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  • 第1题:

    基因工程操作的基本步骤()

    A.目的基因的获得

    B.重组DNA的形成

    C.重组DNA导入受体细胞

    D.筛选含有目的基因的受体细胞


    答案:ABCD

  • 第2题:

    直接针对目的DNA进行筛选的方法是

    A.氨苄青霉素抗药性
    B.青霉素抗药性
    C.分子杂交
    D.分子筛

    答案:C
    解析:

  • 第3题:

    DNA损伤修复机制中,主要针对DNA单链断裂和小的碱基改变而进行修复的是()。

    • A、错配修复
    • B、直接修复
    • C、核苷酸切除修复
    • D、碱基切除修复
    • E、重组修复

    正确答案:D

  • 第4题:

    直接针对目的DNA进行筛选的方法是()

    • A、氨苄青霉素抗药性
    • B、青霉素抗药性
    • C、分子杂交
    • D、分子筛
    • E、电泳

    正确答案:C

  • 第5题:

    基因克隆主要分为以下几个步骤()。

    • A、制备目的基因和相关载体
    • B、将目的基因和有关载体进行连接
    • C、将重组的DNA导入受体细胞
    • D、DNA重组体的筛选和鉴定
    • E、DNA重组体的扩增和表达

    正确答案:A,B,C,D,E

  • 第6题:

    简述利用DNA修复能力突变株进行抗肿瘤药物的筛选原理。


    正确答案:生物--两个以上的DNA修复基因,一个DNA修复基因损伤或变异,仍能存活,但对能引起DNA损伤的化合物十分敏感,易发生死亡。

  • 第7题:

    DNA重组中用来筛选的方法有().

    • A、PCR法
    • B、平板筛选法
    • C、原位杂交技术
    • D、人工检验法

    正确答案:A,B,C

  • 第8题:

    多选题
    重组DNA技术包括()
    A

    制备目的基因DNA片段

    B

    将目的基因与载体相连

    C

    将重组DNA导入受体细胞

    D

    筛选和鉴定DNA重组体

    E

    去除载体


    正确答案: B,A
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    单选题
    直接针对目的DNA进行筛选的方法是()
    A

    氨苄青霉素抗药性

    B

    青霉素抗药性

    C

    分子杂交

    D

    分子筛

    E

    电泳


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    问答题
    概述筛选和鉴定DNA重组体的常用方法。

    正确答案: 在转基因操作以后,载体只能进入部分宿主细胞,即使含有载体的细胞,也并非都含有目的基因,有些宿主细胞可能含有自身连接成环的载体分子或非目的基因与载体形成的重组体。因此,须在不同层次不同水平上进行筛选和鉴定,以确定哪一菌落所含的重组DNA分子确实带有目的基因,这一过程为筛选。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况的不同,可采用:
    (1)直接选择法:针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因,直接测定该基因或基因表型的方法。a.抗药标志的筛选:载体具有某种抗生素的抗性基因,在转化后只有含载体的细菌才能在含该抗生素的培养平板上生长并形成单菌落,而未转化细胞则不能生长,这样即可将转化菌与非转化菌区别开来。b.插入失活法:将目的基因插入载体某一耐药基因内使该基因失活,可区分单纯载体或重组载体(含目的基因)的转化菌落。如pBR322含ampr、Tetr双抗药基因,若将目的基因插入载体的Tetr基因中,则含目的基因的转化细胞只能在含Amp的培养液中生长,而不能在含Tet的培养液中生长。c.标志补救:若克隆的基因能在宿主菌表达,且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补,那么就可以利用营养突变菌株进行筛选,这称为标志补救。如重组体为亮氨酸自养型(Leu+),将重组子导入亮氨酸异养型(Leu-)的宿主细胞后,在不含Leu的培养液中可生长,而不含重组体的细胞则不能生长。 -互补法筛选(见43题)也是一种标志补救选择方法。d.酶切图谱筛选:分别挑取独立的菌落,培养后快速提取重组体DNA,用重组时所采用的限制酶切割后,进行琼脂糖凝胶电泳,可以从DNA片段的大小和有无判断所选的菌落是否为阳性克隆。e.核酸杂交筛选:将转化子DNA或克隆的DNA分子片段转移至合适的膜上,利用标记探针进行杂交,直接选择并鉴定目的基因。f.原位杂交筛选:是将待选菌在平板上培养成菌落,按相应位置(原位)转移至合适的膜上,经变性使膜上的DNA成单链,再与标记的探针(与目的基因互补)杂交,找出平板上的菌落位置,即为重组的阳性菌落。
    (2)免疫学方法筛选:利用特异抗体与目的基因表达产物的特异相互作用进行筛选。这种方法不直接鉴定基因,属非直接筛选法。分为免疫化学方法及酶联免疫检测分析等。基本的工作原理是将琼脂培养板上的转化子菌落经氯仿蒸汽裂解、释放抗原,再将固定有抗血清的膜覆盖在裂解菌落上,在膜上得到抗原抗体复合物,最后用合适的方法检出阳性反应菌落。
    解析: 暂无解析

  • 第11题:

    判断题
    对于重组体的筛选工作来说,DNA测序属于直接筛选法。
    A

    B


    正确答案:
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    关于DNA克隆的叙述,不正确的是(  )。
    A

    目的基因的获取

    B

    外源基因和载体连接

    C

    将重组DNA导入受体菌

    D

    筛选出含有目的基因的转化菌

    E

    常用到DNA解链酶


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    直接针对目的DNA鉴定的方法是

    A.抗药性标志选择

    B.分子筛

    C.Western印迹杂交

    D.Northern印迹杂交

    E.分子杂交


    正确答案:E

  • 第14题:

    实地调研的目的是针对筛选出的企业想法深入市场真实了解市场机会和需求


    正确答案:正确

  • 第15题:

    重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()

    • A、标志补救筛选
    • B、插入表达筛选
    • C、抗性筛选
    • D、限制性内切酶酶切图谱分析
    • E、核酸分子杂交筛选

    正确答案:C

  • 第16题:

    重组DNA技术包括()

    • A、制备目的基因DNA片段
    • B、将目的基因与载体相连
    • C、将重组DNA导入受体细胞
    • D、筛选和鉴定DNA重组体
    • E、去除载体

    正确答案:A,B,C,D

  • 第17题:

    重组DNA的筛选与鉴定一般有哪四种方法?


    正确答案: ①平板筛选法。是指利用载体的遗传性标记在平板上直接筛选的方法。插入失活:当外源DNA序列插入质粒中某一抗药基因内,使该基因失活,转化细胞就不能生长在含相应抗生素的培养平板上.蓝-白筛选:利用蓝色化合物的形成作为指示剂,筛选带重组质粒的细菌。
    ②限制酶切图谱筛选。对载体上插入的外源DNA片段进行酶切图谱分析,并以此与目的基因的已知图谱对比,因此利用这种方法不仅能区分重组子与非重组子,而且还能鉴定目的重组子。
    ③PCR筛选重组体。抽取少量重组DNA→PCR扩增→电泳鉴定→序列分析
    ④原位杂交技术。1,获取DNA重组2,重组3,转化体4,筛选5,克隆6,表达7.表达产物分离纯化。

  • 第18题:

    概述筛选和鉴定DNA重组体的常用方法。


    正确答案:在转基因操作以后,载体只能进入部分宿主细胞,即使含有载体的细胞,也并非都含有目的基因,有些宿主细胞可能含有自身连接成环的载体分子或非目的基因与载体形成的重组体。因此,须在不同层次不同水平上进行筛选和鉴定,以确定哪一菌落所含的重组DNA分子确实带有目的基因,这一过程为筛选。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况的不同,可采用:
    (1)直接选择法:针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因,直接测定该基因或基因表型的方法。a.抗药标志的筛选:载体具有某种抗生素的抗性基因,在转化后只有含载体的细菌才能在含该抗生素的培养平板上生长并形成单菌落,而未转化细胞则不能生长,这样即可将转化菌与非转化菌区别开来。b.插入失活法:将目的基因插入载体某一耐药基因内使该基因失活,可区分单纯载体或重组载体(含目的基因)的转化菌落。如pBR322含ampr、Tetr双抗药基因,若将目的基因插入载体的Tetr基因中,则含目的基因的转化细胞只能在含Amp的培养液中生长,而不能在含Tet的培养液中生长。c.标志补救:若克隆的基因能在宿主菌表达,且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补,那么就可以利用营养突变菌株进行筛选,这称为标志补救。如重组体为亮氨酸自养型(Leu+),将重组子导入亮氨酸异养型(Leu-)的宿主细胞后,在不含Leu的培养液中可生长,而不含重组体的细胞则不能生长。 -互补法筛选(见43题)也是一种标志补救选择方法。d.酶切图谱筛选:分别挑取独立的菌落,培养后快速提取重组体DNA,用重组时所采用的限制酶切割后,进行琼脂糖凝胶电泳,可以从DNA片段的大小和有无判断所选的菌落是否为阳性克隆。e.核酸杂交筛选:将转化子DNA或克隆的DNA分子片段转移至合适的膜上,利用标记探针进行杂交,直接选择并鉴定目的基因。f.原位杂交筛选:是将待选菌在平板上培养成菌落,按相应位置(原位)转移至合适的膜上,经变性使膜上的DNA成单链,再与标记的探针(与目的基因互补)杂交,找出平板上的菌落位置,即为重组的阳性菌落。
    (2)免疫学方法筛选:利用特异抗体与目的基因表达产物的特异相互作用进行筛选。这种方法不直接鉴定基因,属非直接筛选法。分为免疫化学方法及酶联免疫检测分析等。基本的工作原理是将琼脂培养板上的转化子菌落经氯仿蒸汽裂解、释放抗原,再将固定有抗血清的膜覆盖在裂解菌落上,在膜上得到抗原抗体复合物,最后用合适的方法检出阳性反应菌落。

  • 第19题:

    多选题
    下列关于质粒DNA的叙述正确的是(  )。
    A

    是真核生物基因组DNA的组成部分

    B

    含有各种抗性筛选标记

    C

    具有独立复制功能,能在宿主细胞独立自主得进行复制

    D

    含有感兴趣的目的DNA


    正确答案: C,B
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    多选题
    DNA重组中用来筛选的方法有().
    A

    PCR法

    B

    平板筛选法

    C

    原位杂交技术

    D

    人工检验法


    正确答案: A,C
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    单选题
    重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()
    A

    标志补救筛选

    B

    插入表达筛选

    C

    抗性筛选

    D

    限制性内切酶酶切图谱分析

    E

    核酸分子杂交筛选


    正确答案: E
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    在已知序列的情况下获得某一目的DNA最常用的方法是(  )。
    A

    化学合成法

    B

    聚合酶链式反应

    C

    直接从组织中提取

    D

    从基因组文库中筛选

    E

    基因芯片


    正确答案: C
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    在已知部分序列的情况下,获得目的DNA最常用的方法是()
    A

    化学合成法

    B

    聚合酶链式反应

    C

    筛选cDNA文库

    D

    筛选基因组文库

    E

    DNA合成仪合成


    正确答案: D
    解析: 暂无解析