高分子量DNA的分离纯化的方法有（）A、酚抽提法B、甲酰胺解聚法C、玻棒缠绕法D、PCRE、异丙醇沉淀法

题目

高分子量DNA的分离纯化的方法有（）

  • A、酚抽提法
  • B、甲酰胺解聚法
  • C、玻棒缠绕法
  • D、PCR
  • E、异丙醇沉淀法
相似考题

1.高分子量DNA的分离纯化的方法有 ( )A、酚抽提法B、甲酰胺解聚法C、玻棒缠绕法D、PCRE、异丙醇沉淀法

2.下列哪种方法不是分离纯化高分子量DNA的（）A、酚抽提法B、煮沸裂解法C、甲酰胺解聚法D、玻棒缠绕法E、异丙醇沉淀法

3.从细菌中分离质粒DNA的方法都包括的基本步骤是（）。A、培养细菌检测质粒B、培养细菌使质粒扩增C、收集和裂解细胞D、分离和纯化质粒DNAE、B+C+D

4.制备型超速离心机主要用途包括A、细胞器和病毒分离纯化B、生物大分子分离纯化C、能使亚细胞器分级分离D、可用于测定蛋白及核酸的分子量E、分离细胞碎片

参考答案和解析
正确答案:A,B,C,E
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  • 第1题：

    寡聚dT-纤维素柱层析用于（）

    • A、从总DNA中分离纯化质粒DNA
    • B、从总核蛋白中分离DNP
    • C、除去杂蛋白
    • D、从总RNA中纯化mRNA

    正确答案:D

  • 第2题：

    微生物菌种的分离和纯化可以用的方法有（）、（）。


    正确答案:平板划线法；稀释后涂布平板法

  • 第3题：

    常用的微生物分离纯化方法有哪些？这些方法各有什么优缺？


    正确答案: 常用的微生物分离纯化方法有：稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用，不需要特殊的仪器设备，分离纯化效果好稀释混合倒平板法有两个缺点，一是会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间，缺乏溶氧而生长受影响，形成的菌落微小难于挑取；一是在倾入熔化琼脂培养基时，若温度控制过高，易烫死某些热敏感菌，过低则会引起琼脂太快凝固，不能充分混匀。在微生物学研究中，更常用的纯种分离方法是稀释涂布平板法。另一种简单快速有效的涂布平板法，为玻璃涂棒连续涂布分离法。平板划线分离法的特点是简便快速，但单个菌落并不一定是由单个细胞形成的，需再重复划线1～2次，并结合显微镜检测个体形态特征，才可获得真正的纯培养物。

  • 第4题：

    分离纯化酶有哪些常用方法，根据是什么？


    正确答案: 酶的分离纯化工作主要是，将酶从杂蛋白中分离出来或者将杂蛋白从酶溶液中除去。现有的酶分离纯化方法都是依据酶和杂蛋白在性质上的差异而建立的。
    1、根据分子大小而设计的方法，如离心分离法、筛膜分离法、凝胶过滤法等。
    2、根据溶解度的大小分离的方法，如盐析法，有机溶剂沉淀法，共沉淀法，选择性沉淀法，等电点沉淀法。
    3、按分子所带正负电荷的多少分离的方法，如离子交换分离法，电泳分离法，聚焦层析法等。
    4、按稳定性差异建立的分离方法，如选择性热变性法，选择性酸碱变性法，选择性表面变性法等。
    5、按亲和作用的差异建立的分离方法，如亲和层析法，亲和电泳法。
    5.酶分子修饰的方法及意义
    通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
    酶分子的修饰方法分为化学法、生物法和物理法。化学法又可分为金属离子置换法、肽链有限水解法、蛋白质侧链基团的小分子修饰法等。生物法是通过基因工程的手段改变蛋白质，即基于核酸水平对蛋白质进行改造，利用基因操作技术对DNA或mRNA进行改造和修饰，以期获得化学结构更为合理的蛋白质。物理法的特点是不改变酶的组成和基团，酶分子的共价键不发生变化。

  • 第5题：

    强心甙的分离和纯化常用的方法有（）法，（）法和（）法。


    正确答案:两相溶剂萃取；逆流分溶；柱层析

  • 第6题：

    简述质粒DNA纯化方法。


    正确答案: （1）碱性蔗糖密度梯度离心法，（2）氯化铯-溴化乙錠密度梯度离心法，（3）硝酸纤维素膜吸附法

  • 第7题：

    有哪些方法可区分同样分子量的单链DNA和单链RNA？


    正确答案:（1）因DNA分子含D—2—脱氧核糖，RNA分子中含核糖，所以可用二苯胺法和苔黑酚法区分同样分子量的单链DNA和单链RNA。
    （2）用特异的核酸酶。
    （3）RNA易被碱水解，DNA不被碱水解。
    （4）浮力密度。
    （5）酸水解后，接下来层析，DNA分子中含胸腺嘧啶，RNA分子中不含胸腺嘧啶而含尿嘧啶。

  • 第8题：

    填空题
    超离心法纯化质粒DNA时，选用 CsCl 作介质的优点是： （1）（）（2）（），从而使不同分子量的DNA分子得以分开。

    正确答案： CsCl与不同DNA起反应,CsCl可以自动形成密度梯度
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    填空题
    常用的蛋白质分离纯化方法有（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）等。

    正确答案： 离心,透析,沉淀,层析,电泳,蛋白印迹,蛋白质芯片,质谱法
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    从细菌中分离质粒DNA的方法都包括的基本步骤是（）
    A

    培养细菌检测质粒

    B

    培养细菌使质粒扩增

    C

    收集和裂解细胞

    D

    分离和纯化质粒DNA

    E

    B+C+D


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    我们在研究一个蛋白质性质时，一般首先要分离纯化蛋白，并且检测出其分子量大小。下面哪种实验技术既可以起到分离纯化的作用，又可以测定其分子量？（）
    A

    凝胶过滤层析

    B

    亲和层析

    C

    离子交换层析

    D

    纸层析


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    下列哪种方法不是分离纯化高分子量DNA的（）
    A

    酚抽提法

    B

    煮沸裂解法

    C

    甲酰胺解聚法

    D

    玻棒缠绕法

    E

    异丙醇沉淀法


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有哪些？它们的原理是什么？


    正确答案: 分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有：离子交换色谱，疏水色谱，亲和色谱和凝胶过滤色谱；
    离子交换色谱，以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子和交换剂上的平衡离子进行可拟交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种色谱方法；
    疏水色谱，利用蛋白质表面的疏水区域与固定相上疏水性基团相互作用力的差异对蛋白质组分进行分离的色谱方法；
    亲和色谱：利用固定化配体与目的蛋白质之间非常特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的又是可逆的，改变条件可以使这种结合解除的原理分离纯化蛋白质；
    凝胶过滤色谱，是以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小对溶液中各组分进行分离的液相色谱方法。

  • 第14题：

    根据溶解度不同，蛋白质有几种分离纯化方法。


    正确答案: 利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。
    1）等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。
    2）盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐（NaCl）比二价离子的中性盐[（NH4）2SO4]对蛋白质溶解度的影响要小。
    3）低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。一般在0～40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开始变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。

  • 第15题：

    酶提取和分离纯化的方法有哪些？


    正确答案: （一）根据酶分子溶解度不同的方法
    （1）盐析沉淀法
    （2）等电点沉淀法
    （3）有机溶剂沉淀法
    （二）根据酶分子大小和形状不同的方法
    （1）离心分离法
    （2）体积排阻法
    （3）超滤
    （三）根据酶分子电荷性质的方法
    （1）离子交换层析
    （2）等电聚焦电泳
    （四）根据酶分子专一性结合的分离方法
    （1）亲和层析

  • 第16题：

    分离纯化蛋白质的方法有：（）法，（）法，（）法，（）法及（）法等。


    正确答案:分级沉淀；透析；层析；凝胶过滤；电泳

  • 第17题：

    常见蛋白质分离纯化的方法有哪些？


    正确答案:按照分子大小：透析、超过滤、密度梯度离心、凝胶过滤
    按照溶解度差别：等电点沉淀法、盐析、有机溶剂沉淀
    按照电荷不同分：电泳、离子交换
    蛋白质选择吸附分：结晶磷酸钙
    配体特异性分：亲和层析

  • 第18题：

    氦气的纯化方法有（）。

    • A、低温吸附分离
    • B、分离提纯
    • C、加压降温
    • D、低温固化

    正确答案:A,D

  • 第19题：

    问答题
    从细菌中分离总 DNA，应采取哪些措施获得高分子量的 DNA？

    正确答案： 添加酶抑制剂抑制核酸酶活性，温和操作，加保护剂等。 
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    DNA疫苗的纯化的方法有哪些？

    正确答案： D.NA疫苗的纯化：质粒纯化的主要目的是去除带有抗原基因的表达质粒DNA，再通过培养含有表达质粒的工程苗使质粒扩增，最后利用一系列的纯化方法获得纯度较高的质粒。
    （1）聚乙二醇（PEG）沉淀法，基本原理：聚乙二醇是一类高分子化合物，在不同的盐离子溶液中，可结合形成孔径不同的网状结构，利用超螺旋状态的双链闭合环状DNA与其余各类杂质分子在该溶液中沉降系数的不同，通过高速离心，使沉降系数较高的质粒DNA沉淀下来，而其他的杂质分子和不同构象的质粒DNA分子则被网状结构所阻隔，从而达到质粒纯化的目的，该方法经济简单，对碱裂解法提取的质粒纯化效果较好制备，目前也有商品化的质粒纯化试剂盒。
    （2）柱色谱法，根据质粒DNA与细菌染色体DNA、RNA，蛋白质等杂质的分子量、理化性质、带电程度等方面的不同，利用尺寸排阻色谱、离子交换色谱、反相色谱等方法，可将质粒DNA与其他杂质分开.利用该方法可一次处理较大量的样本，获得纯度较高的质粒，适用于较大规模的质粒制备，目前也有商品化的质粒纯化试剂盒：①阴离子交换色谱纯化质粒DNA②凝胶排阻色谱精制质粒DNA。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    问答题
    微量碱法分离纯化质粒DNA的原理及其主要步骤。

    正确答案： 原理及其主要步骤：
    ①质粒DNA与染色体线性DNA在拓扑学上的差异：质粒DNA（cccDNA）是共价闭合双链超盘旋构型的小分子DNA，而细胞染色体DNA在细胞裂解分离过程中断裂成线性DNA（LDNA），虽然在化学本质上没有本质区别，但在高级结构拓扑学上存在差异。
    ②差异碱变性：在pH12.0-12.5高pH条件下，线性的DNA容易变性解链，而质粒DNA不易变性或很少变性。
    ③酸复性：在pH4.8条件下，cccDNA很快复性，而线性的染色体DNA不可逆的变性并与蛋白质、RNA形成沉淀物，通过离心可以把LDNA与cccDNA分开。cccDNA在上清液中。
    ④酒精沉淀cccDNA：以2.5倍的95%酒精沉淀质粒DNA，（浓度为66%沉淀最好）。保存在TE（pH8.0）缓冲液中，放置在-20℃下保存备用。
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    多选题
    制备型超速离心机主要用途包括（）。
    A

    细胞器和病毒分离纯化

    B

    生物大分子分离纯化

    C

    能使亚细胞器分级分离

    D

    可用于测定蛋白及核酸的分子量

    E

    分离细胞碎片


    正确答案： B,D
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    多选题
    高分子量DNA的分离纯化的方法有（　）
    A

    酚抽提法 

    B

    甲酰胺解聚法 

    C

    玻棒缠绕法 

    D

    PCR 

    E

    异丙醇沉淀法 


    正确答案： D,C
    解析： 暂无解析

  • 第24题：

    问答题
    常用的微生物分离纯化方法有哪些？这些方法各有什么优缺？

    正确答案： 常用的微生物分离纯化方法有：稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用，不需要特殊的仪器设备，分离纯化效果好稀释混合倒平板法有两个缺点，一是会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间，缺乏溶氧而生长受影响，形成的菌落微小难于挑取；一是在倾入熔化琼脂培养基时，若温度控制过高，易烫死某些热敏感菌，过低则会引起琼脂太快凝固，不能充分混匀。在微生物学研究中，更常用的纯种分离方法是稀释涂布平板法。另一种简单快速有效的涂布平板法，为玻璃涂棒连续涂布分离法。平板划线分离法的特点是简便快速，但单个菌落并不一定是由单个细胞形成的，需再重复划线1～2次，并结合显微镜检测个体形态特征，才可获得真正的纯培养物。
    解析： 暂无解析

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