6、名词解释：（6）定量PCR标准曲线‍

第1题：

第2题：

第3题：

探针法荧光定量PCR的阈值线应该画在扩增曲线上的指数期且样品重复性最好的位置。（）

正确答案:正确

第4题：

解释PCR、DNA—PCR、RT—PCR、原位PCR和定量PCR？

正确答案:（1）PCR是聚合酶链反应（Polymerase chain reaction）的英文缩写，是近年来发展起来的一种在体外特异扩增某一目的DNA片段的技术。
（2）DNA—PCR：以DNA为模板，扩增特定核苷酸序列。主要用于检测特定基因或DNA片段的存在，并常与核酸分子杂交结合，分析检定基因突变。
（3）RT—PCR：用提取的mRNA或总RNA（含有mRNA）为模板，通过逆转录扩增cDNA。是检测特定基因表达水平的主要方法之一，也是用于鉴别、诊断RNA病毒的重要技术。
（4）原位PCR：与原位杂交一样，原位PCR也无需提取DNA/RNA，直接用组织切片和细胞进行PCR或RT—PCR。它既能鉴定含有靶DNA/RNA序列的细胞，又能确定靶DNA/RNA序列在细胞内或染色体上的位置。
（5）定量PCR：PCR产物经凝胶电泳分离转移膜上，与放射性核素或化学发光标记的核酸探针杂交。根据放射自显影或化学发光后底板爆光的强弱，用密度计扫描定量。此法在基因诊断中应用甚广。

第5题：

荧光定量PCR检测因为具有自动化程度高、易于标准化、产物闭管检测减少污染、定量报告检测结果等诸多优点，现在临床检验中应用越来越广泛，它与常规PCR相比在很多方面都有其特点。关于外标法荧光定量PCR错误的是（）

• A、为了定量准确，外标法标准曲线需要5个点以上，还需设阴性对照和阳性对照
• B、被检标本与标准品扩增效率之间的不一致会影响定量准确性
• C、是目前临床实验室应用最广泛的一种方法
• D、DNA标准品常是含有待测基因的一定浓度的质粒
• E、对于RNA病原体，标准品通常是一定浓度的RNA

正确答案:E

第6题：

解释原位PCR和定量PCR？

正确答案:1.原位PCR：与原位杂交一样，原位PCR也无需提取DNA/RNA，直接用组织切片和细胞进行PCR或RT-PCR。它既能鉴定含有靶DNA/RNA序列的细胞，又能确定靶DNA/RNA序列在细胞内或染色体上的位置。
2.定量PCR：PCR产物经凝胶电泳分离转移膜上，与放射性核素或化学发光标记的核酸探针杂交。根据放射自显影或化学发光后底板曝光的强弱，用密度计扫描定量。此法在基因诊断中应用甚广。

第7题：

火焰原子吸收光谱分析的定量方法有（）。 1、标准曲线法 2、内标法 3、标准加入法 4、公式法 5、归一化法 6、保留指数法

• A、1、3
• B、2、3、4
• C、3、4、5

正确答案:A

第8题：

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

在荧光定量PCR中，对结果的判定的主要依据是______曲线。（）

• A、标准
• B、一步
• C、扩增
• D、溶解

正确答案:C

第15题：

在实时荧光定量PCR中，参比荧光染料常用于报告基团染料荧光信号的标准化，以及非PCR相关的荧光波动的校正。（）

正确答案:正确

第16题：

何谓荧光实时定量PCR（RQ-PCR）技术？

正确答案: 荧光实时定量PCR（real-timequantitativePCR，RQ-PCR）技术即在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针，荧光信号的变化真实的反映了体系中模板的增加，通过检测荧光信号，从而实时监测整个PCR反应过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。

第17题：

实时荧光定量PCR检测HCV-RNA，室间质评的5个样本定量结果均低于靶值。如果以上因素均已排除，首要考虑的因素是（）

• A、标准曲线的制定
• B、温度
• C、标志物的活性
• D、加样枪的校准
• E、离心机的校准

正确答案:A

第18题：

火焰原子吸收光谱分析的定量方法有（）。（其中：1.标准曲线法；2.内标法；3.标准加入法；4.公式法；5.归一化法；6.保留指数法）

• A、1、2、3
• B、2、3、4
• C、3、4、5
• D、4、5、6

正确答案:A

第19题：

第20题：

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：