下列哪些属于基因敲除载体导入胚胎干细胞的常用方法?（ ）A.显微注射法 B.电穿孔法 C.脂质体法 D.病毒感染法 E.DEAE葡聚糖介导法

题目
下列哪些属于基因敲除载体导入胚胎干细胞的常用方法?（ ）

A.显微注射法
B.电穿孔法
C.脂质体法
D.病毒感染法
E.DEAE葡聚糖介导法
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1.（16分）小鼠基因敲除技术获得2007年诺贝尔奖，该技术采用基因工程、细胞工程、杂交等手段使小鼠体内的某一基因失去功能，以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用。例如现有基因型为BB的小鼠，要敲除基因B，可先用体外合成的突变基因b取代正常基因B，使BB细胞改变为Bb细胞，最终培育成为基因敲除小鼠。（1）基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞，可利用重组质粒上的______________检测。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，则可能导致细胞内的_________________被激活，使小鼠细胞发生癌变。

2.下列哪种方法不属于基因治疗( )A、基因矫正B、基因置换C、基因失活D、基因增补E、基因敲除

3.精子载体法是以精子作为外源基因的载体,通过()将外源基因导入动物胚胎,从而实现基因转移的方法。A、细胞融合B、核移植C、人工授精

4.最常用作转基因和基因敲除动物模型的生物是( )A、大鼠B、小鼠C、果蝇D、线虫E、家兔

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  • 第1题：

    根据与胚胎干细胞基因重组结果的不同，基因敲除载体可以分为

    A.转换型载体
    B.插入型载体
    C.扩增载体
    D.表达载体
    E.病毒载体

    答案：A,B
    解析：

  • 第2题：

    目前研究最多、最深入的基因敲除动物模型是基因敲除小鼠。


    正确答案:正确

  • 第3题：

    基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，将同源DNA片段导入受体细胞，使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段，达到基因敲除的目的。由此可推测（）

    • A、基因敲除实际上是删除某个基因，达到使该基因“沉默”的目的
    • B、利用基因敲除技术不能修复细胞中的病变基因
    • C、基因敲除可定向改变生物体的某一基因
    • D、基因敲除技术可治疗先天性愚型

    正确答案:C

  • 第4题：

    把目的基因导入受体细胞常用的方法？


    正确答案: ①运用如质粒、大肠杆菌λ噬菌体、Ti质粒等载体；
    ②利用微弹射击法；
    ③电击法；
    ④PEG（聚乙二醇）介导法。

  • 第5题：

    课堂导入常用的导入方法包括哪些？


    正确答案: （1）情景式导入。
    （2）材料式导入。
    （3）问题式导入。
    （4）衔接式导入。

  • 第6题：

    真核生物基因敲除的技术路线主要包括（）、用（）、（）等方法把重组DNA导入胚胎干细胞纯系中。


    正确答案:构建重组基因载体；电穿孔；显微注射

  • 第7题：

    研究最多、最深入的基因敲除动物模型的动物是（）。

    • A、基因敲除小鼠
    • B、基因敲除大鼠
    • C、基因敲除豚鼠
    • D、基因敲除兔

    正确答案:A

  • 第8题：

    常用的目的基因与载体的连接方法有哪些？


    正确答案: 外源DNA片段同载体分子连接的方法，即DNA分子体外重组技术，主要是依赖于核酸内切限制酶和DNA连接酶的作用.一般说来在选择外源DNA同载体分子连接反应程序时，需要考虑到下列三个因素：
    （1）实验步骤要尽可能地简单易行；
    （2）连接形成的"接点”序列，应能被一定的核酸内切限制酶重新切割，以便回收插入的外源DNA片段；
    （3）对转录和转译过程中密码结构的阅读不发生干扰。

  • 第9题：

    以下哪项技术常用于基因诊断中：（）。

    • A、PCR
    • B、双向电泳
    • C、飞行质谱
    • D、酵母双杂交
    • E、基因敲除

    正确答案:A

  • 第10题：

    单选题
    DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。 DNA重组技术的应用不包括
    A

    基因诊断

    B

    基因治疗

    C

    转基因和基因敲除

    D

    单克隆抗体制备

    E

    基因工程药物、疫苗和抗体


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    下列关于基因工程的叙述中，错误的是（）。
    A

    基因工程常用的运载体包括细菌的质粒、噬菌体、动植物病毒

    B

    将目的基因导入大肠杆菌最常用的方法是用Ca2+处理细胞

    C

    转基因羊在培育过程中还用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术

    D

    基因治疗是把有基因缺陷的细胞中的缺陷基因剔除后再导入健康的外源基因


    正确答案： C
    解析： 基因工程常用的运载体包括质粒、噬菌体和动植物病毒等，故A正确；把目的基因导入大肠杆菌时最常用的方法是钙离子处理法，故B正确；转基因羊在培育过程中运用了动物细胞培养和胚胎移植等技术，故C正确：基因治疗是把正常的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中发挥作用，以达到治疗疾病的目的，并不能剔除基因，故D错误。

  • 第12题：

    问答题
    试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。

    正确答案： （一）显微注射法
    （1）利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
    （2）优点：可准确导入外源基因，转化频率高，鱼体内可达20%，不需载体，直接获得纯系，实验时间短。
    （3）缺点：仪器贵重，操作繁琐耗时，一次处理卵很少。
    （二）电穿孔转化法
    （1）利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
    （2）优点：操作简单，同时处理大量受精卵。
    （3）缺点：导入是随机的、无定向的，转移率低。
    （三）精子介导法
    （1）精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
    （2）优点：简便，成本低，便于大量筛选，是近几年转基因动物研究的热点。
    （3）缺点：处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
    （四）基因枪转化法
    （1）又称微弹轰击转化法，以高压气体为动力，利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
    （2）优点：该法简单快速，接触面积大、转化率高，可同时处理多个个体。
    （3）缺点：不稳定，表达方面存在问题。
    （五）病毒（噬菌体）颗粒转导法
    用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞。
    转基因病毒具严格的宿主特异性，且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后，此法对鱼类暂不适应。
    （六）组织注射法
    将外源基因直接向机体组织注射，周围组织能将外源基因纳入，并且注入的外源基因能被整合。
    解析： 暂无解析

  • 第13题：

    试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。


    正确答案: （一）显微注射法
    （1）利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
    （2）优点：可准确导入外源基因，转化频率高，鱼体内可达20%，不需载体，直接获得纯系，实验时间短。
    （3）缺点：仪器贵重，操作繁琐耗时，一次处理卵很少。
    （二）电穿孔转化法
    （1）利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
    （2）优点：操作简单，同时处理大量受精卵。
    （3）缺点：导入是随机的、无定向的，转移率低。
    （三）精子介导法
    （1）精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
    （2）优点：简便，成本低，便于大量筛选，是近几年转基因动物研究的热点。
    （3）缺点：处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
    （四）基因枪转化法
    （1）又称微弹轰击转化法，以高压气体为动力，利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
    （2）优点：该法简单快速，接触面积大、转化率高，可同时处理多个个体。
    （3）缺点：不稳定，表达方面存在问题。
    （五）病毒（噬菌体）颗粒转导法
    用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞。
    转基因病毒具严格的宿主特异性，且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后，此法对鱼类暂不适应。
    （六）组织注射法
    将外源基因直接向机体组织注射，周围组织能将外源基因纳入，并且注入的外源基因能被整合。

  • 第14题：

    在基因工程技术中，限制性核酸内切酶主要用于（）

    • A、目的基因的获取和导入
    • B、目的基因的导入和检测
    • C、目的基因的获取和与运载体结合
    • D、基因表达载体的构建和导入

    正确答案:C

  • 第15题：

    常用的外源基因导入受体细胞的方法有（）（）（）


    正确答案:化学法；电击法；显微注射法

  • 第16题：

    DNA重组技术是将目的DNA在体外重组于载体DNA分子上，构建成重组DNA分子，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行大量扩增，最终获得大量同一目的DNA片段。DNA重组技术的应用不包括（）

    • A、基因诊断
    • B、基因治疗
    • C、转基因和基因敲除
    • D、单克隆抗体制备
    • E、基因工程药物、疫苗和抗体

    正确答案:D

  • 第17题：

    基因敲除可用于哪些方面？


    正确答案:在胚胎细胞中进行同源重组，对基因敲除生物个体的表型分析，鉴定或推测该基因的生物学功能。

  • 第18题：

    除基因敲除法外，还有什么方法可破坏靶细胞表达。


    正确答案:其他方法就是沉默，从mRNA层面去解决。或者使用一些抑制剂，一直转录因子等等，最终影响表达。

  • 第19题：

    动物转基因常用的外源基因导入方法有哪些？各有何优缺点？


    正确答案: 显微注射法：优点：准确、快捷。缺点：成本很高。
    体细胞核移植方法：优点：经济、有效。缺点：耗时。

  • 第20题：

    下列方法不属于基因导入的物理方法的是（）。

    • A、DNA直接注射
    • B、电穿孔
    • C、超声波导入技术
    • D、脂质体介导
    • E、基因枪技术

    正确答案:D

  • 第21题：

    基因工程中常用载体，具有哪些性质？


    正确答案: （1）能在宿主细胞中进行独立和稳定的DNA自我复制。
    （2）易于从宿主细胞中分离并进行纯化。
    （3）在其DNA序列中具有适当的限制性DNA内切酶位点（最好是单一的识别位点）。
    （4）具有能够观察的表型特征。

  • 第22题：

    单选题
    下列哪种方法不属于基因治疗（）
    A

    基因矫正

    B

    基因置换

    C

    基因失活

    D

    基因增补

    E

    基因敲除


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    把目的基因导入受体细胞常用的方法？

    正确答案： ①运用如质粒、大肠杆菌λ噬菌体、Ti质粒等载体；
    ②利用微弹射击法；
    ③电击法；
    ④PEG（聚乙二醇）介导法。
    解析： 暂无解析

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