碱裂解法分离质粒DNA是根据质粒DNA与染色体DNA的分子量差异而设计的。

题目

碱裂解法分离质粒DNA是根据质粒DNA与染色体DNA的分子量差异而设计的。

相似考题

1.在碱裂解法提取质粒时，沉淀质粒DNA的试剂是A.SDSB.EDTAC.异丙醇D.75%乙醇E.无水乙醇

2.关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确 ( )A、溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体B、溶液Ⅱ的作用是使DNA变性C、溶液Ⅲ的作用是使DNA复性D、质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性E、该方法简单，重复性好，在实验中经常使用

3.在碱裂解法提取质粒时，用于沉淀质粒DNA的试剂是A.SDSB.EDTAC.75%乙醇D.异丙醇E.无水乙醇

4.常采用质粒DNA小量提取的方法是 ( )A、碱裂解法B、SDS裂解法C、煮沸裂解法D、酚抽提法E、牙签少量制备法

更多“碱裂解法分离质粒DNA是根据质粒DNA与染色体DNA的分子量差异而设计的。”相关问题

  • 第1题：

    cDNA与通常所说的DNA有所不同，cDNA应该是

    A、染色体DNA

    B、质粒DNA

    C、与RNA互补的DNA

    D、病毒DNA

    E、异源DNA


    参考答案：C

  • 第2题：

    下列DNA中，一般不用作克隆载体的是
    A.质粒DNA B.大肠杆菌DNA C.病毒DNA
    D.噬菌体DNA E.酵母人工染色体


    答案：B
    解析：
    克隆载体又称基因载体，是指为“携带”感兴趣的外源DNA，实现外源的无性繁殖或表达 有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。可充当克隆载体的分子有质粒DNA、噬菌体和病 毒DNA它们经适当改造后仍具有自我复制能力，或兼有表达外源基因的能力。为增加克隆载体插入外 源基因的容量,还设计有柯斯质粒载体和酵母人工染色体载体。大肠杆菌不用作克隆载体。

  • 第3题：

    目前使用较为广泛的质粒DNA小量提取的方法是（）

    • A、牙签少量制备法
    • B、小量一步提取法
    • C、SDS裂解法
    • D、碱裂解法
    • E、煮沸裂解法

    正确答案:D

  • 第4题：

    病毒的核酸是（）

    • A、DNA
    • B、RNA
    • C、DNA+RNA
    • D、DNA或RNA
    • E、质粒DNA

    正确答案:D

  • 第5题：

    碱裂解法制备质粒DNA的方法有哪些？


    正确答案: （1）接种菌落于含抗生素的LB中，37℃剧烈振荡反应；
    （2）培养液4℃12000rpm30min离心；
    （3）重悬细菌于100μl冰预冷的溶液I（50mM葡萄糖25mMTris-HCL（pH8.0），10mMEDTAPh8.0）中剧烈振荡；（4）加200μl亲配制液溶液II（0.2MNaOH1%SDS），混合内容物，不要振荡，置冰上；
    （5）加150μl冰预冷溶液III（5MKac60ml，冰乙酸11.5ml，水28.5ml），温和振荡10s置于阔步3-5min；
    （6）40℃。12000rpm离心5min，转移上清；
    （7）上清加等量酚；氯仿抽提，4℃，12000rpm离心2min，收集上清；
    （8）加入2倍体积乙醇，振荡混合，室温放置2min；
    （9）4℃，12000rpm，离心5min，弃上清；
    （10）倒置离心管，倾干液体；
    （11）1ml70%乙醇4℃洗涤沉淀，弃上清，空气中干燥10min；
    （12）用500μl含无DNA酶的胰RNA酶（20μg/ml）的TE重新溶解核酸，振荡，贮于-20℃。

  • 第6题：

    碱裂解法提取质粒DNA的原理，分析影响试验结果的各种可能因素。


    正确答案: 碱裂解法原理：在碱性条件下，双连DNA氢键断裂，结构破坏变性，环状超螺旋质粒不充分变性。在中性条件下变性质粒恢复原来构型，而线性大分子细菌DNA不能复性呈不溶物而经离心除去。
    （各种可能因素是上一届的，具体其实大家可以根据那天师兄说的去写）
    提取失败：
    1）洗去双链时，将质粒DNA洗去；
    2）破壁失败，质粒没析出；
    3）加剂问题
    电泳失败：1）电压太高
    2）没加染色剂
    3）胶穿孔
    4）电泳时间过长

  • 第7题：

    在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指（）

    • A、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶
    • B、噬菌体、质粒、DNA连接酶
    • C、DNA限制酶、RNA连接酶、质粒
    • D、DNA限制酶、DNA连接酶、质粒

    正确答案:D

  • 第8题：

    下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是（）

    • A、质粒DNA复制为自主复制
    • B、质粒DNA复制为非自主复制
    • C、具有相容性
    • D、细菌内结构相似质粒相对稳定
    • E、质粒DNA不能复制

    正确答案:A

  • 第9题：

    判断题
    质粒是细胞染色体外的环状DNA。（）
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 对
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    用碱法分离质粒 DNA时，染色体 DNA之所以可以被除去，是因为：（）。
    A

    染色体 DNA断成了碎片

    B

    染色体 DNA分子量大，而不能释放

    C

    染色体变性后来不及复性

    D

    染色体未同蛋白质分开而沉淀


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    多选题
    质粒的结构特点有（）
    A

    以环状双链DNA分子存在

    B

    质粒DNA有超螺旋结构

    C

    以环状单链DNA分子存在

    D

    质粒DNA有半开环结构

    E

    以环状双链RNA分子存在

    F

    质粒DNA有线性结构

    G

    以线性双链DNA分子存在


    正确答案： C,D,E,F
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确（　）
    A

    溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体

    B

    溶液Ⅱ的作用是使DNA变性

    C

    溶液Ⅲ的作用是使DNA复性

    D

    质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性

    E

    该方法简单，重复性好，在实验中经常使用


    正确答案： A
    解析： 碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。碱裂解法基本原理为：溶液I使细胞悬浮，EDTA与Ca“、Mg“螯合，抑制DNase活性；溶液Ⅱ裂解细菌、变性蛋白质和少量质粒；溶液Ⅲ使大部分蛋白质与细菌基因组DNA共沉淀，质粒DNA复性。故此题答案选D。

  • 第13题：

    下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是

    A:质粒DNA复制为自主复制
    B:质粒DNA复制为非自主复制
    C:质粒是细菌生命活动不可缺少的物质
    D:细菌内结构相似的质粒都能稳定共存
    E:质粒DNA不能复制

    答案：A
    解析：

  • 第14题：

    下列DNA中，一般不用做克隆载体的是
    A.质粒DNA B.大肠杆菌DNA C.病毒DN

    A D.酵母人工染色体

    答案：B
    解析：

  • 第15题：

    质粒与病毒的主要区别是（）。

    • A、质粒DNA是环状的
    • B、质粒可以在大肠杆菌内繁殖
    • C、质粒DNA与蛋白质结合
    • D、病毒基因组能编码外壳蛋白

    正确答案:D

  • 第16题：

    质粒是细菌染色体上的一段DNA。


    正确答案:正确

  • 第17题：

    简述质粒DNA的分离提取方法。


    正确答案: （1）选择性抽提法，（2）碱性SDS法

  • 第18题：

    关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确？（）

    • A、溶液I的作用是悬浮菌体
    • B、溶液Ⅱ的作用是使DNA变性
    • C、溶液Ⅲ的作用是使DNA复性
    • D、质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性

    正确答案:D

  • 第19题：

    细菌质粒DNA是双链环状DNA。


    正确答案:正确

  • 第20题：

    单选题
    关于碱解法分离质粒 DNA，下面哪一种说法不正确？（）
    A

    溶液I的作用是悬浮菌体

    B

    溶液Ⅱ的作用是使 DNA变性

    C

    溶液Ⅲ的作用是使 DNA复性

    D

    质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    常采用质粒DNA小量提取的方法是（）
    A

    碱裂解法

    B

    SDS裂解法

    C

    煮沸裂解法

    D

    酚抽提法

    E

    牙签少量制备法


    正确答案： A
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    微量碱法分离纯化质粒DNA的原理及其主要步骤。

    正确答案： 原理及其主要步骤：
    ①质粒DNA与染色体线性DNA在拓扑学上的差异：质粒DNA（cccDNA）是共价闭合双链超盘旋构型的小分子DNA，而细胞染色体DNA在细胞裂解分离过程中断裂成线性DNA（LDNA），虽然在化学本质上没有本质区别，但在高级结构拓扑学上存在差异。
    ②差异碱变性：在pH12.0-12.5高pH条件下，线性的DNA容易变性解链，而质粒DNA不易变性或很少变性。
    ③酸复性：在pH4.8条件下，cccDNA很快复性，而线性的染色体DNA不可逆的变性并与蛋白质、RNA形成沉淀物，通过离心可以把LDNA与cccDNA分开。cccDNA在上清液中。
    ④酒精沉淀cccDNA：以2.5倍的95%酒精沉淀质粒DNA，（浓度为66%沉淀最好）。保存在TE（pH8.0）缓冲液中，放置在-20℃下保存备用。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是（）
    A

    质粒DNA复制为自主复制

    B

    质粒DNA复制为非自主复制

    C

    具有相容性

    D

    细菌内结构相似质粒相对稳定

    E

    质粒DNA不能复制


    正确答案： B
    解析： 质粒是细菌拟核裸露DNA外的遗传物质,为环形闭合的双股DNA,存在于细胞质中,质粒编码非细菌生命所必须的某些生物学性状,如性菌毛、细菌素、毒素和耐药性等.质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性,与细菌的遗传变异有关.在DNA重组中,质粒或经过改造后的质粒载体可通过连接外源基因构成重组体.从宿主细胞中提取质粒DNA,是DNA重组技术中最基础的实验技能.有标记基因和多个限制酶切位点.

  • 第24题：

    问答题
    碱裂解法制备质粒DNA的方法有哪些？

    正确答案： （1）接种菌落于含抗生素的LB中，37℃剧烈振荡反应；
    （2）培养液4℃12000rpm30min离心；
    （3）重悬细菌于100μl冰预冷的溶液I（50mM葡萄糖25mMTris-HCL（pH8.0），10mMEDTAPh8.0）中剧烈振荡；（4）加200μl亲配制液溶液II（0.2MNaOH1%SDS），混合内容物，不要振荡，置冰上；
    （5）加150μl冰预冷溶液III（5MKac60ml，冰乙酸11.5ml，水28.5ml），温和振荡10s置于阔步3-5min；
    （6）40℃。12000rpm离心5min，转移上清；
    （7）上清加等量酚；氯仿抽提，4℃，12000rpm离心2min，收集上清；
    （8）加入2倍体积乙醇，振荡混合，室温放置2min；
    （9）4℃，12000rpm，离心5min，弃上清；
    （10）倒置离心管，倾干液体；
    （11）1ml70%乙醇4℃洗涤沉淀，弃上清，空气中干燥10min；
    （12）用500μl含无DNA酶的胰RNA酶（20μg/ml）的TE重新溶解核酸，振荡，贮于-20℃。
    解析： 暂无解析

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