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第1题：
临床微生物学实验检查步骤。（检验科）
正确答案: 临床微生物学实验检查步骤：
①从患者标本分离培养微生物；
②对标本中分离到的微生物进行培养、鉴定；
③进行药物敏感性试验，解释和预报结果；
④阶段性分析药物敏感性实验，预测耐药趋势，监控和指导临床合理用药。 -
第2题：
试述细菌性疾病的微生物学诊断程序。
正确答案: 一、料的采集、保存和运送
1、采集遵循的原则：
（1）防止污染：剖检场所：应选择便于消毒、不渗水的解剖地点，最好有专门的剖检场所和剖检台 。剖检前，动物尸体应浸泡消毒；做好个人防护：剖检过程中，注意个人防护；做好个人防护：剖检过程中，注意个人防护；焚烧或深埋：剖检后动物尸体和病料焚烧灭菌或消毒深埋。
（2）无菌采样：目的：防止病料被污染；措施：所用器械和器皿必须灭菌，点燃酒精灯，注意无菌操作。
（3）适时采样：细菌丰富增殖时期、病料应该新鲜：取濒死动物或刚死亡的动物，死亡动物采集病料夏天不宜迟于6～8h，冬天不迟于24h。
（4）适当部位：根据疾病的类型和表现采集病变最典型的部位。
2、病料采集方法（不同病料不同方法）
（1）实质脏器：剖开体腔后，立即采集，置于无菌容器内；污染或剖开过久的被检器官：先烧烙表面，然后在烧烙的深部取一块实质脏器，放在灭菌容器内。如有细菌检验条件，可在剖检后直接做病料的触片染色和细菌的分离培养。
（2）液体材料：脓汁、胸水一般用灭菌的棉棒或吸管吸取放入试管内，塞好棉塞送检。血液可无菌操作从静脉或心脏采血，然后加抗凝剂（每1ml血液加3.8%枸橼酸钠0.1ml）。若需分离血清，则采血后放在灭菌的容器中，摆成斜面，待血液凝固析出血清后，再将血清吸出，置于另一灭菌试管中送检。
（3）其他病料：皮肤要取有病变且带有一部分正常皮肤的部位；被毛或羽毛要取病变明显部位，并带毛根，放平皿； 胎儿可将流产胎儿送往实验室，也可用吸管或注射器吸取胎儿胃内容物放入试管送检； 肠道及内容物只需选择病变最明显的部分，将其中内容物去掉，用灭菌水轻轻冲洗后放在平皿内。
3、病料的保存和送检
（1）保存：低温保存，4-10度；灭菌液体石蜡；30%甘油缓冲盐水。
（2）送检：尽快送检，并做好记录（畜主姓名、动物种类、地址、发病情况、欲检部位及检验项目、采集时间等）。
二、病料中细菌检查方法
（一）形态学检查
光学显微镜检查染色标本检查法，单染色法（如美蓝染色法、复红染色法等），复染色法（如革兰氏染色法、抗酸染色法等），特殊染色法（鞭毛染色法、荚膜染色法、芽 孢染色法等），不染色标本检查法（悬滴法、压滴法）。
（二）分离培养
1、细菌分离培养对细菌病诊断的意义
培养基中有无细菌生长推断是否为细菌病，菌落的特征用以判断细菌种类，为进一步的生化鉴定、血清学鉴定及动物试验获得纯培养，药敏试验。
2、分离培养方法：
（1）通常用平板培养基对细菌进行分离培养，根据细菌的培养特性选择适合目标菌生长培养基。
（2）相同条件培养的相同培养基上，不同细菌的菌落大小、形态、色泽、表面特征、边缘状态、隆起度、透明度等特征不同。有的细菌在鲜血琼脂平板上形成溶血环。
（3）也可采用选择培养基或鉴别培养基，以起到抑制杂菌或快速鉴别的效果，比如肠道杆菌科可选择麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂等。
（三）细菌的生化试验
（1）糖类分解试验：糖分解（发酵）试验、甲基红试验、V-P试验等。
（2）蛋白质类分解试验：硫化氢试验、靛基质试验等。
（3）其他类型试验：触酶试验、尿素酶试验等。
（四）动物试验
（1）将分离鉴定的细菌液接种到动物体内，观察动物发病情况，进一步确认病原。
（2）或者将可疑病料处理液接种敏感动物，以观察典型表现；将分离鉴定的细菌液接种到动物体内，观察动物发病情况，进一步确认病原；或者将可疑病料处理液接种敏感动物，以观察典型表现。
（五）血清学试验
抗原+抗体→原抗体复合物（可见反应），用已知抗体检测动物体内的病原菌，用已知的病原菌抗原检测动物血清中的抗体。临床诊断中，可用于细菌的血清分型、快速诊断或大群检疫。
（六）分子生物学方法：分子生物学技术对病原菌的快速诊断和不能人工培养的细菌的探索发挥巨大的作用。PCR技术、核酸分子杂交技术等。 -
第3题：
试述一位著名的微生物学家对微生物学的主要贡献？你从中有何启发。
正确答案: 巴斯德：发酵的实质；否定了生物的自然发生说；巴斯德消毒法；疫苗生产法。
启发：勇于实践，实践－理论－实践。勤奋。不畏权威。 -
第4题：
试述如何运用微生物学检验方法对疑霍乱患者作出病原学诊断？
正确答案: 对疑为霍乱患者，应采集"米泔水"样粪便或呕吐物快速送检，以便尽早确诊，及时隔离治疗。
微生物学检验方法如下：
①直接涂片镜检用悬滴法检查有无"鱼群"样排列、运动活泼的细菌。在样本中加入抗血清后运动消失，革兰染色为阴性。
②分离培养与鉴定常用的分离培养基为碱性琼脂平板、庆大霉素碱性平板等，对可疑菌落进行生化反应、玻片凝集试验、噬菌体裂解试验等鉴定。
③快速诊断可采用免疫荧光法协同凝集法；PCR法可检出产生霍乱肠毒素的霍乱弧菌。 -
第5题：
在21世纪，你认为微生物学最重要的研究领域是什么？试述理由。
正确答案:微生物基因组和后基因组研究；微生物多样性；微生物和环境治理的重要性；微生物之间、微生物与其他生物和微生物与环境之间的相互关系；微生物致病性和寄主免疫机制的研究。 -
第6题：
简述淋球菌感染的微生物学检查方法与防治原则.
正确答案: 淋球菌感染的微生物学检查方法与防治原则如下：
（1）标本：用无菌棉拭沾取泌尿生殖道脓性分泌物或子宫口颈表面分泌物.
（2）直接涂片染色镜检：将脓性分泌物涂片，革兰染色后镜检.淋球菌多见于白细胞内.
（3）分离培养与鉴定：将标本接种与巧克力色血琼脂平板培养基中，置37℃恒温箱在5%CO2环境中培养24h-48h，观察菌落的特征，并取菌落涂片作革兰染色镜检呈现革兰阴性双球菌即可诊断.进一步鉴定可以挑取菌落做氧化酶试验，糖发酵试验或直接免疫荧光试验等确证.
（4）PCR技术：查核酸.
防治原则：淋病是一种性传播疾病，因而是个社会问题.成人淋球菌基本上是通过性交传染，污染的毛巾，衣裤，被褥等也起一定传播作用.要防止不正当两性关系，加强道德意识的教育.对于淋球菌感染的治疗可用青霉素，淋必治，菌必治.预防新生儿淋球菌感染的脓漏眼可用1%硝酸银眼药水滴眼. -
第7题：
试述对疑为变形杆菌尿路感染的患者应进行的微生物学检查。
正确答案: (1)标本采集常采取中段尿法。
(2)检验方法取尿液沉淀或3000r/min15分钟离心后将沉淀接种于血琼脂平板分离培养；35℃18～24小时后挑取可疑菌落进行生化反应和血清学鉴定。必要时做菌落计数。
(3)检验结果①在血平板上可见迁徙生长现象；②取菌落做革兰染色，镜检见到G-杆菌；③主要鉴定试验：氧化酶试验(-)，硝酸盐还原试验(+)，触酶试验(+)，KIA：KA(-+)，脲酶(+)，苯丙氨酸脱氨酶试验(+)，MR(+)，VP(-)，枸橼酸盐利用试验(-)。 -
第8题：
问答题试述一位著名的微生物学家对微生物学的主要贡献？你从中有何启发。正确答案： 巴斯德：发酵的实质；否定了生物的自然发生说；巴斯德消毒法；疫苗生产法。
启发：勇于实践，实践－理论－实践。勤奋。不畏权威。解析： 暂无解析 -
第9题：
问答题试述对疑为变形杆菌尿路感染的患者应进行的微生物学检查。正确答案： (1)标本采集常采取中段尿法。
(2)检验方法取尿液沉淀或3000r/min15分钟离心后将沉淀接种于血琼脂平板分离培养；35℃18～24小时后挑取可疑菌落进行生化反应和血清学鉴定。必要时做菌落计数。
(3)检验结果①在血平板上可见迁徙生长现象；②取菌落做革兰染色，镜检见到G-杆菌；③主要鉴定试验：氧化酶试验(-)，硝酸盐还原试验(+)，触酶试验(+)，KIA：KA(-+)，脲酶(+)，苯丙氨酸脱氨酶试验(+)，MR(+)，VP(-)，枸橼酸盐利用试验(-)。解析： 暂无解析 -
第10题：
名词解释题简述淋球菌的检查方法。正确答案： （1）标本采集：用含无菌生理盐水的藻酸钙棉拭子，伸入男性尿道2～4cm，轻轻转动取出分泌物；女性先用无菌的脱脂棉擦去阴道内黏液，用无菌的藻酸钙脱脂棉拭子插入宫颈内1～2cm处旋转取出分泌物；患结膜炎的新生儿取结膜分泌物；全身性淋病时可取关节液或关节穿刺液；前列腺炎患者经按摩取前列腺液。（2）直接涂片：主要用于急性感染患者。涂片2张，自然干燥，加热固定后作革兰染色，油镜下观察。（3）细菌培养：标本立即接种于血琼脂或巧克力琼脂平板上，置于含5%～10%的CO孵箱，37℃孵育24～48小时后观察结果。挑选可疑菌落作涂片染色镜检。可用氧化酶试验或糖发酵试验进一步证实。解析： 暂无解析 -
第11题：
单选题淋菌性尿道炎的确诊方法是（）A淋球菌涂片检查
B淋球菌培养
CPCR
D淋球菌抗原检测
正确答案： B解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题试述炭疽病的微生物学诊断方法。正确答案： 疑似炭疽死亡动物的尸体，应尽快自末梢血管（耳尖、尾尖等）采血，涂片染色镜检，取血后应立即用烙铁将创口烙焦，以止血封口。由于病尸体内的炭疽杆菌暴露于空气中，接触了氧，气温又不适宜其生长时，就会形成芽孢，所以尸体严禁剖检。
（1）涂片镜检 取标本涂片进行革兰氏染色，发现有荚膜的呈竹节状排列的革兰氏阳性大杆菌，结合临床症状可作出初步诊断。陈旧病料可以看到“菌影”，确诊须做分离培养和动物接种。
（2）分离培养 取病料接种普通琼脂或血液琼脂，37℃培养18-24h，观察有无典型的炭疽杆菌菌落，同时革兰氏染色镜检。
（3）动物试验 将待检材料或培养物用生理盐水做适当稀释和磨匀后，皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如为炭疽，多在18-24h因败血病死亡。剖检可见注射部位皮下胶样水肿，脾脏肿大。取脏器涂片镜检，如发现有荚膜竹节状大杆菌，可确诊。
（4）血清学试验 常用炭疽环状沉淀试验（Ascoli氏反应）。方法是：在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠，若二液接触面产生灰白色沉淀环，即可诊断。解析： 暂无解析 -
第13题：
淋球菌检查常用的染色法是什么方法？
正确答案:常用的染色法是革兰氏染色法。 -
第14题：
试述鲜乳贮存过程中的微生物学的变化。
正确答案: 鲜乳贮存过程中，发生下列微生物学变化：
（1）细菌减数阶段：刚挤出的乳汁在一定时间内具有杀菌和抑菌作用，乳中微生物的总数不但不增多，反而相应减少，这一阶段持续时间因乳中所含微生物的数量及保存温度而不同。
（2）发酵产酸阶段：在杀菌作用减退的同时，存在于乳中的各种微生物开始生长繁殖，乳酸菌将乳糖发酵产生大量乳酸，使PH迅速下降，抑制其他微生物的继续生长繁殖，此时乳液出现凝块。
（3）中和阶段：由于大量乳酸的存在，使多数微生物的活动受到抑制，但霉菌和酵母菌适合在酸性环境中生长繁殖，它们不仅能分解利用乳酸和其他有机酸，还能分解蛋白质，生成碱性副产品，以中和乳中的酸，此时常可在乳汁表面看到浓厚的霉菌团。
（4）腐败分解阶段：当乳酸和其他有机酸，因酵母菌及霉菌的活动而消失，乳汁的PH由酸性变为中性或碱性时，乳中的腐败菌等重新开始活动，主要分解酪蛋白，使乳变为澄清的液体。最后，营养分解完毕，或有害物质积累到一定程度时，微生物的作用也就完全停止。此时的鲜乳不仅营养几乎完全丧失，而且会有毒性，不可食用。 -
第15题：
简述霍乱弧菌的微生物学检查方法.
正确答案: 霍乱弧菌的微生物检查法如下：
首先应采集可疑患者"米泔水"样便或呕吐物快速送检.
（1）直接涂片镜检：悬滴法检查有无"鱼群"样排列，运动活泼的细菌.革兰染色为阴性形态，呈弧形或逗点状.
（2）分离培养与鉴定：常用的培养基为碱性蛋白胨水培养基或庆大霉素碱性平板等.挑取可疑菌落可进行生化反应，玻片凝集试验等鉴定.
快速诊断：荧光菌球试验，协同凝集试验或PCR技术查核酸. -
第16题：
试述炭疽病的微生物学诊断方法。
正确答案: 疑似炭疽死亡动物的尸体，应尽快自末梢血管（耳尖、尾尖等）采血，涂片染色镜检，取血后应立即用烙铁将创口烙焦，以止血封口。由于病尸体内的炭疽杆菌暴露于空气中，接触了氧，气温又不适宜其生长时，就会形成芽孢，所以尸体严禁剖检。
（1）涂片镜检 取标本涂片进行革兰氏染色，发现有荚膜的呈竹节状排列的革兰氏阳性大杆菌，结合临床症状可作出初步诊断。陈旧病料可以看到“菌影”，确诊须做分离培养和动物接种。
（2）分离培养 取病料接种普通琼脂或血液琼脂，37℃培养18-24h，观察有无典型的炭疽杆菌菌落，同时革兰氏染色镜检。
（3）动物试验 将待检材料或培养物用生理盐水做适当稀释和磨匀后，皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如为炭疽，多在18-24h因败血病死亡。剖检可见注射部位皮下胶样水肿，脾脏肿大。取脏器涂片镜检，如发现有荚膜竹节状大杆菌，可确诊。
（4）血清学试验 常用炭疽环状沉淀试验（Ascoli氏反应）。方法是：在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠，若二液接触面产生灰白色沉淀环，即可诊断。 -
第17题：
试述对疑为乙型副伤寒沙门菌引起的肠热症患者应进行的微生物学检查。
正确答案:(1)标本采集①细菌培养用标本：第一周采血、第二周取粪便或尿液、全程取脑脊液；②血清学诊断用标本：血清。
(2)检验方法①增菌培养：血液标本可接种于胆汁葡萄糖肉汤；②分离培养：麦康凯琼脂(MAC)、SSA等肠道选择性培养基上。35℃18～24小时后取可疑菌落进行革兰染色；③生化反应；④血清学鉴定试验；⑤药敏试验。
(3)试验结果①G-杆菌；②肠道选择性培养基上形成无色的菌落；③氧化酶试验阴性，触酶试验阳性，硝酸盐试验阳性，KIA：KA(-+)、MR(+)、VP(-)，枸橼酸盐利用试验阳性；④用O、H诊断血清作最后鉴定。
(4)血清学检查肥达反应(Widaltest)。 -
第18题：
淋菌性尿道炎的确诊方法是（）
- A、淋球菌涂片检查
- B、淋球菌培养
- C、PCR
- D、淋球菌抗原检测
正确答案:B -
第19题：
目前对甲型肝炎的微生物学检查内容主要是（）和（）
正确答案:HAV抗原；抗-HAV IgM -
第20题：
问答题试述废水生物脱氮、除磷的微生物学原理。正确答案： ①生物脱氮：包括氨化、硝化和反硝化作用，即有机氮通过氨化作用转变为氨氮；氨氮通过好氧硝化作用转变成硝态氮（NO2-、NO3-）；硝态氮通过厌氧反硝化作用转化为氮气。氮气从水中逸出，达到脱氮目的。
②生物除磷：在控制厌氧－好氧交替运行条件下，利用某些微生物（“聚磷菌”）积累磷比常规活性污泥高3-7倍、通过排除富含磷的剩余污泥除磷。
控制厌氧－好氧交替运行的原因：厌氧释磷：在厌氧条件下，聚磷菌将有机态磷转化为无机态磷加以释放，并摄取废水中的有机物合成PHB颗粒。在好氧条件下，聚磷菌分解积累的PHB，释放能量；摄取磷酸盐合成ATP，大部分用于吸收无机磷酸盐合成多聚磷酸盐（异染粒）。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题试述鲜乳贮存过程中的微生物学的变化。正确答案： 鲜乳贮存过程中，发生下列微生物学变化：
（1）细菌减数阶段：刚挤出的乳汁在一定时间内具有杀菌和抑菌作用，乳中微生物的总数不但不增多，反而相应减少，这一阶段持续时间因乳中所含微生物的数量及保存温度而不同。
（2）发酵产酸阶段：在杀菌作用减退的同时，存在于乳中的各种微生物开始生长繁殖，乳酸菌将乳糖发酵产生大量乳酸，使PH迅速下降，抑制其他微生物的继续生长繁殖，此时乳液出现凝块。
（3）中和阶段：由于大量乳酸的存在，使多数微生物的活动受到抑制，但霉菌和酵母菌适合在酸性环境中生长繁殖，它们不仅能分解利用乳酸和其他有机酸，还能分解蛋白质，生成碱性副产品，以中和乳中的酸，此时常可在乳汁表面看到浓厚的霉菌团。
（4）腐败分解阶段：当乳酸和其他有机酸，因酵母菌及霉菌的活动而消失，乳汁的PH由酸性变为中性或碱性时，乳中的腐败菌等重新开始活动，主要分解酪蛋白，使乳变为澄清的液体。最后，营养分解完毕，或有害物质积累到一定程度时，微生物的作用也就完全停止。此时的鲜乳不仅营养几乎完全丧失，而且会有毒性，不可食用。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题试述细菌性疾病的微生物学诊断程序。正确答案： 一、料的采集、保存和运送
1、采集遵循的原则：
（1）防止污染：剖检场所：应选择便于消毒、不渗水的解剖地点，最好有专门的剖检场所和剖检台 。剖检前，动物尸体应浸泡消毒；做好个人防护：剖检过程中，注意个人防护；做好个人防护：剖检过程中，注意个人防护；焚烧或深埋：剖检后动物尸体和病料焚烧灭菌或消毒深埋。
（2）无菌采样：目的：防止病料被污染；措施：所用器械和器皿必须灭菌，点燃酒精灯，注意无菌操作。
（3）适时采样：细菌丰富增殖时期、病料应该新鲜：取濒死动物或刚死亡的动物，死亡动物采集病料夏天不宜迟于6～8h，冬天不迟于24h。
（4）适当部位：根据疾病的类型和表现采集病变最典型的部位。
2、病料采集方法（不同病料不同方法）
（1）实质脏器：剖开体腔后，立即采集，置于无菌容器内；污染或剖开过久的被检器官：先烧烙表面，然后在烧烙的深部取一块实质脏器，放在灭菌容器内。如有细菌检验条件，可在剖检后直接做病料的触片染色和细菌的分离培养。
（2）液体材料：脓汁、胸水一般用灭菌的棉棒或吸管吸取放入试管内，塞好棉塞送检。血液可无菌操作从静脉或心脏采血，然后加抗凝剂（每1ml血液加3.8%枸橼酸钠0.1ml）。若需分离血清，则采血后放在灭菌的容器中，摆成斜面，待血液凝固析出血清后，再将血清吸出，置于另一灭菌试管中送检。
（3）其他病料：皮肤要取有病变且带有一部分正常皮肤的部位；被毛或羽毛要取病变明显部位，并带毛根，放平皿； 胎儿可将流产胎儿送往实验室，也可用吸管或注射器吸取胎儿胃内容物放入试管送检； 肠道及内容物只需选择病变最明显的部分，将其中内容物去掉，用灭菌水轻轻冲洗后放在平皿内。
3、病料的保存和送检
（1）保存：低温保存，4-10度；灭菌液体石蜡；30%甘油缓冲盐水。
（2）送检：尽快送检，并做好记录（畜主姓名、动物种类、地址、发病情况、欲检部位及检验项目、采集时间等）。
二、病料中细菌检查方法
（一）形态学检查
光学显微镜检查染色标本检查法，单染色法（如美蓝染色法、复红染色法等），复染色法（如革兰氏染色法、抗酸染色法等），特殊染色法（鞭毛染色法、荚膜染色法、芽 孢染色法等），不染色标本检查法（悬滴法、压滴法）。
（二）分离培养
1、细菌分离培养对细菌病诊断的意义
培养基中有无细菌生长推断是否为细菌病，菌落的特征用以判断细菌种类，为进一步的生化鉴定、血清学鉴定及动物试验获得纯培养，药敏试验。
2、分离培养方法：
（1）通常用平板培养基对细菌进行分离培养，根据细菌的培养特性选择适合目标菌生长培养基。
（2）相同条件培养的相同培养基上，不同细菌的菌落大小、形态、色泽、表面特征、边缘状态、隆起度、透明度等特征不同。有的细菌在鲜血琼脂平板上形成溶血环。
（3）也可采用选择培养基或鉴别培养基，以起到抑制杂菌或快速鉴别的效果，比如肠道杆菌科可选择麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂等。
（三）细菌的生化试验
（1）糖类分解试验：糖分解（发酵）试验、甲基红试验、V-P试验等。
（2）蛋白质类分解试验：硫化氢试验、靛基质试验等。
（3）其他类型试验：触酶试验、尿素酶试验等。
（四）动物试验
（1）将分离鉴定的细菌液接种到动物体内，观察动物发病情况，进一步确认病原。
（2）或者将可疑病料处理液接种敏感动物，以观察典型表现；将分离鉴定的细菌液接种到动物体内，观察动物发病情况，进一步确认病原；或者将可疑病料处理液接种敏感动物，以观察典型表现。
（五）血清学试验
抗原+抗体→原抗体复合物（可见反应），用已知抗体检测动物体内的病原菌，用已知的病原菌抗原检测动物血清中的抗体。临床诊断中，可用于细菌的血清分型、快速诊断或大群检疫。
（六）分子生物学方法：分子生物学技术对病原菌的快速诊断和不能人工培养的细菌的探索发挥巨大的作用。PCR技术、核酸分子杂交技术等。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题试述如何运用微生物学检验方法对疑霍乱患者作出病原学诊断？正确答案： 对疑为霍乱患者，应采集"米泔水"样粪便或呕吐物快速送检，以便尽早确诊，及时隔离治疗。
微生物学检验方法如下：
①直接涂片镜检用悬滴法检查有无"鱼群"样排列、运动活泼的细菌。在样本中加入抗血清后运动消失，革兰染色为阴性。
②分离培养与鉴定常用的分离培养基为碱性琼脂平板、庆大霉素碱性平板等，对可疑菌落进行生化反应、玻片凝集试验、噬菌体裂解试验等鉴定。
③快速诊断可采用免疫荧光法协同凝集法；PCR法可检出产生霍乱肠毒素的霍乱弧菌。解析： 暂无解析