4、重组菌增加质粒拷贝数能提高质粒的稳定性;质粒拷贝数越高,出现无质粒子代菌的概率就越低,质粒就越稳定

题目

4、重组菌增加质粒拷贝数能提高质粒的稳定性;质粒拷贝数越高,出现无质粒子代菌的概率就越低,质粒就越稳定


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  • 第1题:

    基因工程菌在传代过程中经常出现质粒不稳定性的现象,质粒不稳定分为()和();基因工程菌的不稳定性至少维持()代以上。


    正确答案:分裂不稳定性;结构不稳定性;25

  • 第2题:

    为了提高基因工程菌的质粒稳定性,可采用哪些主要方法?


    正确答案:为了提高基因工程菌的质粒稳定性,可采取:
    (1)选择合适的宿主菌;
    (2)选择合适的载体;
    (3)选择压力;
    (4)分阶段控制培养;
    (5)控制培养条件;
    (6)固定化技术。

  • 第3题:

    质粒拷贝数是指一个细胞内质粒的数量与染色体数量之比。


    正确答案:正确

  • 第4题:

    简述提高质粒稳定性的方法。


    正确答案:两阶段培养法:一增加菌体、二诱导外源基因表达
    适当培养条件:温度、pH、培养基组分和溶解氧等

  • 第5题:

    大质粒与志贺菌侵袭性基因的大质粒高度同源的菌是()

    • A、ETEC
    • B、EIEC
    • C、EPEC
    • D、EHEC
    • E、EAggEC

    正确答案:B

  • 第6题:

    质粒的定义,什么叫质粒拷贝数?


    正确答案: 定义,存在于细胞质中的一类独立于染色体的自主复制的双链环状DNA分子。
    质粒拷贝数:生长在标准的培养基条件下,每个细菌细胞中所含有的质粒DNA分子的数目。

  • 第7题:

    问答题
    质粒不稳定常见的是分裂不稳定,试述提高质粒稳定性的方法。

    正确答案: 1、选择适当宿主,如重组质粒在大肠杆菌中比较稳定。
    2、培养基加入选择性压力如抗生素,抑制质粒丢失菌的生长。
    3、采用两阶段培养法。在培养的第一阶段以增加菌体的生长达到一定密度为目的,外源基因不表达,从而使工程菌与质粒丢失菌的比生长速率的差别减小,增加了质粒的稳定性;第二阶段再诱导外源基因的表达。
    4、控制培养条件如温度、培养基组分等,使工程菌体现出有优势的比生长速率。间歇供氧和改变稀释速率可以提高质粒的稳定性。
    5、在质粒构建时插入一段能改良宿主细胞生长速率的特殊DNA片段,能起到稳定质粒的效果。
    6、剔除质粒上不需要的DNA部分,选取不含可转移因子的质粒。
    7、固定化重组菌以提高工程菌的稳定性。
    解析: 暂无解析

  • 第8题:

    名词解释题
    高拷贝数质粒

    正确答案: 有些质粒在每个宿主细胞中有10-100个拷贝,称高拷贝数质粒。
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    单选题
    编码大肠埃希菌大肠菌素的质粒是()
    A

    R质粒

    B

    Col质粒

    C

    F质粒

    D

    K质粒

    E

    Vi质粒


    正确答案: A
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    R1 质粒拷贝数受到怎样的调节控制?

    正确答案: Rl质粒的repA基因编码一种蛋白质叫做RepA蛋白,这种蛋白是Rl质粒复制起始所必需的。repA基因能够从两个启动子转录。一个启动子叫做PcopB可以转录repA和copB基因,得到一种mRNA,可以翻译成RepA和CopB两种蛋白质。第二个启动子PrepA在copB基因内,因此只能转录一种仅合成RepA蛋白的RNA。由于PrepA启动子受到CopB蛋白的抑制,它只能在质粒进入细胞的开始阶段,在CopB蛋白合成之前打开。质粒进入细胞后从PrepA开始RepA蛋白的短暂合成引发了质粒DNA的复制起始直到达到它的拷贝数。然后,PrepA启动子被CopB蛋白抑制,repA基因只能从PcopB启动子开始转录。一旦质粒达到拷贝数,RepA的合成以及它参与的质粒复制受到一种叫做CopA的RNA的调节。copA基因是用它自身的启动子转录的,这种RNA产物影响着从PcopB 启动子转录的mRNA的稳定性。因为copA RNA是从repA编码基因翻译起始区的相同区段的另一条链转录而来的,所以这两个mRNA是互补的,并且能够配对形成双链RNA分子。核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ),是染色体基因编码的,只能切割双链RNA,将切割copA-repA mRNA结构。切割作用反过来会引起RepA的降解,不再合成RepA蛋白。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    单选题
    大质粒与志贺菌侵袭性基因的大质粒高度同源的菌是()
    A

    ETEC

    B

    EIEC

    C

    EPEC

    D

    EHEC

    E

    EAggEC


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    大型质粒具有下列何种特征()。
    A

    质粒长1.5-15kb

    B

    无整合作用

    C

    少数为接合型

    D

    质粒长60-120kb

    E

    低拷贝数质粒


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    松弛型质粒的特点是()。

    • A、自主复制,拷贝数多
    • B、自主复制,拷贝数少
    • C、非自主复制,拷贝数多
    • D、非自主复制,拷贝数少

    正确答案:A

  • 第14题:

    高拷贝数质粒


    正确答案:有些质粒在每个宿主细胞中有10-100个拷贝,称高拷贝数质粒。

  • 第15题:

    基因工程菌中重组质粒的丢失机制是()

    • A、重组质粒渗透至细胞外
    • B、重组质粒被细胞内核酸酶降解
    • C、重组质粒在细胞分裂时不均匀分配
    • D、重组质粒杀死受体细胞
    • E、重组质粒刺激受体细胞提高其通透性

    正确答案:C

  • 第16题:

    大型质粒具有下列何种特征()。

    • A、质粒长1.5-15kb
    • B、无整合作用
    • C、少数为接合型
    • D、质粒长60-120kb
    • E、低拷贝数质粒

    正确答案:C

  • 第17题:

    低拷贝数质粒


    正确答案:一些质粒在每个细胞中有1-4个拷贝,称低拷贝数质粒。

  • 第18题:

    质粒不稳定常见的是分裂不稳定,试述提高质粒稳定性的方法。


    正确答案: 1、选择适当宿主,如重组质粒在大肠杆菌中比较稳定。
    2、培养基加入选择性压力如抗生素,抑制质粒丢失菌的生长。
    3、采用两阶段培养法。在培养的第一阶段以增加菌体的生长达到一定密度为目的,外源基因不表达,从而使工程菌与质粒丢失菌的比生长速率的差别减小,增加了质粒的稳定性;第二阶段再诱导外源基因的表达。
    4、控制培养条件如温度、培养基组分等,使工程菌体现出有优势的比生长速率。间歇供氧和改变稀释速率可以提高质粒的稳定性。
    5、在质粒构建时插入一段能改良宿主细胞生长速率的特殊DNA片段,能起到稳定质粒的效果。
    6、剔除质粒上不需要的DNA部分,选取不含可转移因子的质粒。
    7、固定化重组菌以提高工程菌的稳定性。

  • 第19题:

    名词解释题
    低拷贝数质粒

    正确答案: 一些质粒在每个细胞中有1-4个拷贝,称低拷贝数质粒。
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    填空题
    质粒拷贝数是指细胞中()。

    正确答案: 质粒的份数同染色体的比值,即质粒/染色体
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    单选题
    pBR322是()
    A

    经人工改造的大肠埃希菌质粒

    B

    天然的酵母质粒

    C

    天然的大肠埃希菌质粒

    D

    经人工改造的噬菌体

    E

    经人工改造的酵母质粒


    正确答案: D
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    问答题
    ColEl 衍生质粒拷贝数调节的机理是什么?

    正确答案: 这类质粒的复制主要是通过一种由质粒编码的小分子的RNA,称为RNA I的分子来调节。这种小分子的RNA主要是通过干扰另一种称为RNAⅡ的加工来抑制DNA的复制。质粒DNA复制的引物是由RNAⅡ提供,在复制起始区,RNAⅡ同DNA形成一种RNA-DNA杂种分子,RNAⅡ被RNA内切核酸酶RNase H切除,在3’端形成一个羟基作为DNA聚合酶I催化的复制起始引物。RNAⅡ必需被正确地加工,否则不能作为复制起始的引物。RNA I和RNAⅡ是互补的,它们是由DNA双链的同一区域互补链合成的。正因为互补,这两种RNA就可以配对形成双链的RNA螺旋,这种双链的RNA干扰了RNAⅡ的加工,干扰了复制。用这种机制能够解释ColEl质粒是如何维持它的拷贝数的。因为RNA I是由质粒DNA合成的,当质粒的浓度增高时,同时合成了较多的RNA I。高浓度的RNA I干扰了大多数RNAⅡ的加工,复制受到抑制。当质粒的拷贝数达到每细胞16个时,这种复制的抑制作用几乎是完全的。除了RNA I外,质粒编码的一种蛋白质,叫作Rop蛋白,协助维持拷贝数。这种蛋白形成一个二聚体,可以增强RNA I和RNAⅡ的配对。所以在RNA I的浓度相对低时引物的加工也受到抑制。ColEl质粒的复制的调节模式得到实验证明,这也是最早发现的反义RNA的调节作用。
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    判断题
    基因克隆中,低拷贝数的质粒载体是没有用的。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析