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第1题：
简述2-DE（双向凝胶电泳）的基本步骤。
正确答案: （1）样品制备，包括蛋白质的溶解、变性、还原以及去除蛋白质杂质等。
（2）固相pH值梯度胶（IPG）胶的制备，利用不同pH固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶。
（3）双向电泳，先作第一向电泳，再进行第二向电泳。
（4）蛋白质的染色，主要根据上样量的多少及样品进一步分析要求等加以选择，常用的方法有考马斯亮蓝染色、银染、铜染等。 -
第2题：
试述双向作用筒式减振器工作原理。
正确答案:1）压缩行程（即车轮靠近车架，减振器压缩）
活塞下移使其下方腔室容积减小，油压升高，此时，油液经过流通阀进入活塞上方腔室。由于活塞杆占去上方腔室一部分容积，故上腔增加的容积小于下腔室减小的容积，致使下室油液不能全部流入上室，而多余的油液则压开支承座上的压缩阀进入贮油缸筒。这些阀的节流作用即造成对悬架伸张运动的阻尼力。
2）伸张行程（即车轮离开车架，减振器拉长）
活塞上移使其上方腔室容积，油压升高，伸张阀打开，油液从上室流入下室，此时流通阀关闭，上腔内的油液便推开伸张阀流入下腔。同样由于活塞杆的存在，自上腔流来的油液还不足以充满下腔所增加的容积，下腔内产生一定的真空度，这时储油缸中的油液便推开补偿阀流入下腔进行补充。此时，这些阀的节流作用即造成对悬架伸张运动的阻尼力。 -
第3题：
以下属于蛋白质组表达模式研究的支撑技术是（）。
- A、双向凝胶电泳
- B、质谱技术
- C、酵母双杂交
- D、生物信息学
- E、噬菌体显示技术
正确答案:A,B,D -
第4题：
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子质量，其原理是什么？
正确答案:SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶性试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。强还原剂，如β-巯基乙醇和二硫苏糖醇则能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，分子被解聚为组成它们的多肽链。解聚后的氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，这就消除了不同分子之间原有的电荷差异。蛋白质-SDS胶束在水溶液中的形状像一个长椭圆棒，椭圆棒的短轴对不同的蛋白质-SDS胶束基本上是相同的。但长轴的长度与亚基分子质量的大小成正比。因此这种胶束在SDS-PAGE系统中的电泳迁移率不再受蛋白质原有电荷的影响，而主要取决于椭圆棒的长轴的长度，即蛋白质或亚基分子质量的大小。 -
第5题：
解释琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和脉冲电泳分离核酸的原理和区别？
正确答案:琼脂糖凝胶的凝胶孔径大，适合大分子DNA电泳和需要快速简单分析的DNA电泳，电泳方式一般采用水平潜水电泳.优点是快速简单，但分辨率不是很高，对于差异较小的DNA片段难以分辨。聚丙烯酰胺凝胶电泳适宜分离鉴定低分子量蛋白质、小于1Kb的DNA片段和DNA序列分析.其装载的样品量大，回收DNA纯度高.长度仅相差0.2%（即500bp中的1bp）的核苷酸分子即能分离.一般说来，分离鉴定小于1000个核苷酸的核酸片段可用聚丙烯酰胺电泳，分离鉴定0.1-50kb的DNA片段可用恒场常规琼脂糖电泳，而分离鉴定大于50kb的DNA片段则需采用脉冲场琼脂糖电泳。 -
第6题：
问答题简述凝胶电泳的分类及其原理？正确答案： 琼脂糖凝胶电泳：一般用于核酸的分离分析。琼脂糖凝胶孔径度较大，对大部分蛋白质只有很小的分子筛效应。
聚丙烯酰胺凝胶电泳：可用于核酸和蛋白质的分离、纯化及检测。分辨率较高。解析： 暂无解析 -
第7题：
问答题SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子质量，其原理是什么？正确答案： SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶性试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。强还原剂，如β-巯基乙醇和二硫苏糖醇则能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，分子被解聚为组成它们的多肽链。解聚后的氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，这就消除了不同分子之间原有的电荷差异。蛋白质-SDS胶束在水溶液中的形状像一个长椭圆棒，椭圆棒的短轴对不同的蛋白质-SDS胶束基本上是相同的。但长轴的长度与亚基分子质量的大小成正比。因此这种胶束在SDS-PAGE系统中的电泳迁移率不再受蛋白质原有电荷的影响，而主要取决于椭圆棒的长轴的长度，即蛋白质或亚基分子质量的大小。解析： 暂无解析 -
第8题：
问答题试述聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。正确答案： 利用聚丙烯酰胺凝胶作电泳的支持物来分离蛋白质、核酸等大分子化合物的方法称为聚丙烯酰胺凝胶电泳法。聚丙烯酰胺单体（Acr）与交联剂甲叉双丙烯酰胺（Bis）在催化剂过硫酸铵或维生素B2作用下聚合交联而形成三维网状结构凝胶。在催化过程中同时加入四甲基乙二胺作为加速剂。聚丙烯酰胺凝胶不但可以作为电泳支持物，同时具有分子筛的特点，其分子筛效应的孔径可由不同浓度的凝胶进行控制，因而其分辨率和敏感性都很高。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题脉冲场凝胶电泳的原理是什么？正确答案： pulsed-fieldgelelectrophoresis（PGGE），其工作原理：DNA分子在交替变换方向的电场中做出反应所需的时间取决于它的大小。较小的分子重新定向较快，因而在凝胶中移动也较快，于是不同大小的分子被成功分离。解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题试述双向作用筒式减振器工作原理。正确答案： 1）压缩行程（即车轮靠近车架，减振器压缩）
活塞下移使其下方腔室容积减小，油压升高，此时，油液经过流通阀进入活塞上方腔室。由于活塞杆占去上方腔室一部分容积，故上腔增加的容积小于下腔室减小的容积，致使下室油液不能全部流入上室，而多余的油液则压开支承座上的压缩阀进入贮油缸筒。这些阀的节流作用即造成对悬架伸张运动的阻尼力。
2）伸张行程（即车轮离开车架，减振器拉长）
活塞上移使其上方腔室容积，油压升高，伸张阀打开，油液从上室流入下室，此时流通阀关闭，上腔内的油液便推开伸张阀流入下腔。同样由于活塞杆的存在，自上腔流来的油液还不足以充满下腔所增加的容积，下腔内产生一定的真空度，这时储油缸中的油液便推开补偿阀流入下腔进行补充。此时，这些阀的节流作用即造成对悬架伸张运动的阻尼力。解析： 暂无解析 -
第11题：
多选题以下属于蛋白质组表达模式研究的支撑技术是（）。A双向凝胶电泳
B质谱技术
C酵母双杂交
D生物信息学
E噬菌体显示技术
正确答案： A,E解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题简述2-DE（双向凝胶电泳）的基本步骤。正确答案： （1）样品制备，包括蛋白质的溶解、变性、还原以及去除蛋白质杂质等。
（2）固相pH值梯度胶（IPG）胶的制备，利用不同pH固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶。
（3）双向电泳，先作第一向电泳，再进行第二向电泳。
（4）蛋白质的染色，主要根据上样量的多少及样品进一步分析要求等加以选择，常用的方法有考马斯亮蓝染色、银染、铜染等。解析： 暂无解析 -
第13题：
蛋白质在不连续PAGE中实现分离的基本原理是什么？为什么不连续系统或连续系统的聚丙烯酸胺凝胶电泳比琼脂电泳分辨率高？
正确答案:原理：由于分离胶的孔径较小，分子量大小或分子形状不同的蛋白质通过分离胶时，所受阻滞的程度不同，因而迁移率不同而被分离。样品通过一定孔径的凝胶时，受阻滞的程度不同，小分子走在前面，大分子走在后面，各种蛋白质按分子大小顺序排列成相应的区带。
原因：由于缓冲液离子成分、带电颗粒在电场作用下，靠电荷及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应，还具有浓缩效应。 -
第14题：
琼脂凝胶电泳的原理，有什么特点。
正确答案: 基本原理：
在生理条件下，核酸分子之间糖－磷酸骨架中的磷酸基团呈离子化状态。当核酸分子被放置在电场中时，它们会向正电极方向迁移。由于糖－磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此，它们能以同样的速度向正电极方向移动，即电泳的迁移率，取决于核酸分子自身的大小和构型。它同电场的强度和电泳分子本身所携带的净电荷数成正比。
特点：
电场强度越大、电泳分子所携带的净电荷数量越多，其迁移的速度也就越快，反之则较慢。 -
第15题：
双向电泳中第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据蛋白质的哪个特点分离的？（）
- A、所带电荷
- B、等电点
- C、分子量
- D、分子形状
- E、分子大小
正确答案:C -
第16题：
简述不连续凝胶电泳的原理
正确答案:不连续凝胶电泳的凝胶由样品胶、浓缩胶和分离胶三层组成，其中样品胶处于凝胶系统最上层的大孔径凝胶，在PH6.7~6.8的Tris-HCl缓冲液中聚合而成，含有欲分离的样品，有时可以不用这层样品胶，而直接将样品与10%的甘油或5%~20%的蔗糖混合后，加到浓缩胶的表面。浓缩胶在PH6.7~6.8的Tris-HCl缓冲液中聚合而成的大孔凝胶，除了不含样品外，其他与样品胶相同，样品中的各组分就在浓缩胶中浓缩，按照迁移率的不同，在浓缩胶和分离胶的界面上压缩成层。分离胶在pH8.8~8.9的Tris-HCl缓冲液聚合而成的小孔径凝胶，凝胶的孔径根据欲分离组分的大小通过丙烯酰胺的浓度进行调节，样品中各组分在分离胶中进行分离。在酶或其他蛋白质、核酸等进行不连续凝胶电泳时，采用阴离子电泳系统（采用pH8~9的电极缓冲液，组分带负电荷）。将制备好的多层凝胶置于电泳系统中，用pH8.3的Tris-甘氨酸缓冲液作为电极缓冲液进行电泳，样品中各组分在浓缩胶中浓缩成狭窄的高浓度样品层。这是由于在各层凝胶中都含有HCl，HCl的离解度大，几乎全部成为Cl-，Cl-在电场中移动速度最快，称为快离子；在电泳槽中含有甘氨酸，在样品胶和浓缩胶中pH为6.7~6.8，甘氨酸只有0.1%~1%离解为负离子，在电场中移动速度最慢，称为慢离子；而蛋白质或核酸的移动速度介乎快离子和慢离子之间。接通电源电泳开始后，Cl-快速移动，走在最前面，在其后面形成一个离子浓度较低的低电导区，低电导产生较高的电位梯度，这种电位梯度促使蛋白质等组分和慢离子在快离子后面加速移动，致使蛋白质等组分在快、慢离子之间浓缩成一狭窄的中间层。
当这一浓缩层的样品层进入分离胶的时候，由于分离胶的pH为9.5（配制分离胶时，pH为8.8~8.9，在电泳过程中，实测结果为9.5），使甘氨酸的解离度增加，泳动速度加快，很快超过所有的蛋白质等组分，高电位梯度消失，使蛋白质等组分在均一的电位梯度下进行电泳分离，加上分离胶的孔径较小，各组分因分子大小和形状不同受到分子筛效应，使某些静电荷相同的组分也可以得到分离。 -
第17题：
简述双向凝胶电泳（二维电泳）的工作原理。
正确答案: 第一维采用等电聚集电泳。当把蛋白质加人到含有pH梯度的载体时，如果蛋白质所在位置的pH值与其等电点不同，则该蛋白质会带一定量的正电荷或负电荷，在外加强电场的作用下，蛋白分子就会分别向正极或负极泳动，直到pH值与其等电点相等的位置，蛋白质不再泳动，而浓缩成狭窄的区带。
第二维采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE.。蛋白质的电泳迁移率取决于各种蛋白质所带的静电荷、分子量的大小以及形状的不同。SDS-PAGE就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。蛋白质样品经过双向凝胶电泳两次分离后，其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状。 -
第18题：
问答题蛋白质在不连续PAGE中实现分离的基本原理是什么？为什么不连续系统或连续系统的聚丙烯酸胺凝胶电泳比琼脂电泳分辨率高？正确答案： 原理：由于分离胶的孔径较小，分子量大小或分子形状不同的蛋白质通过分离胶时，所受阻滞的程度不同，因而迁移率不同而被分离。样品通过一定孔径的凝胶时，受阻滞的程度不同，小分子走在前面，大分子走在后面，各种蛋白质按分子大小顺序排列成相应的区带。
原因：由于缓冲液离子成分、带电颗粒在电场作用下，靠电荷及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应，还具有浓缩效应。解析： 暂无解析 -
第19题：
单选题双向电泳中第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据蛋白质的哪个特点分离的？（）A所带电荷
B等电点
C分子量
D分子形状
E分子大小
正确答案： A解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题试述蛋白质双向凝胶电泳原理。正确答案： 双向凝胶电泳技术是临床蛋白质组学研究中的重要工具之一，是目前唯一可在一块凝胶上同时分离成千上万个蛋白质组分的方法。其基本原理是根据蛋白质不同分子间等电点及相对分子质量不同，通过一相的SDS-PAGE和二相的等电聚焦电泳来分离复杂的蛋白质混合物。其优点在于可以同时分离大量蛋白质，应用大面积胶条，一次可鉴定近10000个蛋白质点；可通过蛋白质点染色的强度对其进行定量分析；也可提供蛋白质翻译后修饰信息，对具有不同程度的糖基化或磷酸化修饰的蛋白质亚型能较容易地进行分离。目前，已有5000多种蛋白质成分采用2-DE技术得到很好分离。在血清中，应用2-DE可分辨出100多种血清蛋白，其高度分辨率是各种类型单向PAGE及其他电泳所无法比拟的，因此广泛用于生物大分子的分离和精确分析。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题试述双向作用式油压减震器的工作原理。正确答案： 油压减震器上端勾贝通过安装座与构架相连接，下端与轴箱相连接，勾贝将缸筒分为上下两油腔，在内外缸筒间还有一储油腔。当震动使勾贝向下移动时，下油腔的油压升高，经勾贝心阀上的节流孔流向上腔，因勾贝杆占据了上腔的一部分容积，多余的油便经进油阀的节流孔流往储油腔，从而借助工作油的粘滞阻力衰减了向下的震动。
当震动使机车向下移动时，勾贝向上移动，上腔工作油进入下腔，不足的工作油由储油腔进入下腔，从而衰减了向下的震动 。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述双向凝胶电泳（二维电泳）的工作原理。正确答案： 第一维采用等电聚集（isoelectric focusing，IEF）电泳。当把蛋白质加人到含有pH梯度的载体时，如果蛋白质所在位置的pH值与其等电点不同，则该蛋白质会带一定量的正电荷或负电荷，在外加强电场的作用下，蛋白分子就会分别向正极或负极泳动，直到pH值与其等电点相等的位置，蛋白质不再泳动，而浓缩成狭窄的区带。
第二维采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。蛋白质的电泳迁移率取决于各种蛋白质所带的静电荷、分子量的大小以及形状的不同。SDS-PAGE就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。蛋白质样品经过双向凝胶电泳两次分离后，其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题等电聚焦凝胶电泳的原理是什么？正确答案： 依据蛋白质分子的净电荷或等电点进行分离的技术。在等电聚焦过程中，电场所采用的载体两性电解质含有脂肪族多氨基多羧酸，可在电场中形成正极为酸性，负极为碱性的连续pH梯度，蛋白质分子在一个载体两性电解质（ampholyte）形成的连续而稳定的线性pH梯度中电泳，当蛋白质迁移到其等电点位置时，净电荷为零，在电场中不再移动，因此可将各种不同等电点性质的蛋白质分离开来。解析： 暂无解析