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  • 第1题:

    下述关于DNA特性错误的是()

    A、双链解离为单链的过程为DNA变性

    B、DNA变性时维系碱基配对的氢键断裂

    C、DNA变性时具有增色效应

    D、Tm值是核酸分子内双链解开30%的温度

    E、DNA复性过程中具有DNA分子杂交特性


    【正确答案】D
    【答案解析】 Tm值是核酸分子内双链解开50%的温度。

  • 第2题:

    DNA复性过程可发生

    A.碱基堆积力的形成

    B.磷酸二酯键的形成

    C.糖苷键的形成

    D.酯键的形成


    正确答案:A
    解析:DNA变性是指在某些理化因素作用下,DNA双链的互补碱基对之间的氢键断裂,使DNA双螺旋结构松散,成为单链的现象。变性的DNA在适当条件下,两条互补链可重新配对,恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。本题内容教科书上没有讲到,但只要真正理解本题的要求,也不难作答。本题解题的关键,就是理解“复性是变性的可逆反应”。变性时,是DNA双链→单链,复性时,DNA单链→双链。核酸是由多个核苷酸以3',5'-磷酸二酯键结合而成,而核苷酸由核苷和磷酸以酯键结合而成,核苷由核糖和碱基以糖苷键结合而成,因此3',5'-磷酸二酯键、酯键和糖苷键都是组成DNA一级结构的化学键。而变性和复性都不涉及DNA一级结构的改变。因此,复性时,不会重新生成这些化学键。碱基堆积力是DNA双螺旋结构(二级结构)纵向结构的维系力,因此在DNA变性和复性过程中都会发生改变。

  • 第3题:

    有关核酸的变性与复性的叙述正确的是( )

    A.热变性后相同的两条单链DNA经缓慢冷却后可复性
    B.不同的DNA分子变性后,在合适温度下都可复性
    C.热变性的DNA迅速降温过程也称作退火
    D.复性的最佳温度为25℃

    答案:C
    解析:

  • 第4题:

    关于DNA复性的叙述,下列哪项是正确的?
    A.将加热后的DNA迅速冷却,有利于DNA复性 B. DNA复性的最佳温度是25。C
    c.复性时DNA双链的互补碱基对之间可形成氢键 D.复性时杂化双链只能在DNA与DNA之间形成


    答案:C
    解析:
    在适当条件下,变性DNA的两条互补链可重新配对,恢复天然双螺旋构象的现象称复性。只有 在温度缓慢下降的条件下才可使其重新配对复性。若将加热后的DNA迅速冷却,几乎不能发生复性。一般认为复性的最佳条件是比Tm低25。C的温度。复性时,只要溶液中两种单链分子之间存在一定程度 的碱基配对,就可在不同分子之间形成杂化双链,这种杂化双链可发生在DNA与DNA之间,也可发生在 DNA与RNA之间0。

  • 第5题:

    使变性DNA复性的条件包括( )。

    A.DNA浓度高时易复性
    B.DNA不均一时易复性
    C.温度要逐渐冷下来
    D.DNA溶液中盐浓度高时不易复性

    答案:A,C
    解析:

  • 第6题:

    PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:()

    • A、变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
    • B、复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
    • C、延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
    • D、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

    正确答案:C

  • 第7题:

    哪些条件可促使DNA复性(退火)?


    正确答案: 降低温度、pH和增加盐浓度。

  • 第8题:

    DNA双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,DNA分子成为单链,这一过程称()。

    • A、变性
    • B、复性
    • C、复杂性
    • D、杂交
    • E、探针

    正确答案:A

  • 第9题:

    DNA的变性和复性


    正确答案:核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链转变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变的过程称为变性;变性的 DNA 在适当条件下,分开的链重新缔合,恢复双螺旋结构的过程称为复性。

  • 第10题:

    问答题
    述下列因素如何影响DNA的复性过程:(1)阳离子的存在;(2)低于Tm的温度;(2)高浓度的DNA链。

    正确答案: (1)阳离子的存在可中和DNA中带负电荷的磷酸基团,减弱DNA链间的静电作用,促进DNA的复性;
    (2)低于Tm的温度可以促进DNA复性;
    (3)DNA链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度、机会,从而促进DNA复性。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    问答题
    试述包含体复性的基本过程,复性过程错误发生的主要原因是什么?举例分析主要的复性方法的优缺点,为什么LC复性是最好的?

    正确答案: 包含体复性的基本过程:
    ①分离包含体:第一步是对培养收集的细胞进行破碎,比较有效的方法是高压匀浆结合溶菌酶处理,然后5000~20000g离心,可使大部分包涵体沉淀,与可溶性蛋白分离。
    ②洗涤:包涵体沉淀需用去污剂(TritonX-100或脱氧胆酸钠)和低浓度变性剂(2mol/L尿素或盐酸胍等)洗涤除去脂类和膜蛋白,这一步很重要,否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解。
    ③溶解:包涵体的溶解必须用很强的变性剂,通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。去污剂可以破坏蛋白内的疏水键,可以增溶几乎所有的蛋白,但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中;酸可以破坏蛋白的次级键从而增溶蛋白,这种方法只适合少数蛋白质。对于含有半胱氨酸的蛋白,在增溶时应加入还原剂打开蛋白质中所有二硫键,对于没有二硫键的目标蛋白有时也应使用还原剂,因为含二硫键的杂蛋白会影响包涵体的溶解,同时还应加入金属螯合剂用来螯合Cu2+、Fe3+等金属离子以防止其与还原状态的巯基发生氧化反应。
    复性过程错误发生的主要原因是:在去除变性剂的同时,重组蛋白质在体外折叠,分子间存在大量错误折叠和聚合,复性效率往往很低,包涵体蛋白折叠复性的效率实际上取决于正确折叠过程与聚集过程之间的竞争。
    复性方法的优点:透析、稀释和超滤复性法,这三种方法是最传统也是应用最普遍的蛋白质折叠复性方法,使变性剂浓度降低到蛋白质能恢复折叠的浓度。
    复性方法的缺点:复性活性回收率低,而且难于与杂蛋白分离。稀释法大大增加溶液体积,不利于后续的分离纯化;透析法耗时长,易形成无活性蛋白质聚集体;超滤法在膜上聚集变性,易造成膜污染;稀释法处理量太大,不利于工业放大。
    LC复性是最好的原因:与传统的稀释法和透析法相比,液相色谱复性的优点是:
    ①在进样后可很快的除去变性剂;
    ②色谱固定相对变性蛋白质的吸附可明显的减少、甚至完全消除变性蛋白质分子在
    脱离变性剂环境后的分子聚集,从而避免了沉淀的产生,提高蛋白质复性的质量和活性回收率;
    ③在蛋白质复性的同时,可使目标蛋白质与杂蛋白分离达到纯化的目的,使复性和纯化同时进行;
    ④便于回收变性剂,降低废水处理成本。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    问答题
    RNA与基因组 DNA复性已被广泛用于检测不同类 DNA的转录。DNA驱动的复性实验与RNA驱动的复性实验有何不同?

    正确答案: 在过量DNA杂交(DNA驱动杂交)实验中,基因组 DNA的复性过程中加入少量的放射性标记 RNA。因为 DNA的量大大超过 RNA,所以全部 RNA能够与 DNA杂交。同样道理,RNA驱动的杂交反应中 RNA过量而 DNA的量受到限制,所以所有的互补 DNA链都能与 RNA杂交。
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    加热或紫外线照射下,可导致两条DNA链之间的氢链断裂,而核酸分子中所有的共价键则不受影响,称为

    A.DNA变性

    B.DNA复性

    C.DNA杂交

    D.DNA重组


    正确答案:A
    解析:在物理或化学因素的作用下,例如加热、酸碱或紫外线照射下,可导致两条DNA链之间的氢链断裂,而核酸分子中所有的共价键则不受影响,称为DNA变性。

  • 第14题:

    DNA退火的含意是

    A、热变性的DNA维持原温度即可复性

    B、热变性的DNA在降温过程中可复性

    C、热变性的DNA经加热处理后即可复性

    D、热变性的DNA经酸处理后即可复性

    E、热变性的DNA经酶切后即可复性


    参考答案:B

  • 第15题:

    不需要DNA连接酶参与的过程是

    A.DNA复制
    B.切除修复
    C.DNA重组
    D.DNA复性

    答案:D
    解析:

  • 第16题:

    有关核酸的变性与复性的正确叙述为

    A.热变性后序列互补的DNA分子经缓慢冷却后可复性
    B.热变性后的DNA复性的最适pH为9. 5
    C.热变性后的DNA迅速降温过程也称作退火
    D.热变性后的DNA复性的最佳温度为25°C

    答案:A
    解析:

  • 第17题:

    DNA变性与复性


    正确答案:当DNA溶液温度接近沸点或者pH较高时,互补的两条链就可能分开,称为DNA的变性:但DNA双链的这种变性过程是可逆的,当变性DNA的溶液缓慢降温时,DNA的互补链又可重新聚合,重新形成规则的双螺旋。

  • 第18题:

    DNA复性


    正确答案: 当温度减低后,变性的DNA分子有重新恢复双螺旋结构的过程

  • 第19题:

    试述包含体复性的基本过程,复性过程错误发生的主要原因是什么?举例分析主要的复性方法的优缺点,为什么LC复性是最好的?


    正确答案: 包含体复性的基本过程:
    ①分离包含体:第一步是对培养收集的细胞进行破碎,比较有效的方法是高压匀浆结合溶菌酶处理,然后5000~20000g离心,可使大部分包涵体沉淀,与可溶性蛋白分离。
    ②洗涤:包涵体沉淀需用去污剂(TritonX-100或脱氧胆酸钠)和低浓度变性剂(2mol/L尿素或盐酸胍等)洗涤除去脂类和膜蛋白,这一步很重要,否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解。
    ③溶解:包涵体的溶解必须用很强的变性剂,通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。去污剂可以破坏蛋白内的疏水键,可以增溶几乎所有的蛋白,但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中;酸可以破坏蛋白的次级键从而增溶蛋白,这种方法只适合少数蛋白质。对于含有半胱氨酸的蛋白,在增溶时应加入还原剂打开蛋白质中所有二硫键,对于没有二硫键的目标蛋白有时也应使用还原剂,因为含二硫键的杂蛋白会影响包涵体的溶解,同时还应加入金属螯合剂用来螯合Cu2+、Fe3+等金属离子以防止其与还原状态的巯基发生氧化反应。
    复性过程错误发生的主要原因是:在去除变性剂的同时,重组蛋白质在体外折叠,分子间存在大量错误折叠和聚合,复性效率往往很低,包涵体蛋白折叠复性的效率实际上取决于正确折叠过程与聚集过程之间的竞争。
    复性方法的优点:透析、稀释和超滤复性法,这三种方法是最传统也是应用最普遍的蛋白质折叠复性方法,使变性剂浓度降低到蛋白质能恢复折叠的浓度。
    复性方法的缺点:复性活性回收率低,而且难于与杂蛋白分离。稀释法大大增加溶液体积,不利于后续的分离纯化;透析法耗时长,易形成无活性蛋白质聚集体;超滤法在膜上聚集变性,易造成膜污染;稀释法处理量太大,不利于工业放大。
    LC复性是最好的原因:与传统的稀释法和透析法相比,液相色谱复性的优点是:
    ①在进样后可很快的除去变性剂;
    ②色谱固定相对变性蛋白质的吸附可明显的减少、甚至完全消除变性蛋白质分子在
    脱离变性剂环境后的分子聚集,从而避免了沉淀的产生,提高蛋白质复性的质量和活性回收率;
    ③在蛋白质复性的同时,可使目标蛋白质与杂蛋白分离达到纯化的目的,使复性和纯化同时进行;
    ④便于回收变性剂,降低废水处理成本。

  • 第20题:

    简述下列因素如何影响DNA的复性过程: (1)阳离子的存在;(2)低于Tm的温度;(2)高浓度的DNA链。


    正确答案:(1)阳离子的存在可中和DNA中带负电荷的磷酸基团,减弱DNA链间的静电作用,促进DNA的复性;
    (2)低于Tm的温度可以促进DNA复性;
    (3)DNA链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度、机会,从而促进DNA复性。

  • 第21题:

    单选题
    DNA双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,DNA分子成为单链,这一过程称()。
    A

    变性

    B

    复性

    C

    复杂性

    D

    杂交

    E

    探针


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    有关核酸的变性与复性的说法正确的是(  )。
    A

    热变性后相同的DNA经缓慢降温冷却后可以复性

    B

    热变性的DNA迅速降温的过程称为退火

    C

    所有DNA分子变性后,在合适的温度下都可以复性

    D

    热变性的DNA迅速冷却后即可再结合为双链

    E

    复性的最佳温度时64℃


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    哪些条件可促使DNA复性(退火)?

    正确答案: 降低温度、pH和增加盐浓度。
    解析: 暂无解析