PCR是在试管中进行的____反应，每一次复制包括3个步骤，即____、____和____。

第1题：

第2题：

以下关于PCR的说法错误的是（）

• A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶
• B、应用PCR技术可以进行定点突变
• C、PCR的引物必须完全和模板互补配对
• D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增

正确答案:C

第3题：

下面关于多聚酶链式反应（PCR）的叙述正确的是（）

• A、PCR过程中需要引物，是为了使DNA双链分开
• B、PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步
• C、PCR过程中DNA合成方向是3’到5’
• D、PCR过程中边解旋边复制

正确答案:B

第4题：

PCR反应一般分为几个步骤？各步骤有什么特点？

正确答案: A.变性：双链DNA变成单链DNA。变性温度的高低由G+C含量决定；变性时间由DNA链长度决定。常规PCR变性条件为94～95度45s。
B.退火，将温度下降至适宜温度，使引物与模板DNA退火结合；退火是使引物和模板DNA复性。复性过程采取的温度（Ta）至关重要。复性温度过高，引物不能与模板很好地复性，扩增效率很低；复性温度太低，引物将产生非特异性复性，导致非特异性的DNA片段的扩增。退火温度通常在比理论计算的引物和模板的熔解温度低3～5℃的条件下进行。
C.延伸：寡核苷酸引物的延长，一般在耐热DNA聚合酶的最适温度下进行。对于Taq酶，为72～78度。
D 循环数：PCR扩增所需的循环数取决于反应体系中起始的模板拷贝数以及引物延伸和扩增的效率。
一般扩展条件：94℃60s 37℃60s 72℃120s，共25-30个循环。

第5题：

简述PCR原理及其基本反应步骤。

正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板互补的DNA链。

第6题：

什么是PCR，有什么特点，扩增反应有哪几个步骤？

正确答案: PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤，变性、退火（复性）、延伸3个步骤。

第7题：

聚合酶链式反应（PCR）的三个主要步骤是（），（）和（）。

正确答案:变性；退火；延伸

第8题：

PCR是在试管中进行的（）反应，每一次复制包括3个步骤，即（）、（）和（）。

正确答案:DNA复制；变性；退火；延伸

第9题：

什么是PCR扩增法，其原理、操作步骤、反应过程和意义？

正确答案: PCR技术是一种用于体外扩增位于两端已知序列之间的DNA区段的分子生物学技术。
PCR原理：PCR技术的实质为体内DNA复制的体外模拟。即使双链DNA热变性而分开成为单链DNA，退火后在低温下，两个与模板互补的引物与单链DNA配对结合，再在中温下利用TAGDNA聚合酶的聚合活性和热稳定性进行聚合（延伸）反应。每经过一次变性、退火和延伸为一个循环，所扩增的特定DNA序列数是按几何指数增长。
PCR技术操作步骤为：
①反复将目的基因片段进行热变性处理，令其双股链解开；
②进行反链杂交、退火、形成单链；
③用TagDNA聚合酶沿DNA链全程合成出两股双链DNA分子；
④然后开始第二个反应周期。每个反应周期，特异性目的基因可扩增一倍。用n代表反应周期数，则特异性DNA目的基因片段便按2^n指数扩增下去，一直扩增至所需数量为止。
PCR反应过程：
①DNA的变性：DNA双链在加热或碱性条件下，双链的氢键断裂为单链DNA，一般解链温度为85-95℃；
②引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐渐降低时，重新与其互补的引物或另一条单链结合形成双链，称为退火；
③引物延伸：以目标DNA为模板，以引物为固定起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物在DNA聚合酶的作用下，由5’端向3’端的方向进行DNA复制。
意义：PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因DNA片段，且全部操作已实现自动化，这一技术不仅广泛应用于基因重组操作中的基因扩增及其检出，而且在研究火花的致癌基因、等会基因序列变异，以及分子生物学、医学、食品、农业、化工的许多领域中都得到广泛的应用。

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

实时荧光定量PCR的优点包括（）。

• A、实时监控PCR反应的进程
• B、特异性高于普通PCR
• C、灵敏度高
• D、在单管中实现扩增和检测分析

正确答案:A,B,C,D

第15题：

PCR反应过程分为三个步骤，即（），（）和（）。

正确答案:变性；退火；延伸

第16题：

试管婴儿即________，其主要步骤：________、________、________、________、_______。

正确答案:体外受精与胚胎移植；促进与监测卵泡发育；取卵；体外受精；胚胎移植；移植后处理

第17题：

在PCR反应中，导致非特异性扩增的因素包括（）、（）和（）等。

正确答案:引物长度；引物浓度；dNTP浓度

第18题：

对鸡群沙门氏菌进行全面检疫的实验是（）

• A、血清平板凝集反应
• B、全血平板凝集反应
• C、凝集实验
• D、试管凝集
• E、PCR

正确答案:B

第19题：

PCR反应包括三个基本步骤：（）、（）和（）。

正确答案:变性；退火；延伸

第20题：

PCR反应包括（）、（）和（）三个步骤。

正确答案:变形；复性；延伸

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：