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  • 第1题:

    用于分析蛋白质-蛋白质相互作用的技术是
    A.蛋白质印迹分析 B.酵母双杂交技术 C.电泳迁移率变动测定 D.基因剔除技术


    答案:B
    解析:

  • 第2题:

    成人蛋白质推荐摄入量的确定方法为

    A.尿中肌酐测定
    B.缺乏恢复试验
    C.血中蛋白质含量测定
    D.负荷试验
    E.氮平衡试验

    答案:E
    解析:

  • 第3题:

    成人蛋白质推荐摄入量的确定方法为()

    • A、缺乏恢复试验
    • B、氮平衡试验
    • C、尿中肌酐测定
    • D、血中蛋白质含量测定
    • E、负荷试验

    正确答案:B

  • 第4题:

    简述DNA-蛋白质亲和层析法的基本原理。


    正确答案:该法的基本原理是根据序列特异性DNA结合蛋白与其特异的DNA结合序列的可逆性结合作用,以特异DNA序列作为配体,用层析方法将蛋白质分离纯化。

  • 第5题:

    请列举预测蛋白质相互作用的方法。


    正确答案: 1、酵母双杂交法:主要原理是将可能存在相互作用的蛋白之一与Gal4的DB结构域融合。另外一个与Gal4的AD结构域的酸性区域融合。如果在两个待测蛋白之间存在相互作用,那么分别位于这两个融合蛋白上的DB和AD就能重新形成有活性的转录激活因子,从而激活相应基因的转录与表达。通过对报道基因表达产物的检测,反过来可判别作为“诱饵”和“猎物”的两个蛋白质之间是否存在相互作用。
    2、免疫共沉淀法:免疫共沉淀是一种比较经典的蛋白质相互作用方法,其实验比较简单。裂解细胞后,加入抗体,抗原被沉淀下来后洗涤,去除非特异性亲和再分析结合复合体。目前常使用Pull-down实验结合免疫共沉淀可以对可能的蛋白质相互作用进行验证。
    3、高通量质谱蛋白质鉴定:使用一分子标签如FLAG标记把蛋白,使融合蛋白在细胞内过表达。通过免疫亲和(FLAG抗体)捕获到抽提物中把蛋白形成的蛋白质复合物。SDS-PAGE分离复合体各组分,胰酶酶切后,进行质谱分析。此法适合于分析天然状态下细胞内浓度较低的蛋白质,但是如果蛋白质浓度过高则背景较强,产生假阳性。
    4、串联亲和纯化(tandem affinity purification,TAP):该技术核心是设计一个双重分子标签,包括A蛋白(IgGbindingprotein)、TEV蛋白酶切位点、钙调素结合蛋白。将TAP标签构建到靶蛋白上,然后在宿主细胞内表达融合蛋白,表达水平接近把蛋白的天然状态。可以与把蛋白相互作用的其他蛋白质结合到融合蛋白上,形成复合体。细胞裂解物和IgG基质温浴在一起,通过A蛋白复合物结合在IgG上。冲洗后,加入TEV蛋白酶,洗脱复合物。在Ca2+存在的情况下,洗脱液与包被钙调素的温育在一起,复合物就结合在珠子上。进一步洗去杂质后,加入EGTA鳌合,复合物脱落。SDS-PAGE分离复合体各组分,胰酶切割后进行质谱分析。该方法检测到的蛋白质相互作用更加接近自然条件下蛋白质的性质,包括浓度,定位和翻译后修饰。适合于
    检测大量蛋白质之间的相互作用而形成的复合物,而不局限在两个蛋白质之间相互作用。但是不能检测蛋白质复合物形成的顺序。需要与酵母双杂交等方法互补。

  • 第6题:

    研究蛋白质相互作用可以采用()、()、()等方法。


    正确答案:酵母双杂交;免疫共沉淀;噬菌体显示

  • 第7题:

    原核生物和真核生物启动子的共同特点是()。

    • A、需要反式作用因子辅助作用
    • B、本身不被转录
    • C、与RNA聚合酶I、II、III相结合
    • D、转录起始位点由RNA聚合酶的ζ因子辨认
    • E、涉及DNA-蛋白质的相互作用

    正确答案:E

  • 第8题:

    单选题
    制定蛋白质RDA时常用的试验方法为(  )。
    A

    负荷试验

    B

    氮平衡试验

    C

    尿中肌酐测定

    D

    血中蛋白质含量测定

    E

    缺乏恢复试验


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    单选题
    关于转录调节因子叙述错误的是()
    A

    所有转录因子结构均含有DNA结合域及转录激活域

    B

    有些转录因子可能含有DNA结合域或转录激活域

    C

    通过DNA-蛋白质或蛋白质-蛋白质相互作用发挥作用

    D

    大多数转录因子的调节作用属反式调节


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    单选题
    用于研究蛋白质相互作用的经典方法是()
    A

    免疫层析试验

    B

    酶联免疫斑点试验

    C

    免疫印迹法

    D

    放射免疫沉淀试验

    E

    斑点酶免疫吸附试验


    正确答案: A
    解析: 放射免疫沉淀试验(RIPA)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法,同时弥补了免疫印迹法的不足。

  • 第11题:

    单选题
    成人蛋白质推荐摄入量的确定方法为()
    A

    缺乏恢复试验

    B

    氮平衡试验

    C

    尿中肌酐测定

    D

    血中蛋白质含量测定

    E

    负荷试验


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    填空题
    蛋白质相互作用的研究方法较多,常用的有:______________________、____________________和__________________。

    正确答案: 亲和层析亲和印迹,免疫沉淀,交联
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    反式作用因子是指
    A.通过DNA-蛋白质相互作用激活另一基因转录的某一基因编码的蛋白质
    B.通过DNA-蛋白质相互作用激活任意基因转录的某一基因编码的蛋白质
    C.可结合启动序列临近的DNA序列
    D.具有转录调节功能的蛋白质因子


    答案:A
    解析:
    反式作用因子是真核基因调节蛋白,也称反式作用蛋白,是指通过DNA-蛋白质相互作用激活另 一基因转录的某一基因编码的蛋白质。

  • 第14题:

    电离辐射引起DNA交联的形式有()。

    • A、DNA-蛋白质交联
    • B、DNA-核糖体交联
    • C、DNA-DNA链间交联
    • D、DNA链内交联
    • E、DNA-RNA交联

    正确答案:A,C,D

  • 第15题:

    关于特异转录因子的说法,正确的是()。

    • A、调控管家基因的表达
    • B、仅通过蛋白质-蛋白质相互作用进行调控
    • C、仅通过DNA-蛋白质相互作用进行调控
    • D、仅通过RNA-蛋白质相互作用进行调控
    • E、起转录激活或者转录抑制作用

    正确答案:E

  • 第16题:

    下列关于基因增强子的叙述错误的是()

    • A、删除增强子通常导致RNA合成的速度降低
    • B、增强子与DNA-结合蛋白相互作用
    • C、增强子增加mRNA翻译成蛋白质的速度
    • D、在病毒的基因组中有时能够发现增强子

    正确答案:C

  • 第17题:

    简述2-3种检测蛋白质间相互作用的方法。


    正确答案: (1)酵母双杂交系统:是利用杂交基因通过激活报告基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。真核生物转录因子具有DNA结合结构域(BD)和转录激活结构域(AD),这两个结构域分开时仍分别具有功能,但不能激活转录,只有它们以适当途径在空间上较为接近时,才能重新具有转录因子活性,并激活报告基因表达。
    (2)免疫共沉淀(IP):基本原理是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀,从而保留下来,其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单,裂解细胞后,加入抗体,抗原被沉淀下来后洗涤,去除非特异性结合,再分析复合体。抗体可以是单克隆,也可以是多克隆。
    (3)蛋白质芯片:蛋白质芯片可以用来大规模筛选蛋白质之间的相互作用,将一个蛋白质芯片与荧光标记的探针蛋白孵育,洗脱非特异性结合的蛋白后,可以通过扫描芯片上的荧光点来检测稳定的相互作用蛋白点。

  • 第18题:

    关于转录调节因子叙述错误的是()

    • A、所有转录因子结构均含有DNA结合域及转录激活域
    • B、有些转录因子可能含有DNA结合域或转录激活域
    • C、通过DNA-蛋白质或蛋白质-蛋白质相互作用发挥作用
    • D、大多数转录因子的调节作用属反式调节

    正确答案:B

  • 第19题:

    填空题
    研究蛋白质相互作用可以采用()、()、()等方法。

    正确答案: 酵母双杂交,免疫共沉淀,噬菌体显示
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    单选题
    常用的不属于麦芽溶解度物理测定方法的是()。
    A

    沉浮试验

    B

    千粒重

    C

    脆度测定器试验

    D

    蛋白质溶解度


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    问答题
    简述2-3种检测蛋白质间相互作用的方法。

    正确答案: (1)酵母双杂交系统:是利用杂交基因通过激活报告基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。真核生物转录因子具有DNA结合结构域(BD)和转录激活结构域(AD),这两个结构域分开时仍分别具有功能,但不能激活转录,只有它们以适当途径在空间上较为接近时,才能重新具有转录因子活性,并激活报告基因表达。
    (2)免疫共沉淀(IP):基本原理是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀,从而保留下来,其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单,裂解细胞后,加入抗体,抗原被沉淀下来后洗涤,去除非特异性结合,再分析复合体。抗体可以是单克隆,也可以是多克隆。
    (3)蛋白质芯片:蛋白质芯片可以用来大规模筛选蛋白质之间的相互作用,将一个蛋白质芯片与荧光标记的探针蛋白孵育,洗脱非特异性结合的蛋白后,可以通过扫描芯片上的荧光点来检测稳定的相互作用蛋白点。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    关于转录调节因子叙述错误的是()
    A

    所有转录因子结构均含有DNA结合域和转录激活域

    B

    有些转录因子结构可能含有DNA结合域或转录激活域

    C

    转录因子调节作用是DNA依赖的或DNA非依赖的

    D

    通过DNA-蛋白质或蛋白质-蛋白质相互作用发挥作用

    E

    大多数转录因子的调节作用属反式调节


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    问答题
    简述DNA-蛋白质亲和层析法的基本原理。

    正确答案: 该法的基本原理是根据序列特异性DNA结合蛋白与其特异的DNA结合序列的可逆性结合作用,以特异DNA序列作为配体,用层析方法将蛋白质分离纯化。
    解析: 暂无解析