简要说明MTT法的原理。
题目
简要说明MTT法的原理。
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参考答案和解析
正确答案:MTT法（四甲基偶氮唑盐比色法）其原理是活细胞内线粒体脱氢酶能将四氮唑化物（MTT）由黄色还原为蓝色的甲月替，后者溶入有机溶剂（如二甲亚砜、无水乙醇或酸化异丙醇等），浓度与活细胞成正比。其可在560nm处用酶标仪进行检测。
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②透析法的基本原理：蛋白质胶体的颗粒很大，不能透过半透膜。利用这一特性，可将混杂有低分子物质的蛋白质溶液放于半透膜袋内，以除去低分子物质、纯化蛋白质。
③超速离心法的基本原理：不同蛋白质分子量大小不同，分子形状不同，在一定的离心力场作用下沉降速率不同，故可利用此特性分离不同的蛋白质。
④盐析法的基本原理：各种蛋白质的亲水性及所带电荷均有差别，因此不同蛋白质盐析时所需盐类浓度不同。利用此—特性，逐步增加中性盐浓度使蛋白质从溶液中分段析出而分离。 -
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②透析法的基本原理：蛋白质胶体的颗粒很大，不能透过半透膜。利用这一特性，可将混杂有低分子物质的蛋白质溶液放于半透膜袋内，以除去低分子物质、纯化蛋白质。
③超速离心法的基本原理：不同蛋白质分子量大小不同，分子形状不同，在一定的离心力场作用下沉降速率不同，故可利用此特性分离不同的蛋白质。
④盐析法的基本原理：各种蛋白质的亲水性及所带电荷均有差别，因此不同蛋白质盐析时所需盐类浓度不同。利用此—特性，逐步增加中性盐浓度使蛋白质从溶液中分段析出而分离。解析： 暂无解析 -
第8题：
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1.MTT溶液的配制
用PBS液（pH7.2）或者生理盐水将MTT配成5mg／m1的溶液。（用0.2μm滤膜过滤）。
保存：于4℃避光保存。可用2周。若暂不用，可冻存。
2.实验过程：
（1）将细胞培养于96孔培养板。
（2）按不同实验要求处理细胞。
（3）每孔加入15-20μlMTT液，继续培养3～4h。
（4）吸去培养液，每孔加入200μlDMSO，在微型振荡器振荡5min，充分溶解混匀。
（5）在酶标仪上测定光吸收。测定波长为490nm，以只加培养液的的培养皿为空白对照。
3.结果分析：细胞存活率=实验组光吸收值/对照组光吸收值*100％
4.注意事项：
（1）高浓度血清可影响光吸收值，常使用含10%血清的培养液，在加入异丙醇溶液或DMSO前尽量吸净培养液。
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简要说明盐析法的基本原理
正确答案: 盐离子与水分子作用，原来溶液中大部分的自由水转变为盐离子的水化水，从而降低蛋白质极性基团与水分子之间的作用，破坏蛋白质分子表面的水化层，暴露出来的蛋白质表面疏水性区域相互结合，形成沉淀。 -
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MTT法
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试验步骤：
（1）单细胞悬液接种于96孔培养板；103-104细胞/孔，每孔培养基总量200微升（96孔培养板每孔容积370微升），37℃、5％CO2培养箱中培养一段时间
（2）加入2毫克／毫升的MTT液（50微升／孔）；继续培养3小时。
（3）吸出孔内培养液后，加入DMSO液（150微升／孔），将培养板置于微孔板振荡器上振荡10分钟，使结晶物溶解。
（4）酶标仪检测各孔OD（570nm），记录结果。
（5）绘制曲线：以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制生长曲线。
应用：MTT法简单快速、准确，广泛应用于新药筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性实验等解析： 暂无解析 -
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2） 高温高压制冷剂气体经管路流入冷凝器后，在冷凝器内散热、降温，冷凝成高温高压的液态制冷剂流出。
3） 高温高压液态制冷剂经管路进入干燥储液器内，经过干燥、过滤后流进膨胀阀。
4） 高温高压液态制冷剂经膨胀阀节流，状态发生急剧变化，变成低温低压的液态制冷剂。
5） 低温低压液态制冷剂立即进入蒸发器内，在蒸发器内吸收流经蒸发器的空气热量，使空气温度降低，吹出冷风，产生制冷效果，制冷剂本身因吸收了热量而蒸发成低温低压的气态制冷剂。
6） 低温低压的气态制冷剂经管路被压缩机吸入，进行压缩，进入下一个循环，只要压缩机连续工作，制冷剂就在空调系统中连续循环，产生制冷效果；压缩机停止工作，空调系统内制冷剂随之停止流动，不产生制冷效果。解析： 暂无解析 -
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