PCR的主要步骤不包括()A.设计一对特异性引物B.95℃使模板DNA变性C.降温到合适的温度时使模板DNA与引物杂交D.DNA聚合酶在dNTP存在时，进行延伸E.加热使DNA聚合酶失活
题目
PCR的主要步骤不包括()
A.设计一对特异性引物
B.95℃使模板DNA变性
C.降温到合适的温度时使模板DNA与引物杂交
D.DNA聚合酶在dNTP存在时，进行延伸
E.加热使DNA聚合酶失活
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参考答案和解析
正确答案：E
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第1题：
简述PCR的主要步骤及其影响因素。
P.CR是一种体外酶促扩增特异DNA片段的技术，其原理类似DNA的体内扩增。它包括：PCR包括三个基本过程：①变性（denaturation），即在较高温度（93℃～98℃）使双链模板DNA变性解链成单链DNA，以提供复制的模板； ②退火（annealing），即在较低温度（37℃～65℃）使加入的引物与待扩增DNA区域特异性地结合，以提供DNA复制起始的3′―OH； ③延伸（extension），即在适当的温度（70℃～75℃）下，DNA聚合酶从特异性结合到DNA模板上的引物3′-OH端开始，根据碱基互补配对原则，按照待扩增区域的核苷酸序列，进行DNA链的延伸，即合成新的DNA分子。这三个过程组成一个循环周期；每个周期合成的产物又可作为下一个周期的模板，如此循环往复，经过n轮循环后，靶DNA的拷贝数理论上呈2n增长。 影响PCR反应的因素主要有：引物、TaqDNA聚合酶、dNTP、模板和Mg2+离子，此外，pH、温度、循环次数也会影响PCR反应。 -
第2题：
【填空题】PCR的基本反应步骤包括 、 、 3个步骤。
变性退火延伸 -
第3题：
2、PCR过程的步骤不包括以下哪项（）？
A．变性
B．转录
C．退火
D．延伸
转录 -
第4题：
PCR反应技术全过程由 、 三个步骤组成
B -
第5题：
简述 PCR技术的操作步骤。
标准的PCR过程分为三步： D.NA变性：（90℃-96℃）双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA 退火：（25℃-65℃）系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 延伸：（70℃-75℃）在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端→5′端延伸，合成与模板互补的DNA链。