（）和（）作用，另外一个片段具有（）活性。
正确答案:5’→3’聚合作用、5’→3’外切酶作用、3’→5’外切酶作用、大、5’→3’聚合酶、3’→5’外切酶、5’→3’外切酶 -
第17题：
Klenow片段有几种酶活性？说明其主要用途。
正确答案: K.lenow片段有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，无5’→3’外切酶活性。
主要用途：
①补平限制性内切酶切割DNA产生的3’凹端；
②用[32P]dNTP补平3’凹端，末端标记DNA片段；
③对带3’突出端DNA末端标记；
④cDNA克隆中，用于合成cDNA第二链；
⑤在体外诱变中，从单链模板合成双链DNA；
⑥应用双脱氧链末端终止法进行DNA测序。 -
第18题：
名词解释题Klenow 片段(Klenow fragment)正确答案： E.coliDNA聚合酶I经部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性。解析： 暂无解析 -
第19题：
填空题用蛋白水解酶作用于原核生物的DNA聚合酶I，可将其分为大、小两个片段，其中大片段叫Klenow片段，具有（）和（）活性，另外一个片段具有（）活性。正确答案： 5→3聚合酶,3→5外切酶,5→3外切酶解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题Klenow片段的主要用途有哪些？正确答案： （1）补齐双链DNA的3ˊ末端；
（2）通过补齐3ˊ端，标记3ˊ末端；
（3）在cDNA克隆中，合成第二股链；
（4）DNA序列分析。解析： 暂无解析 -
第21题：
名词解释题Klenow片段正确答案： E.coliDNA聚合酶I经部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性。解析： 暂无解析 -
第22题：
多选题Klenow片段的主要用途有（）。A补齐双链DNA的3ˊ末端。
B通过补齐3ˊ端，标记3ˊ末端。
C在cDNA克隆中，第二股链的合成。
DDNA序列分析
E平端连接
正确答案： C,E解析： 暂无解析 -
第23题：
判断题Klenow片段有5ˊ→3ˊ聚合酶活性及3ˊ→5ˊ外切酶活性，没有5ˊ→3ˊ外切酶活性。A对
B错
正确答案： 错解析： 暂无解析