简述PCR技术的优点。
题目
简述PCR技术的优点。
相似考题
参考答案和解析
正确答案:1.灵敏度高。
2.特异性强。
3.操作简便。
4.省时。
5.原始材料质量要求低。
2.特异性强。
3.操作简便。
4.省时。
5.原始材料质量要求低。
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第1题：
简述扩增片段限制长度多态性(PCR-RFLP)技术优势。
本题答案：①分型技术简单，结果判定容易;
②电泳后不需测定片段长度，避免了测量误差，可以准确判定基因型;
③分型结果稳定，重复性好，分析结果可以用数字化形式记录保存;
④特异性好，灵敏度高，对检材质量要求低。
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第2题：
能够进行细胞内定位的DNA扩增技术是()。A、反向PCR技术
B、原位PCR技术
C、实时PCR技术
D、多重PCR技术
答案：B
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第3题：
关于PCR的叙述有误的是()A、PCR技术是一种核酸体外特异扩增技术
B、其具有敏感、特异、快速和简单等优点
C、是目前传染病实验室应急检测中应用最多的技术
D、具有酶促催化反应的高敏感性
答案：D
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第4题：
什么是PCR技术？请简述其过程。
正确答案: PCR技术（聚合酶链式反应）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。
基本过程为：
①高温解链；
②退火；
③链延伸。 -
第5题：
简述PCR技术的基本原理？
正确答案: PCR反应以待扩增DNA或RNA片段为模板，根据5’和3’端核苷酸顺序合成一对与之互补的寡核苷酸引物，将模板DNA经高温变性，低温退火，中温延伸，并在DNA聚合酶作用下，以四种单核苷酸为原料，单链DNA为模板逐步延伸，合成新链。这样每经过一个循环，DNA拷贝增加一倍，而进行25~35个循环，DNA得以快速扩增，可用于获取目的基因以及检测分析特定的基因缺失、重复、点突变等 -
第6题：
简述易错PCR技术与常规PCR技术的异同点。
正确答案:易错PCR技术是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应（PCR），使扩增得到的基因出现碱基配对错误，而引起基因突变的技术过程。
易错PCR技术与常规PCR技术有很多相同之处，都是用DNA聚合酶为催化剂，使用四种脱氧核苷三磷酸为底物，都要添加镁离子，其操作过程也相同，都经过双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸三个步骤。
（1）双链DNA的变性（解链）：将待扩增的模板DNA升温至85~95℃，使DNA双链之间的氢键断开，解离为单链DNA。
（2）引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐步降低至50~70℃时，会与其碱基互补的引物结合形成双链，引物是经过设计后人工合成的与模板DNA某一片段互补的寡核苷酸链，长度为15~30个碱基。
（3）引物延伸：引物结合后，将温度升高至70~75℃，在DNA聚合酶的作用下，以引物为起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物，以目标DNA链为模板，按照碱基配对原则，由5′-端向3′-端的方向延伸，而进行DNA复制。以上三个步骤反复进行，一般经过30次循环，即可使目的基因扩增几百万倍。
易错PCR技术与常规PCR技术的主要不同点在于反应条件有所不同。
（1）在易错PCR中镁离子浓度较高：常规PCR扩增时，镁离子浓度为0.5~2.5mmol/L，进行易错PCR时，在原有基础上提高镁离子的浓度，以稳定非互补的碱基对。
（2）在易错PCR中可以添加一定浓度的锰离子，以降低聚合酶对模板的特异性，而常规PCR不用添加锰离子。
（3）在易错PCR中四种底物（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）的浓度比改版，即采用浓度不平衡的各种底物，是DNA聚合酶在催化基因扩增时，碱基配对错误的出现频率增加，而容易引起基因突变。 -
第7题：
简述交错延伸PCR技术的原理和特点。
正确答案:这是一种简化的DNA改组法，它在PCR反应中，将含不同点突变的模板混合，随之进行多轮变性、短暂的复性/延伸，反复重复直到形成全长基因片段。
它的主要特点在于能将PCR反应中的常规的退火和延伸合二为一，大大缩短反应时间，结果得到非常短的新生链，又将经过变性的新生链作为引物与体系内同时存在的不同模板退火，继续延伸。由此生成的新生DNA分子中含有大量的突变组合，有利于酶的新性质的产生。 -
第8题：
问答题简述交错延伸PCR技术的原理和特点。正确答案： 这是一种简化的DNA改组法，它在PCR反应中，将含不同点突变的模板混合，随之进行多轮变性、短暂的复性/延伸，反复重复直到形成全长基因片段。
它的主要特点在于能将PCR反应中的常规的退火和延伸合二为一，大大缩短反应时间，结果得到非常短的新生链，又将经过变性的新生链作为引物与体系内同时存在的不同模板退火，继续延伸。由此生成的新生DNA分子中含有大量的突变组合，有利于酶的新性质的产生。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题简述PCR技术原理。正确答案： PCR（polymerasechainreaction）技术称聚合酶链反应技术，又称无细胞克隆技术，是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。其主要过程由变性、退火和延伸三个步骤反复的循环组成。首先，在高温下（95℃，5min），待扩增的DNA双链受热变性，成为两条单链DNA模板；而后在较低温度条件下（37～55℃，30s），两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链；再在高温条件下（72℃，2—5min），通过DNA聚合酶（Taq酶）作用，以引物3′端为合成起点，单核苷酸为原料，沿模板以5′—3′方向延伸，合成DNA新链。这样，每一双链的DNA模板，经过一次解链、退火和延伸三个步骤的热循环后就形成两条双链DNA分子。解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程。正确答案： 易错PCR是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链式反应，使扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
PCR：双链DNA的变性（解链）、引物与单链DNA退火结合、引物延伸。易错PCR在原有基础上提高镁离子的浓度、添加一定浓度的锰离子、改变4种底物的浓度比等反应条件，使DNA聚合酶在催化基因扩增时，增加碱基配对错误的出现频率，而引起基因突变。易错PCR技术所引起的基因突变和遗传进化仅在单一分子内发生，所以属于无性进化。解析： 暂无解析 -
第11题：
单选题对于极微量的靶序列的扩增可以采用的PCR技术是（）。A通用引物-PCR方法（general primermediated PCR，CJP-PCR）
B多重PCR（multiplex PCR）
C套式PCR（nestcd primers-polymerasc chain reaction，NP-PCR）
DAP-PCR方法（arbitrarily primcdPCR）
E原位PCR技术（in situ PCR，ISPCR）
正确答案： D解析： 通用引物PCR方法利用合成的通用引物，进行PCR反应，具有广谱检测优势，阳性率远远高于特异性引物PCR法，便于临床诊断中大量标本筛检，大范围内的流行病学调查。
多重PCR则是用几对引物在同一个PCR反应体系申进行扩增。这样可以同时扩增出几个不同专一靶区域的片段。
套式PCR要设计“外引物”及“内引物”两对引物进行连续两次PCR，可以提高PCR检测的灵敏度和特异性。
对于极微量的靶序列，一次扩增难以取得满意的效果，应用套式PCR技术可获得良好的结果。
AP-PCR方法，可快速地从两个或更多的个体组织细胞中分离出差异基因或基因差异表达产物。
原位PCR技术能在细胞涂片和组织切片上对待检的低拷贝或单拷贝数基因进行扩增。 -
第12题：
问答题简述扩增片段限制长度多态性（PCR-RFLP）技术优势。正确答案： ①分型技术简单，结果判定容易；
②电泳后不需测定片段长度，避免了测量误差，可以准确判定基因型；
③分型结果稳定，重复性好，分析结果可以用数字化形式记录保存；
④特异性好，灵敏度高，对检材质量要求低。解析： 暂无解析 -
第13题：
简述RT－PCR技术的概念及其原理。参考答案：RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。
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第14题：
PCR技术因具有灵敏度高、特异性强、操纵性简单、快捷等优点,被誉为()。参考答案：第二代DNA分型技术
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第15题：
简述双重荧光标记探针PCR技术检测HVC-RNA。
正确答案:双重荧光标记探针PCR技术除了常规PCR的一对引物外，增加了一个特异性探针。该探针携带两个波长不同的光素，在无特异性DNA存在时，探针上携带的两个荧光基因间距离太近，其中A荧光素所发射的荧光被B荧光素发射的荧光掩盖，此时在监测器上只能测定出B荧光素所发射的荧光；当特异性DNA存在时，伴随DNA扩增，荧光标记探针将被DNA多聚酶水解，A荧光素随之游离出来，A荧光素发射的荧光随之变强，动态观察荧光强度的变化，可对HCV-RNA进行较准确的定性和定量分析。 -
第16题：
简述CRRT技术的优点。
正确答案: ①血流动力学耐受性好、血浆渗透压稳定。
②能有效地控制氮质血症和电解质、酸碱平衡。
③快速清除过多液体和炎性介质。
④容易实行深静脉营养和静脉给药，通过连续超滤可调节的余地很大。 -
第17题：
何谓易错PCR技术？简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程
正确答案:指从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行PCR，使扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
过程：双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸。 -
第18题：
简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程。
正确答案:易错PCR是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链式反应，使扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
PCR：双链DNA的变性（解链）、引物与单链DNA退火结合、引物延伸。易错PCR在原有基础上提高镁离子的浓度、添加一定浓度的锰离子、改变4种底物的浓度比等反应条件，使DNA聚合酶在催化基因扩增时，增加碱基配对错误的出现频率，而引起基因突变。易错PCR技术所引起的基因突变和遗传进化仅在单一分子内发生，所以属于无性进化。 -
第19题：
问答题简述PCR相关技术及应用。正确答案： 聚合酶链反应，是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的的方法，因此也称为基因的体外扩增法。是20世纪80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点。其应用主要是以下几个方面：
（1）科学研究：
基因克隆；DNA测序；分析突变；基因重组与融合；检测基因的修饰；鉴定与调控蛋白质结构的DNA序列；转座子插入位点的绘图；合成基因的构建；构建克隆或表达载体；检测某基因的内切酶多态性等。
（2）临床诊断：
细菌、病毒、螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体、分枝杆菌等病原体的鉴定；人类遗传病的鉴定；诊断遗传疾患；临测临床标本中病原体的核酸序列；对法医学标本做遗传学鉴定；分析激活癌基因中的突变情况；生成克隆化双链DNA中的特异序列作为探针。解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题简述易错PCR技术与常规PCR技术的异同点。正确答案： 易错PCR技术是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应（PCR），使扩增得到的基因出现碱基配对错误，而引起基因突变的技术过程。
易错PCR技术与常规PCR技术有很多相同之处，都是用DNA聚合酶为催化剂，使用四种脱氧核苷三磷酸为底物，都要添加镁离子，其操作过程也相同，都经过双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸三个步骤。
（1）双链DNA的变性（解链）：将待扩增的模板DNA升温至85~95℃，使DNA双链之间的氢键断开，解离为单链DNA。
（2）引物与单链DNA退火结合：单链DNA在温度逐步降低至50~70℃时，会与其碱基互补的引物结合形成双链，引物是经过设计后人工合成的与模板DNA某一片段互补的寡核苷酸链，长度为15~30个碱基。
（3）引物延伸：引物结合后，将温度升高至70~75℃，在DNA聚合酶的作用下，以引物为起点，以四种脱氧核苷三磷酸为底物，以目标DNA链为模板，按照碱基配对原则，由5′-端向3′-端的方向延伸，而进行DNA复制。以上三个步骤反复进行，一般经过30次循环，即可使目的基因扩增几百万倍。
易错PCR技术与常规PCR技术的主要不同点在于反应条件有所不同。
（1）在易错PCR中镁离子浓度较高：常规PCR扩增时，镁离子浓度为0.5~2.5mmol/L，进行易错PCR时，在原有基础上提高镁离子的浓度，以稳定非互补的碱基对。
（2）在易错PCR中可以添加一定浓度的锰离子，以降低聚合酶对模板的特异性，而常规PCR不用添加锰离子。
（3）在易错PCR中四种底物（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）的浓度比改版，即采用浓度不平衡的各种底物，是DNA聚合酶在催化基因扩增时，碱基配对错误的出现频率增加，而容易引起基因突变。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题什么是PCR技术？请简述其过程。正确答案： PCR技术（聚合酶链式反应）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。
基本过程为：
①高温解链；
②退火；
③链延伸。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题何谓易错PCR技术？简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程正确答案： 指从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行PCR，使扩增得到的基因出现碱基配对错误，从而引起基因突变的技术过程。
过程：双链DNA的变性、引物与单链DNA退火结合、引物延伸。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题简述PCR技术的基本原理。正确答案： P.CR技术的基本原理：类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：1）模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
2）模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；3）引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。（Plateau）。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。解析： 暂无解析